氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果观察

穆素雨，柳东阳，白渊哲，杨万云，师玉露，李　爽，宁梦夏，杨雪峰（河南科技学院动物科学学院，河南新乡453003）



氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果观察

穆素雨，柳东阳，白渊哲，杨万云，师玉露，李爽，宁梦夏，杨雪峰
（河南科技学院动物科学学院，河南新乡453003）

摘要：利用物体表面现场消毒试验方法，观察了氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果。结果表明，氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果随消毒剂浓度的升高和作用时间的延长而增强。当高于0.1%氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的自然菌作用5 min以上时，杀灭对数值均大于1，消毒合格；0.5%氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的自然菌作用10 min以上，高于1.0%氯甲酚纳米乳消毒剂作用5 min以上时，杀灭对数值均大于1，消毒合格。结果提示，氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果良好，值得在畜牧兽医实践中推广应用。

关键词：氯甲酚；纳米乳；消毒剂；物体表面现场消毒试验

氯甲酚（Chlorocresol）是一种酚类衍生物消毒剂，不但能损害菌体细胞膜，使菌体内含物逸出和蛋白质变性，呈杀菌作用，而且还可通过抑制细菌脱氢酶和氧化酶等酶的活性，呈现抑菌作用[1]。氯甲酚对细菌繁殖体、真菌和结核杆菌均有较强的杀灭作用[2]，主要适用于畜禽舍、车辆、器物及环境等消毒。实践中，因氯甲酚具有难溶于水和酚臭味重的缺点而限制了其作为消毒剂的开发和临床应用。为此，杨雪峰等利用纳米乳药物载体的优势[3-5]，研制出了一种水溶性好、酚臭味弱、消毒作用强、生产工艺简单的新型环境消毒剂-氯甲酚纳米乳消毒剂，并就其制备方法申请了国家发明专利。本试验利用物体表面现场消毒试验对氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果进行了观察，以为其在畜牧兽医实践中的应用提供参考。

1　材料与方法

1.1试验指标菌金黄色葡萄球菌ATCC6538，由河南科技学院药理实验室保存并提供。

1.2主要试剂氯甲酚（国药集团化学试剂有限公司，批号20121115）；营养琼脂（青岛市高科园海博生酪物技术有限公司，批号20130319）；MHB培养基（北京奥博星生物技术责任有限公司，批号：20090102）；聚氧乙烯蓖麻油-40（EL-40，药用级，天津市浩元精细化工有限公司）；肉豆蔻酸异丙酯（IPM，药用级，浙江物美化学品有限公司）；吐温-80（天津市瑞金特化学品有限公司）；硫代硫酸钠（焦碱集团化学试剂厂）；卵磷脂（天津市博迪化工有限公司）等。

1.3氯甲酚纳米乳消毒剂的制备制备方法如下：（1）分别称取适量的氯甲酚、冰醋酸、EL-40、IPM和纯化水，备用；（2）室温下，先将冰醋酸、EL-40和IPM混匀，然后缓慢加入纯化水，并不停搅拌，以形成澄明均一的纳米乳药物载体；（3）将处方量的氯甲酚加入上述纳米乳药物载体中溶解完全即可。使用时，利用纯化水稀释成所需浓度。

1.4试验方法

1.4.1中和剂筛选试验以金黄色葡萄球菌ATCC6538为试验指标菌，以3.0%吐温-80 PBS、0.5%硫代硫酸钠PBS、1.0%吐温-80+1.0%卵磷脂+0.5%硫代硫酸钠PBS为拟筛选中和剂，试验分8组，见表1，并依据文献[6]中的悬液定量杀菌试验程序进行。结果判定：第1、2组不长菌或菌数较少，第3、4、5组的组间菌落数误差率应不超过15%，第6、7、8组不长菌。试验重复3次结果一致，表明所选中和剂及其浓度适宜。

1.4.2物体表面现场消毒试验分别选择河南科技学院实验楼的卫生间水泥地面和实验中心兔舍地面进行物体表面现场消毒试验，具体试验步骤如下：（1）在地面上，标定多个相邻的面积各为5.0 cm×5.0 cm的区块，1个作为消毒前共用采样对照区，其余作为消毒后采样试验区；（2）在采样对照区，将无菌棉拭在含10 mL PBS稀释液试管中浸湿并挤干后，对对照区块涂抹采样，作为阳性对照组样本；（3）在消毒后采样试验区，分别用不同浓度的氯甲酚纳米乳消毒剂消毒作用至不同设定时间，然后将无菌棉拭在含10 mL中和剂溶液试管中浸湿并挤干，对各个消毒区块涂抹采样，无菌操作将棉拭采样端剪入原中和剂溶液试管内，以作为各试验组样本；（4）将阳性对照组和试验组样本，分别接种培养后观察，并记录最终结果，按照公式：杀灭对数值=对照组平均活菌浓度的对数值-试验组活菌浓度对数值，计算平均杀灭对数值。同时将本次试验未用完的同批次中和剂溶液、稀释液、棉拭、培养基等分别设为阴性对照。最后，参考文献[6]的评价规定，当平均杀灭对数值≥1.00，判定为消毒合格。

2.2物体表面现场消毒试验结果

2.2.1氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的现场消毒试验结果氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的现场消毒试验结果见表3。随着氯甲酚纳米乳消毒剂的浓度升高和作用时间延长，其对卫生间水泥地面的消毒效果呈逐渐增强趋势。高于0.1%氯甲酚纳米乳消毒剂对自然菌作用5 min以上时，杀灭对数值均大于1，消毒合格，其中1.0%和5.0%氯甲酚纳米乳消毒剂分别作用10 min以上时，能全部杀灭卫生间水泥地面上的自然菌。结果说明，氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的现场消毒效果好。

表1　中和剂筛选试验分组

2　结果与分析

2.1中和剂筛选试验结果3.0%吐温-80 PBS、0.5%硫代硫酸钠PBS、1.0%吐温-80+1.0%卵磷脂+0.5%硫代硫酸钠PBS三种中和剂对金黄色葡萄球菌在第3、4、5组的组间菌落数误差率见表2。由表2可知，以1%吐温-80+1%卵磷脂+0.5%硫代硫酸钠PBS作为中和剂较为适宜。

表2　氯甲酚纳米乳消毒剂的中和剂筛选试验

表3　氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的现场消毒试验

2.2.2氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的现场消毒试验结果氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的现场消毒试验结果见表4。由表4可知，氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的消毒效果随消毒剂浓度的升高和作用时间延长而增强。0.5%氯甲酚纳米乳消毒剂对自然菌作用10 min以上，高于1.0%氯甲酚纳米乳消毒剂对自然菌作用5 min以上时，杀灭对数值均大于1，消毒合格，说明氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的现场消毒效果好。

表4　氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的现场消毒试验

3　讨论

纳米乳是近年来研究较多的一种药物载体，具有其他药物载体所不可比拟的优点：制备过程简单、缓释，能增大难溶性药物溶解度，能提高易水解药物稳定性和药物生物利用度，可防止药物酶解，易于保存，能掩盖一些药物的不良气味[3]等，因此它被广泛认为是一种极具发展潜力的药物载体，也使各种难溶性药物的纳米乳剂型研制成为药剂学领域的研究热点。目前，已有关于纳米乳化技术应用于消毒剂领域的研究报道。魏坤等[8]研制出一种复方纳米银抗菌乳液。用该消毒液原液擦拭消毒并作用2 min，对手上自然菌平均杀灭率达到97%以上，表明其具有良好的消毒效果。魏秋华等[9]研制出一种皮肤消毒纳米乳液，其杀菌效果良好，且在降低醋酸氯己定含量情况下，其杀菌效果仍明显优于有关文献报道的含氯己定消毒剂。杨雪峰等以纳米乳为药物载体，以氯甲酚为模型药物，研制出了水包油型氯甲酚纳米乳消毒剂[7]。现场消毒试验结果表明，当高于0.1%氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的自然菌作用5 min以上时，杀灭对数值均大于1，消毒合格；当0.5%氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的自然菌作用10 min以上，高于1.0%氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的自然菌作用5 min以上时，杀灭对数值均大于1，消毒合格。结果说明，氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果良好，值得在畜牧兽医实践中推广应用。在临床应用中，当消毒污染严重的物体表面或排泄物时，可以适当提高消毒剂的浓度和作用时间，以保证消毒效果。

参考文献：

[1]胡功政，邱银生.家禽常用药物及其合理使用[M].郑州：河南科学技术出版社，2010：27.

[2]李春雨，贺生中.动物药理[M].北京：中国农业大学出版社，2007：101.

[3] Jaiswal M，Dudhe R，Sharma P K . Nanoemulsion：an advanced mode of drug delivery system[J].Biotech，2014（4）：1-5.

[4] Zhang Y，Shang Z H，Gao C H，et al.Nanoemulsion for solubiliza⁃tion，stabilization，and in vitro release of pterostilbene for oral de⁃livery[J].AAPS Pharm Sci Technol，2014（5）：1-9.

[5] Gong Y，Wu Y，Zheng C，et al.An excellent delivery system for improving the oral bioavailability of natural vitamin E in rats[J] . AAPS Pharm Sci Technol，2012（3）：961-966.

[6]中华人民共和国卫生部.消毒技术规范[S].北京：中华人民共和国卫生部，2008：15-52.

[7]杨雪峰，齐永华，宁红梅，等.恩诺沙星纳米乳的制备及其质量评价[J] .浙江大学学报（农业与生命科学版），2012，38 （6）：693-699.

[8]魏坤，吴远，席云，等.复方纳米银抗菌乳液杀菌效果的研究[J].中国消毒学杂志，2010，27（5）：521-523.

[9]魏秋华，张文福，王长德，等.一种皮肤消毒纳米乳液性能的试验研究[J].中国消毒学杂志，2004，21（1）：1-4.

Disinfection efficacy of chlorocresol nanoemulsion disinfectant

MU Su-yu，LIU Dong-yang，BAI Yuan-zhe，YANG Wan-yun，SHI Yu-lu，LI Shuang，NING Meng-xia，YANG Xue-feng
（College of Animal Science，Henan Institute of Science and Technology，Xinxiang 453003，China）

Abstract：Disinfection efficacy of chlorocresol nanoemulsion disinfectant was studied by the on-site disinfection test method of object surface. The results showed that disinfection efficacy was enhanced with increasing of the nanoemulsion disinfectant con⁃centration and extending of the action time . When the concentration of chlorocresol nanoemulsion disinfectant was higher than 0.1% and the disinfectant acted for more than 5 min against natural bacteria on toilet cement floor，sterilization log values were all higher than 1 and sterilizing effects were qualified.When 0.5% disinfectant acted for more than 10 min against natural bacteria on the ground surface of rabbit hutch，and higher than 1.0% disinfectant acted for more than 5 min，the sterilization log values were al⁃so all higher than 1 and sterilizing effects were also qualified.These results suggest disinfection efficacy of chlorocresol nanoemul⁃sion disinfectant is strong and it is worth of popularization and application in animal husbandry and veterinary practice.

Key words：chlorocresol；nanoemulsion；disinfectant；on-site disinfection test of object surface

中图分类号：S859.79+9.1

文献标志码：A

文章编号：0529-6005（2016）05-0035-03

收稿日期：2015-03-02

基金项目：河南科技学院大学生创新训练计划项目（2014CX040）；河南科技学院“标志性创新工程”计划经费资助项目（2015ZD09）

作者简介：穆素雨（1995-），男，本科生，就读于动植物检疫专业，E-mail：693361358@qq.com

通讯作者：杨雪峰，E-mail：yangxuefeng2003@126.com

Corresponding author：YANG Xue-feng