金黄色葡萄球菌克林霉素诱导耐药率

宋　涛(SONG Tao)，张平安(ZHANG Ping-an)

(武汉大学人民医院，湖北 武汉　430060)



金黄色葡萄球菌克林霉素诱导耐药率

宋涛(SONG Tao)，张平安(ZHANG Ping-an)

(武汉大学人民医院，湖北 武汉430060)

[摘要]目的探讨金黄色葡萄球菌(SA)克林霉素诱导耐药的发生情况，指导临床用药。方法分析某院2013年1月—2014年12月住院及门诊患者送检的各类临床标本检出的SA。采用K-B法进行药敏试验，并以双纸片法(D-抑菌圈试验)分析红霉素诱导克林霉素耐药发生情况。结果共检出779株SA，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占74.20%。SA对红霉素耐药、克林霉素敏感有195株，占25.03%，其中D试验阳性147株，克林霉素诱导耐药率75.38%，MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)D-抑菌圈试验阳性率分别为78.62%和61.11%。结论克林霉素诱导耐药率较高，选择克林霉素治疗红霉素耐药SA感染时应谨慎。

[关键词]金黄色葡萄球菌; 克林霉素; 红霉素; 诱导耐药; D-抑菌圈试验

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，SA)是社区和医院获得性感染的重要病原菌，可引起身体多部位感染。近年来，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus，MRSA)比例逐年增高，致病力日趋增强，耐药率越来越高，给临床治疗带来困难[1]。大环内酯类、林可酰胺类和链阳菌素类抗生素是治疗SA感染的常用药物，尤其是克林霉素具有组织渗透性强的特点，常被用于青霉素过敏患者的首选替代药物[2]。然而红霉素具有诱导克林霉素耐药的作用，因此影响临床医生对克林霉素的正确选择。本研究对779株SA进行药敏试验和D-抑菌圈试验检查，分析克林霉素诱导耐药率，以期为临床用药提供依据。

1资料与方法

1.1菌株来源2013年1月—2014年12月湖北医药学院附属襄阳医院住院及门诊患者送检的各类临床标本检出的SA，相同患者相同标本类型重复分离的SA只分析第一株菌。SA质控菌株(ATCC25923)购自卫生部临床检验中心。

1.2药敏纸片及培养基M-H平板、血平板均购自广州迪景公司，药敏纸片红霉素、克林霉素、头孢西丁均为英国Oxoid公司产品，VITEK GPI板条为法国生物梅里埃公司产品。

1.3细菌鉴定标本送达实验室后及时接种血平板，经35℃培养24 h，SA用VITEK GPI板条进行鉴定。MRSA鉴定：采用头孢西丁纸片，用K-B法进行药敏试验，贴头孢西丁纸片于琼脂表面，33～35℃孵育16～18 h后阅读结果。头孢西丁的抑菌圈直径≤21 mm为MRSA，≥22 mm为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitiveStaphylococcusaureus，MSSA)。

1.4D-抑菌圈试验采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的方法[3]。涂布0.5麦氏单位菌液到M-H平板，将红霉素(15 mg)与克林霉素(2 mg)纸片相邻放置，边缘相距15～26 mm。35℃培养15～18 h后阅读结果，在靠近红霉素纸片侧的克林霉素抑菌圈出现截平现象(形似大写字母D),即为诱导型克林霉素耐药试验阳性。

2结果

2.1SA检出情况2013年1月—2014年12月共检出SA 779株，其中MRSA 578株(74.20%)，MSSA 201株(25.80%)。MRSA与MSSA的标本来源均以痰为主，其次为脓性分泌物、伤口渗液及血。来源科室位于前3位的为：重症监护病房(ICU)、神经外科和神经内科。见表1。

表1　779株SA标本来源构成(株，%)

2.2耐药表型779株SA中：红霉素耐药、克林霉素敏感共195株(25.03%)，无红霉素敏感、克林霉素耐药株，两种抗菌药物均敏感85株(10.91%)，两者同时耐药499株(64.06%)。见表2。

表2MRSA与MSSA对红霉素和克林霉素的不同耐药表型(株，%)

菌株株数ES+CSER+CRER+CSMRSA57821(3.63)398(68.86)159(27.51)MSSA20164(31.84)101(50.25)36(17.91)合计77985(10.91)499(64.06)195(25.03)

E：红霉素；C：克林霉素；R：耐药；S：敏感

2.3克林霉素诱导耐药发生情况195株红霉素耐药、克林霉素敏感的SA中，D试验阳性147株，诱导耐药率为75.38%。其中159株MRSA 和36株MSSA中D试验阳性分别为125、22株，诱导耐药率分别为78.62%、61.11%。见表3。

表3　MRSA与MSSA对克林霉素诱导耐药发生情况

3讨论

本研究结果显示，SA主要分离自痰、脓性分泌物、伤口渗液及血，与相关报道相似[4-6]，来源科室主要为ICU和神经外科，可能与该病区危重患者多，患者自身疾病重、抵抗力差、侵入性诊疗操作多，同时长期使用抗菌药物，改变了人体的正常微生态平衡，破坏了机体的免疫力，增加了感染机会[7]。临床医务人员应对以上易感人群加强感染监测、严格无菌操作，减少感染发生。共检出MRSA 578株，占74.20%，高于相关报道[4-7]。

大环内酯类、林可酰胺类和链阳菌素类抗生素是3类作用密切相关但结构不同的抗菌药物，共同被称为MLS群，MLS群抗菌药物在核糖体水平可抑制敏感微生物蛋白质合成。在葡萄球菌中获得性对大环内酯类和林可霉素耐药很常见[8]。对大环内酯类耐药有两个不同的机制，一是主动外排，由msrA基因编码，引起对大环内酯类和B型链阳菌素耐药(但不耐克林霉素)，称为MS表型，即红霉素耐药，克林霉素敏感；二是核糖体靶位改变，由erm基因编码，引起对大环内酯类、林可霉素类和 B型链阳菌素耐药(MLSb耐药)[9]。erm基因可编码产生甲基化酶，此酶可减少药物与rRNA靶位的结合。若erm基因稳定表达，则表现对红霉素和克林霉素耐药，称为MLSb固有表型。然而在某些情况下，erm基因需要诱导剂诱导才能表达对克林霉素耐药，否则体外试验可能会表达对克林霉素敏感，红霉素可作为这种诱导剂。这些分离菌在体外表现对红霉素耐药而对克林霉素敏感，称为MLSb诱导型，即克林霉素诱导型耐药。MLSb诱导型通过常规药敏试验会漏检，需进行D试验[10]。本研究显示，在779株SA中，对红霉素耐药、克林霉素敏感的MRSA和MSSA分别为 159株和36 株，其中D试验阳性的MRSA和MSSA分别占78.62%和61.11%，即在红霉素耐药而克林霉素敏感时有78.62%的MRSA和61.11%的MSSA对克林霉素有耐药性。D试验阳性菌占所有检出SA的比例为18.87%，占红霉素耐药而克林霉素敏感SA的75.38%。与相关文献报道有所差异[11]。可能与不同地区SA红霉素耐药基因构成差异有关，另外也可能与该院的MRSA检出较多，而克林霉素诱导耐药多发生在MRSA菌株有关。

[参 考 文 献]

[1]黄晓莉, 刘娇娇, 赵奇, 等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药机制及研究现状[J].中国实验诊断学, 2012, 16(9):1738-1739.

[2]Drinkovic D,Fuller ER,Shore KP, et al. Clindamycin treatment ofStaphylococcusaureusexpressing inducible clindamycin resistance[J]. J Antimicrob Chemother, 2001,48(2):315-316.

[3]National Committee for Clinical Laboratory Standards．Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S]. M100-S19,CLSI,2009.

[4]李丽民, 吴先华, 徐礼锋.金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志, 2014, 24(4):787-789.

[5]贾珉, 王永涛, 贾征夫.临床不同标本分离金黄色葡萄球菌的药物敏感性[J].中国感染控制杂志, 2013, 12(6):454-456, 460.

[6]付艳霞.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的临床调查[J].中国消毒学杂志, 2013, 30(10):938-939.

[7]徐红云, 刘春林, 袁文丽, 等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性[J].中国感染控制杂志, 2012, 11(1):52-54.

[8]Sadeghi J, Mansouri S. Molecular characterization and antibiotic resistance of clinical isolates of methicillin-resistantStaphylococcusaureusobtained from Southeast of Iran (Kerman)[J]. APMIS, 2014,122(5):405-411.

[9]杨士华, 刘冬青.金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药的研究[J].中国医学装备, 2012, 9(4):70-72.

[10] 陶晓霞, 崔志刚, 刘国栋, 等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MLVA分型研究[J].中国病原生物学杂志, 2010, 5(2):81-83, 104.

[11] 宋娟.220株金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析[J].国际检验医学杂志, 2014, 35(17):2384-2385.

(本文编辑：付陈超)

Inducible clindamycin resistance rate inStaphylococcusaureus

(Renmin Hospital of Wuhan University，Wuhan 430060, China)

[收稿日期]2015-09-18

[作者简介]宋涛(1981-)，男(汉族)，湖北省襄阳市人，主管技师，主要从事临床病原微生物耐药性研究。 [通信作者]张平安E-mail:zhangpingan@yahoo.com.cn

DOI:10.3969/j.issn.1671-9638.2016.06.018

[中图分类号]R378.1

[文献标识码]B

[文章编号]1671-9638(2016)06-0430-03