两例犬埃里希氏体病的诊断与治疗
2016-08-08师福山
朱 国,师福山
(1.浙江大学动物医院,浙江杭州 310058; 2.浙江大学动物科学学院)
宠物诊疗
两例犬埃里希氏体病的诊断与治疗
朱国1,2,师福山2*
(1.浙江大学动物医院,浙江杭州 310058; 2.浙江大学动物科学学院)
犬埃里希氏体病由埃里希氏体感染所致、致死率较高。该病最早发现于非洲阿尔及利亚,多以蜱为传染媒介,常见于热带和亚热带地区[1-2]。
笔者曾在临床诊疗中诊治过两例疑似犬埃里希氏体感染病例,抗体检测均为阳性,经治疗后临床症状消失,患犬恢复良好,现报告如下,供参考。
1发病情况
萨摩耶犬。雌性,7岁。就诊时食欲减退,精神不振,呼吸困难,一年前曾有蜱虫感染史,出现两侧鼻腔出血,经外用止血后好转,最近又反复发作5次。
苏格兰牧羊犬。雄性,5岁。就诊时精神状况良好,饮食正常,两侧鼻腔反复出现出血。半年前曾有蜱虫感染史。
2临床症状
该病临床症状一般表现为发热、食欲减退、鼻衄、眼鼻分泌物增多、呼吸困难、贫血、血小板较少和高球蛋白血症等症状[3-4]。
萨摩耶犬。就诊时体温41℃,可视黏膜轻度苍白,呼吸急促,有心杂音。
苏格兰牧羊犬。就诊时体温39℃,可视黏膜颜色正常,呼吸平缓,鼻腔粘膜充血。
3实验室检查
3.1血常规检查前肢静脉采血1 mL,EDTA抗凝,采用爱德仕动物专用全自动五分类血球仪进行血常规检查,结果详见表1。
表1 血常规检查结果
由表1可见,萨摩耶犬结果显示贫血,嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞升高,血小板降低严重;苏格兰犬结果显示轻度贫血,血小板减低。
3.2血液生化检查前肢静脉采血3 mL,肝素锂抗凝,离心后分离血浆,采用爱德仕动物专用全自动生化仪进行血液生化检查,结果详见表2。
由表2可见,萨摩耶犬结果显示有氮血症,肝脏指标轻度上升,高球蛋白血症,表明肝肾功能损伤;苏格兰牧羊犬结果显示有球蛋白血症,其余正常。
3.3B超检查对两患犬进行腹部B超检查,均可见有明显脾脏肿大。结果见图1、图2。
表2 血液生化检查结果
图1 苏格兰牧羊犬脾脏肿大,尾端钝圆
图2 萨摩耶犬脾脏回声增强肿大,尾端延至膀胱
3.4犬埃里希氏体抗体检测前肢静脉采血3 mL,肝素锂抗凝,离心后分离血浆,采用爱德仕犬埃里希氏体间接荧光抗体测定,两患犬结果均为埃里希氏体抗体阳性。详见图3。
图3 犬埃里希氏体抗体显示为阳性
4治疗方法
萨摩耶犬。输液纠正氮血症,保肝补血,多西环素5 mg/kg口服,每日两次,1周后症状好转,饮食正常,肝肾功能指标正常,血小板低症较前次检测有所上升。继续口服多西环素,2周后指标恢复正常。连续口服多西环素4周,未见症状反复,停药。
苏格兰牧羊犬。由于精神状态良好,给予多西环素5 mg/kg口服,每日两次,开始服药后1周内曾出现两次鼻血现象,连续口服3周,未再出现鼻血现象,复查血常规及肝肾功能正常。
5小结与讨论
5.1病原学与流行特征犬埃里希氏体病,国内译作犬埃立克体病,包括犬单核细胞埃里希体病和犬粒细 胞埃里希体病,是一种以泛血细胞和血小板计数减少、血相异常、出血、消瘦、多数脏器浆细胞浸润和骨髓造血干细胞减少为主要特征的败血性传染病。1935年Donatien等在阿尔及利亚首次发现该病,当时称犬立克次氏体症, 1982年Keefe等报道世界范围内的犬科动物都存在犬埃里希氏体感染,1984年在美国首次发现并确诊人感染犬埃里希氏体病例,1999年潘华等曾报道称中国军犬出现该病并成功分离到了病原体[5]。1991年曾在我国云南人群和犬群血液中查出抗查菲埃立克体抗体[6], 但至今未见病例报道。
早在1970年就已证实了血红扇头蜱是犬埃里希氏休病的传播媒介,当幼蜱和若蜱叮咬感染犬时即可感染病原,且当幼、若蜱蜕皮发育成成虫后,可将其所带的埃里希氏体感染健康犬,但有报道在40只感染雌蜱中无蜱虫可将犬埃里希氏体感染其后代。上述研究表明血红扇头蜱只是犬埃里希氏体的传播媒介,而不是宿主[7]。犬埃里希氏体病多发于夏季和秋季,这种季节性的发病规律可能与蜱的活动规律、数量增加及传播有关。
但因部分慢性感染犬的存在,因此在每年的其它季节也可诊断到该病。笔者诊疗到的两病例都是秋季发病,但蜱虫感染史至少均在半年以前。
5.2临床症状感染该病的患犬均表现为发热,急性感染期则轻度血小板减少和血管炎,通常可引起瘀点或其他明显的出血症状。慢性感染期则出现血小板减少、血管炎和血小板功能异常等。慢性感染期由于免疫刺激可引起肝肿大、脾肿大和淋巴结病变等症状。
非特异性化脓性多发性关节炎病犬表现四肢僵直,运动不耐受和肿胀性关节痛。中枢神经系统症状包括精神沉郁、疼痛、共济失调、轻瘫、眼球震颤和癫痫等[8]。
病犬血液生化检查常见有高球蛋白血症,血白蛋白减少,白蛋白/球蛋白比降低,1/3以上患犬血清碱性磷酸酶和丙氨酸转氨酶活性增高,约有1/4患犬血清尿氮、肌酸酶和磷值升高,大多患犬有氮血症[7]。
病理变化,犬埃里希氏体进入机体后,可以包涵体形式寄生于患犬的嗜中性粒细胞和单核细胞内,造成机体免疫系统损伤,并在肝脏内引起网状内皮细胞增生[9]; 感染后期可引起骨髓[10]、 淋巴结[11]及肾脏[9]病变。王衡等从病死患犬的病理组织学观察发现有典型的肾小球周围浆细胞增生性肾炎、间质性浆细胞增生性肾炎、浆细胞增生性淋巴结炎、出血性浆细胞增生性脾炎以及急性坏死性浆细胞增生性肝炎等变化[12]。
本次诊疗的两例患犬中,一例出现习惯性鼻衄、呼吸困难、发热、食欲减退、脾肿大和生化指标异常等典型症状;而另一例只出现习惯性鼻衄、脾肿大、血小板减少和高球蛋白血症等症状。
5.3实验室诊断
血液直接涂片检查。采集患犬初期或高热期血液,涂片固定,姬姆萨染色镜检,在单核细胞和嗜中性粒细胞中可见染成紫色或黑色埃里希氏体形成的包涵体,圆形或椭圆形,称为桑椹胚。
病原分离鉴定。病原分离培养仍是确证和鉴定埃里希氏体感染的重要手段之一,采集病犬急性期或高热期外周血,分离白细胞,经超声波破碎细胞后,接种于商品化的人单核细胞或犬巨噬细胞系,培养后用电镜检查感染细胞胞浆中的包涵体。 埃里希氏体在培养细胞内生长缓慢,接种细胞需培养1~2周后经涂片和染色,才能在光镜下观察到由其生成的包涵体[5]。但是这种方法效率低且费用高,无很高的临床应用价值。
免疫荧光抗体检查病原体。诊断埃里希氏体病的首选是免疫血清学方法,如间接免疫荧光法、 补体结合试验及ELISA等 。抗体效价在发病后的2~3周达到高峰,若双份血清效价增高4倍以上即可确诊。笔者曾用IDEXX公司的ELISA试剂盒检测犬埃里希氏体抗体,两患犬均出现了与犬埃里希氏体病一致的临床症状,用药治疗后相应临床症状消失,所以两患犬最终诊断为犬埃里希氏体病。根据IDEXX公司介绍,犬四合一快速检测试剂盒与犬埃里希氏体间接荧光抗体试验对照,其结果相对敏感度为97.8%,相对特异性为92.3%,所以试剂盒对诊断犬埃里希氏体病非常实用。
PCR检测。根据Genebank中犬埃里希氏体的16S rRNA基因序列设计合成一对特异性引物,从病犬血标本或接种的细胞悬液中提取DNA作为PCR扩增模板, 反应体系经PCR仪扩增后,扩增产物在1.4%琼脂糖凝胶中电泳后用溴化乙锭染色,紫外灯下观察结果,发现389 bp大小的扩增片段即可确诊[5]。
5.4治疗与预防
根据临床症状给予支持疗法,可用四环素、多西环素和米多卡二丙酸盐等多种抗生素进行治疗。笔者曾用多西环素按5 mg/kg体重,每天两次口服,连用4周,取得了良好的治疗效果。
治疗效果检测。抗体效价不能有效的监控治疗情况,美国兽医内科学院传染病研究院小组建议以血小板减少症和高球蛋白血症的小腿为标志,可监控病原体的消除情况。如果用PCR进行评价治疗效果,应在停止治疗2周后重复一次检查,若仍为阳性,则应重新治疗4周,然后再检测;如果2个治疗周期后PCR检测仍为阳性,那么就应选用其他抗埃里希氏体病的药物进行治疗[8]。
埃里希氏体病有可能出现免疫介导性疾病引发的红细胞或血小板破坏,因此建议用抗炎剂量或免疫抑制剂量的糖皮质激素,以改善患犬状况。
预防措施。尽管人类不会在处理感染犬的过程中感染埃里希氏体病,但是犬可能是病原体的宿主,在人类被感染过程中,犬可能扮演了将传播媒介带入人类生活环境的角色。
蜱是本病的传播媒介,因此防止蜱感染是防止犬埃里希氏体病的关键。此外,应尽量避免对犬采用不合格的方式输入全血或血液制品,以防犬体感染。
美国Liangbiao Hu等人已于2004年和2005年两次申请了制造犬埃里希氏体灭活苗的两项专利,但到目前为止世界上还没有商品化的犬埃里希氏体疫苗可供使用。
参考文献
[1]Sacchini F,Cessford R J, Robinson B M, Outbreak of canine monocytic ehrlichiosis in Saudi Arabin [J]. Vet Clin Pathol,2007,36(4):331-335.
[2]Irwin P J . The first report of canine ehrlichiosis in Australia. Aust Vet [J]. 2001, 79(8): 552-553.
[3]Breitschwerdt E B, Woody B J, Zerbe C A,et al . Monoclonal gammopathy associated with naturally occurring canine ehrlichiosis [J]. J Vet Intern Med, 1987,1(1):2-9.
[4]Shipov A, Klement E, Reuveni-Tager L, et al. Prognostic indicators for canine monocytic ehrlichiosis [J].Vet Parasitol,2008,153(1-2):131-138.
[5]郑立仪,朱恩炯,刘建红.犬埃里希体病的诊治和预后[J].上海畜牧兽医通讯. 2011,2:64-66.
[6]于恩庶,林继煌,陈观今,等.中国人兽共患病学[M].2版.福州:福建科学技术出版社,1996.562- 566.
[7]于维军,赵乃明.埃里希氏体病研究进展[J].中国兽医科技.1993,23(8):18-21.
[8]Nelson Richard W,Couto C,Guillermo.小动物内科学[M].3版.夏兆飞,张海彬,袁占奎.译.北京:中国农业大学出版社,2012:1219-1223.
[9]Reardon M J, Pierce K R. Acute experimental canine ehrlichiosis . I. Sequential reaction of the hemic and lymphoreticular systems [J].Vet Pathol,1981,18(1):48-61.
[10]Kuehn N F, Gaunt S D. Clinical and hematologic findings in canine ehrlichiosis [J]. J Am Vet Med Assoc,1985,186(4):355-358.
[11]Mylonakis M E, Borjesson D L, Leontides L, et al. Cytologic patterns of lymphadenopathy in canine monocytic ehrlichiosis [J]. Vet Clin Pathol, 2011, 40(1) :78-83
[12]王衡,宁章勇,远立国等.犬埃里希氏体病的病例组织学观察[J]. 中国兽医杂志.2011(47),10:64-65.
收稿日期:2016-01-07
作者简介:朱国(1981-),兽医师,博士,研究方向:小动物疾病。E-mail:31364705@qq.com
通讯作者:师福山,讲师,研究方向:小动物疾病。
中图分类号:S858.292
文献标识码:B
文章编号:1005-7307(2016)04-0035-004