急性胆囊炎患者手术前后血清炎性因子水平变化的临床意义

马青松　张云芬



·论著·

急性胆囊炎患者手术前后血清炎性因子水平变化的临床意义

马青松张云芬

064400河北省迁安市中医医院检验科(马青松)，特需病区(张云芬)

【摘要】目的检测急性胆囊炎患者血清白介素-8(IL-8)、白介素-15(IL-15)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、内毒素、超氧化物歧化酶(SOD)手术前后水平的变化情况，并分析其意义。方法选取经临床和影像学(B超，CT)诊断确诊急性胆囊炎并行胆囊切除手术的患者300例为病例组，同时选取年龄性别相匹配的健康体检人100例为对照组。检测病例组患者术前、术后第7天及对照组血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)、钙(CA)等指标的水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测各组血清IL-8、IL-15、hs-CRP、内毒素、SOD的水平。结果与对照组比较，病例组患者TC、TG、TBIL、IBIL、CA的水平明显高于正常对照组(P<0.05)。病例组患者术前血清IL-8、IL-15、hs-CRP、内毒素水平明显高于对照组(P<0.05)；术后第7天血清IL-8、IL-15、hs-CRP、内毒素水平逐渐下降，但仍高于正常对照组(P<0.05)；血清SOD水平术前则明显低于正常对照组(P<0.05)，术后第7天血清SOD水平逐渐升高，但仍低于正常对照组(P<0.05)。结论急性胆囊炎患者有明显的应激反应存在，持续时间较长。动态监测IL-8、IL-15、hs-CRP、内毒素、SOD水平变化有助于急性胆囊炎的严重程度的判断及临床治疗。

【关键词】急性胆囊炎；炎症因子；应激；手术

胆囊炎有急慢性之分，胆囊炎多数为慢性，急性胆囊炎多是慢性胆囊炎的急性发作。慢性胆囊炎起病缓慢，症状多样，轻重程度各异，反复发作、容易误诊为胃炎或消化不良而延误治疗[1-3]。目前用于胆囊炎病情评价的外周血指标还不确定，如果能找到一种或几种炎性因子或指标用于提示胆囊炎的病情、治疗效果等，可以为临床治疗提供依据。超敏C-反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)[4]、白介素-8(interleukin-8, IL-8)[5]、IL-15[6]是急性时相反应因子，炎症早期即开始升高，炎症消除则迅速下降。内毒素是感染细菌死亡溶解释放出来的脂多糖，是毒性物质的总称，炎症发生时会明显上升[7]。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，抑制炎症的发生发展[8]。已有研究证实炎症时这些因子的变化情况，但这些指标在胆囊炎中的报道很少。本研究以及性胆囊炎患者为研究对象，检测了急性胆囊炎患者术前、术后第7天血清胆固醇(total cholesterol, TC)、三酰甘油(triglyceride, TG)、总胆红素(total bilirubin, TBIL)、间接胆红素(indirect bilirubin, IBIL)、钙(calcium, CA)等生化指标的水平，还检测了IL-8、IL-15、hs-CRP、内毒素、SOD的水平，对其意义进行分析。

1资料与方法

1.1一般资料选取2012年1月至2015年12月于我院行手术治疗的急性胆囊炎患者300例(病例组)，其中男171例，女129例；年龄34～72岁，平均年龄(57±14)岁;患者术前均经临床和影像学(B超，CT)诊断为急性胆囊炎，行胆囊切除术，术后病理确诊为急性胆囊炎。同时选取性别比、年龄相匹配的正常体检者100例作为正常对照(对照组)。所有入选者均自愿签署知情同意书，并得到本院医学伦理委员会的批准。

1.2主要试剂及仪器瑞士Roche公司E601型全自动电化学发光免疫分析仪、美国Beckman公司AU5800全自动生化分析仪、酶免之星全自动免疫分析仪。IL-8 ，IL-15、内毒素试剂盒为美国R&D公司产品，hs-CRP检测试剂盒为德国DiaSys公司产品，SOD试剂盒为美国Biovision 公司 (货号：K335-100)产品。

1.3标本采集所有入选者晨起空腹抽取静脉血8 ml，室温静置30 min后，3 500 r/min离心15 min，分离血清。手术组在术前1 d、术后第7天各采血1次。对照组采血1次。

1.4生化指标及hs-CRP浓度的检测严格遵守仪器操作规程，用酶法检测血清TC、TG、用法检测CA、用法检测总胆红素(TBIL)、用速率散射比浊法检测hs-CRP，采用的仪器为美国BEKMAN公司的AU5800全自动生化分析仪。

1.5ELISA法检测外周血中IL-8、IL-15、内毒素、SOD的表达操作步骤严格依据试剂盒的说明书操作，检测IL-8 ，IL-15、内毒素、SOD表达水平。IL-8、IL-15、内毒素试剂盒购自美国R&D公司，SOD试剂盒购自美国Biovision 公司，板内CV均<5%、板间CV均<10%,用德国酶免之星全自动酶免分析仪上检测吸光度(A450)。

2结果

2.12组血清生化指标比较病例组术前、术后第7天组与正常组比较，血清生化指标TC、TG、TBIL、IBIL、CA的水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。病例组术前与病例组术后第7天的结果相比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　病例组术前、术后7天与对照组生化指标的变化情况　±s

注：与对照组比较，*P<0.05

2.22组血清hs-CRP、IL-8、IL-15、内毒素、SOD水平比较病例组术前患者血清hs-CRP、IL-8 ，IL-15、内毒素的水平明显高于正常对照组(P<0.05)，术后第7天患者血清hs-CRP、IL-8 ，IL-15、内毒素的水平较术前水平有明显的下降(P<0.05)，但仍高于正常对照组(P<0.05)。病例组术前患者SOD水平明显低于正常对照组(P<0.05)，术后第7天患者血清SOD水平较手术前有明显的回升(P<0.05)，但仍然低于正常对照组(P<0.05)。见表2。

组别IL-8(pg/ml)内毒素(EU/ml)IL-15(ng/L)hs-CRP(mg/L)SOD(U/ml)对照组(n=100)1.1±0.30.4±0.16.2±1.24.7±0.6195±37病例组(n=300) 术前4.8±0.4*1.7±0.5*28.0±2.0*75.6±11.1*108±20* 术后第7天2.0±0.4*#0.9±0.3*#11.5±1.7*#11.5±2.8*#75±17*#

注：与对照组比较，*P<0.05；与术前比较，#P<0.05

3讨论

手术是目前急性胆囊炎的主要解决方法，但手术只能处理局部病变，全身状况的评价还需要综合分析并根据情况进行干预。因此通过检测一些炎性因子预测急性胆囊炎的发生发展可为患者提供选择的机会，较少手术和后遗症的风险。

在我们的研究中，病例组患者血清中TC、TG、TBIL、IBIL、CA的水平明显升高，这可能与饮食、运动有很大关系。近年来，人们的生活水平逐步上升，高糖、高脂、高胆固醇饮食的比例非常高，饮食结构不合理，而且暴饮暴食、酗酒、运动和体力活动减少，导致TC、TG水平不断增高，超重、肥胖人数逐年增加，而超重、肥胖是患胆囊炎的重要基础[9]。肥胖人群胆囊的收缩功能日渐下降，胆汁排空延迟，容易造成胆汁淤积，结晶析出；血脂升高，肝脏负担加重，肝内葡萄糖醛酸胆红素的形成减少，非结合胆红素增高，总胆红素水平增高，影响胆囊排空，导致胆汁淤积，促进炎症发生；同时饮食习惯不正确，使胆汁浓度增加，有利于细菌繁殖，容易促进胆囊炎的形成。长期大量补钙，破坏体内钙离子的动态平衡，容易产生结石，刺激胆囊发生炎症[10]。本研究结果也证实了上述理论。

Hs-CRP是由肝细胞合成的急性相蛋白，当机体在受到微生物入侵或组织损伤等炎性刺激时，数小时内血清中hs-CRP就升高，48 h即可达峰值，随着病变消退、组织、结构和功能的逐渐恢复降至正常水平[11]。在感染性疾病、血液病、风湿性疾病、器官移植、化疗等多种情况下hs-CRP均会升高，并随着病情的变化有所变化。本研究中病例组术前的hs-CRP浓度明显高于正常对照组(P<0.05)，手术后第7天患者血清中hs-CRP浓度明显下降，但仍高于正常水平(P<0.05)。提示在术后较长的时间内患者仍处于应激状态，这应引起临床医师的重视，必要时应给与处理措施。

IL-8水平在感染、自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、SLE等、呼吸系统疾病如慢性支气管炎、肺纤维化、支气管扩张、溃疡性结肠炎、甚至恶性肿瘤如乳腺癌、肠癌中高表达；IL-8还与感染、肿瘤的预后关系密切[12]。在我们的研究中，病例组术前患者血清IL-8素的水平明显高于正常对照组，术后第7患者血清IL-8的水平较术前水平有明显的下降，但仍高于正常对照组，这也反映了机体的免疫和炎症状态，应引起重视。

IL-15是一种促炎因子，由多种细胞产生，促进Th0和CTL的增殖，促进NK细胞增殖，增强T细胞杀伤活性，促进B细胞增殖产生免疫球蛋白，刺激巨噬细胞，提高其吞噬能力，共同调控免疫应答，也参与抗体反应、造血和肿瘤监视，生物活性广泛[13]。研究证实IL-15在子痫前期孕妇血浆中升高，且浓度高低随病情变化[14]。还有研究证实，血清IL-15浓度在过敏性紫癜、2型糖尿病及SLE患者体内均明显升高，明显高于正常对照组，但重症胰腺炎的患者体内血清IL-15水平反而降低[15]。在我们的研究中，病例组血清IL-15的浓度术前明显升高，术后第7下降，但均高于正常对照组的水平。这与大多数人的研究结果是一致的。我们推测IL-15的水平变化与炎症的严重程度密切相关，随着炎症的发展，IL-15的浓度逐渐升高，当炎症因素去除后，IL-15的浓度会逐渐下降至正常水平，但当炎症持续性发展并恶化，免疫细胞大量破坏，炎性因子大量消耗，IL-15的浓度反而下降了。

与此同时本研究还检测了内毒素、SOD在急性胆囊炎患者中水平的变化。内毒素是革兰氏阴性杆菌细胞壁上的脂多糖，位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。胆囊炎的致病菌多为革兰性阴性杆菌，当机体受到严重创伤或出现严重感染时，全身的网状内皮系统功能障碍，免疫机能下降，内毒素产生过多，并通过消化道吸收入血，而机体无法全部清除，同时黏膜出血坏死，屏障破坏，血清内毒素的水平就会明显上升[7]。SOD是一种含有金属元素的活性蛋白酶，具有抗氧化的作用，是生物体内清除自由基的首要物质[16]。它能够减少、对抗甚至阻断氧自由基对机体细胞造成的损害，及时将受损细胞进行修复，尽可能恢复细胞功能，同时它也能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，在减轻炎性反应，缓解应激状态、恢复机体稳态方面有十分重要的作用，在我们的研究结果中显示病例组患者术前血清内毒素的水平明显高于正常对照组，术后第7患者血清内毒素的水平较术前水平有明显的下降(P<0.05)，但仍高于正常对照组(P<0.05)。病例组患者术前SOD水平明显低于正常对照组(P<0.05)，术后第7天患者血清SOD水平较手术前有明显的回升，但仍然低于正常对照组(P<0.05)。因此，在手术后采取措施减轻患者应激反应是必要的。

在研究中我们发现，与正常对照组相比，急性胆囊炎发生时hs-CRP、IL-8、IL-15、内毒素明显升高、SOD的水平明显下降，手术后，血清hs-CRP、IL-8、IL-15、内毒素的水平逐渐下降，SOD的水平逐渐回升，术后第7天均接近正常水平，但仍然高于或低于正常对照组水平。提示患者还需要进一步的治疗。监测他们水平的动态变化对于预测胆囊炎发展程度有重要的参考价值，同时可以为胆囊炎术后的治疗提供依据。

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【中图分类号】R 657.41

【文献标识码】A

【文章编号】1002-7386(2016)14-2167-03

(收稿日期：2016-01-12)