2015年浙江省兽医系统实验室检测能力比对结果分析

吴贇竑，周彩琴，孙冰冰，吴雪军，张红丽，刘爱军，柴　娟，赵灵燕

(浙江省动物疫病预防控制中心，浙江杭州 311199)



试验研究

2015年浙江省兽医系统实验室检测能力比对结果分析

吴贇竑，周彩琴，孙冰冰，吴雪军，张红丽，刘爱军，柴娟，赵灵燕

(浙江省动物疫病预防控制中心，浙江杭州 311199)

摘要：为提高浙江省各级兽医系统实验室的检测能力，对省内40个兽医实验室H7N9流感病毒抗体检测(H7N9-AI Ab)，A型口蹄疫病毒抗体检测(A-W Ab)和小反刍兽疫病毒检测(PPRV)比对。结果表明，参加比对的40个兽医实验室中有28个实验室H7N9-AI Ab比对，正确率为70.00%；有37个实验室A-W Ab比对，正确率为92.50%；有16个实验室PRRV比对，正确率为80.00%。

关键词：检测能力；H7N9-AI Ab；A-W Ab；PRRV；兽医实验室

中国合格评定国家认可委员会在ISO/IEC导则43中将实验室间比对定义为：按照预先规定的条件，由两个或多个实验室对相同或类似被测物品进行检测的组织、实施和评价。开展实验室比对试验不仅能提高和促进实验室的检测能力，行业主管部门还能监控实验室的检测能力，从而做到识别和缩小实验室之间检测结果的差异[1]。而且，通过实验室间比对，还能监控已建立测量方法的有效性和可比性，识别实验室的问题以采取纠正措施[2]。本文所指的兽医系统实验室是指隶属于各级兽医主管部门，承担动物疫病诊断、检测和监测等任务的兽医实验室[3]。开展兽医实验室检测能力比对，是评价兽医实验室检测技术水平的重要手段，也是加强兽医实验室质量控制的有效方法[4]。

为提高浙江省各级兽医系统实验室的检测能力，依据农业部办公厅和浙江省畜牧兽医局有关2015年兽医系统实验室检测能力比对工作的文件要求[5-6]，浙江省畜牧兽医局于2015年8月组织开展浙江省兽医实验室检测能力比对工作。全省共有40个市、县、区兽医系统实验室参加，并在规定时间内完成了所有比对项目并上报结果。比对结果能客观反应实验室的检测水平和技术，对比对结果进行分析能进一步做好实验室管理工作[3]。

1材料与方法

1.1比对项目根据浙江省畜牧兽医局有关2015年兽医系统实验室检测能力比对工作的文件要求[6]，该次比对共设置3个项目，分别为H7N9流感病毒抗体检测(H7N9-AI Ab)、A型口蹄疫病毒抗体检测(A-W Ab)和小反刍兽疫病毒检测(PPRV)。

1.2比对方法比对各项目所采用的方法，依据标准及所用试剂详见表1。

表1　比对试验的标准、方法和试剂

注：*具备荧光RT-PCR或RT-PCR检测能力的实验室需参加此项能力比对，不具备该检测能力的实验室无需参加；**根据实验室能力范围选择使用RT-PCR荧光，还是RT-PCR方法。其中7个实验室采用RT-PCR荧光方法，13个实验室采用普通RT-PCR方法。

1.3比对样品进行比对的血清及病毒样品均已进行效价定量和病毒定性试验。

1.3.1H7N9-AI Ab样品参考值为<1、7、9、11的鸡血清中随机抽取5份组成1组样品。

1.3.2A-W Ab样品参考值为<1∶8、1∶180、1∶720的牛血清中随机抽取5份组成1组样品。

1.3.3PRRV样品参考值为阳性、弱阳性和阴性的病毒样品中随机抽取6份组成1组样品。

1.4评判标准

1.4.1H7N9-AI Ab评判标准全部比对样品检测值效价在参考值效价±1(包括±1)范围内，判为结果正确；有一个及以上样品检测值偏离参考值±2及以上，判为比对结果存在较大偏差。

1.4.2A-W Ab评判标准全部比对样品检测值效价在参考值效价±1(包括±1)范围内，判为结果正确；有一个及以上样品检测值偏离参考值±1以上，判为比对结果存在较大偏差。

1.4.3PRRV评判标准小反刍兽疫病毒检测结果与参考值完全一致，判为结果正确；与参考值不一致，判为比对结果存在较大偏差。

2结果与分析

2.1总体结果根据检测结果评判，参加比对的40个兽医实验室中有22个实验室参加的所有比对项目检测结果全部正确，其中4个实验室全部比对项目的检测结果与参考值完全一致。有17个实验室有1个比对项目存在较大偏差，有1个实验室有2个比对项目部分比对检测值存在较大偏差。

2.2H7N9-AI Ab比对结果该项目共有28个实验室对5份样品检测结果全部正确，实验室比对正确率为70.00%。12个实验室的部分样品检测值与参考值存在较大偏差(详见表2)。

表2　H7N9-AI Ab比对试验结果

2.3A-W Ab比对结果该项目共有37个实验室对5份样品检测结果全部正确，实验室比对正确率为92.50%。3个实验室的部分样品检测值与参考值存在较大偏差(详见表3)。

表3　A-W Ab比对试验结果

2.4PRRV比对结果该项目共有16个实验室对6份样品检测结果全部正确，实验室比对正确率为80.00%。7个采用荧光RT-PCR方法的实验室检测结果全部正确，采用普通RT-PCR方法的13个实验室中，有4个实验室的部分样品检测值与参考值存在较大偏差(详见表4)。

表4　PRRV比对试验结果

3小结与讨论

本次兽医系统实验室检测能力比对总体情况良好，其中22个实验室参加的所有比对项目检测结果全部正确，三项比对项目的正确率均达到70%或以上；有4个实验室全部比对项目的检测结果与参考值完全一致，说明全省大部分市、县、区兽医实验室具备相应动物疫病的检测能力和技术水平。

本次比对试验中，在需要经验进行主观判断的检测项目中，出现了比需要客观判断的项目存在更多偏差，例如H7N9流感抗体血凝抑制试验中，有30%实验室出现部分比对样品检测值与参考值存在较大偏差，而相对的A型口蹄疫病毒抗体检测(A-W Ab)，其正确率则达到92.50%。同样，在小反刍兽疫病毒检测中，采用荧光RT-PCR方法检测的实验室，其正确率为100%，而使用普通RT-PCR方法检测的实验室其正确率仅为69.23%(9/13)，这些需要主观判断的项目对实验室人员的操作水平，经验和判断能力提出了更高要求，说明部分实验室在需要主观判断的项目中还存在着操作失误、经验不足等问题。

本次比对试验中，设置了参考值完全相同的平行样品，部分实验室检测结果的平行性则相对较差，对参考值一致的不同编号样品检测出不同的结果，说明部分实验室在检测中存在较多的随机误差，实验过程中对于细节的把握尤为重要，应明确试验操作流程，规范试验操作，以确保实验室检测结果的稳定性。

另外，虽然本次比对试验中各实验室报告和原始记录的规范程度有所提高，但仍有部分实验室的原始记录中，出现所填检测结果未按说明书要求进行表述、对错误结果进行涂改等现象，个别实验室出具的检测报告中出现的样品原始编号和上报结果中的编号不一致等错误现象，有待进一步改进。

参考文献

[1]王国勤，钟淮滨.实验室比对试验的做法与体会[J].计量与测试技术，2011，38(10)：90-92.

[2]戴润生.计量管理基础知识系列讲座：第八讲，比对和能力验证[J].中国计量，2008(8)：43-47.

[3]董昕欣，刘伟，邴国霞等.2014年全国省级兽医系统实验室检测能力比对结果分析[J].中国兽医杂志，2014,50(10)：101-103.

[4]王文，张继红，兰玲等.2010年新疆兽医系统实验室检测能力比对试验的探讨与建议[J].中国动物检疫，2011,28(9)：19-21.

[5]农业部办公厅.农业部办公厅关于开展2015年兽医系统实验室检测能力比对工作的通知[Z].农办医〔2015〕7号.北京：农业部办公厅，2015-03-03.

[6]浙江省畜牧兽医局.关于印发《2015年全省兽医系统实验室检测能力比对实施方案》的通知[Z].浙牧疫发〔2015〕27号.浙江：浙江省畜牧兽医局，2015-05-14.

收稿日期：2015-12-08

中图分类号：S854.4

文献标识码：A

文章编号：1005-7307(2016)04-0001-003