单纯疱疹病毒感染与心房颤动的相关性研究

李景业　刘少伟　李新　郭雪原　张婷　阮燕菲　刘念　杜昕　董建增　马长生

·临床研究·

单纯疱疹病毒感染与心房颤动的相关性研究

李景业刘少伟李新郭雪原张婷阮燕菲刘念杜昕董建增马长生

100029北京，首都医科大学附属北京安贞医院心内科

【摘要】目的观察单纯疱疹病毒(HSV)感染与心房颤动(房颤)的相关性。方法严格筛选103例孤立性房颤患者，分为阵发性房颤组74例和持续性房颤组29例，从流行病学对照研究队列中选取72例未合并房颤的健康人群作为对照组。空腹采集静脉血，用ELISA法按试剂盒标准流程检测血清HSV1 IgG抗体、HSV2 IgG抗体水平；运用相关分析探讨患者血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与HSV1 IgG抗体、HSV2 IgG抗体滴度的关系。结果对照组、阵发性房颤组和持续性房颤组的血清HSV1 IgG抗体水平分别为(217.95±53.18)μg/ml、(304.76±57.58)μg/ml和(322.99±60.35)μg/ml，血清HSV2 IgG抗体水平分别为(307.25±64.02)μg/ml、(407.22±59.1)μg/ml和(406.63±50.67)μg/ml，hs-CRP水平分别为(2.16±0.70)mg/L、(3.90±0.59)mg/L和(3.90±0.63)mg/L；对照组的血清HSV1 IgG抗体、HSV2 IgG抗体、hs-CRP水平均显著低于阵发性房颤组和持续性房颤组(均P<0.001)；阵发性房颤组与持续性房颤组的血清HSV1 IgG抗体、HSV2 IgG抗体、hs-CRP水平比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。血清HSV IgG抗体水平与hs-CRP水平呈正相关关系(rHSV1=0.532，P<0.001；rHSV2=0.446，P<0.001)。结论房颤患者的血清HSV IgG抗体水平显著升高，且与血清hs-CRP水平呈正相关。

【关键词】心房颤动；单纯疱疹病毒感染；高敏C反应蛋白

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)作为一类常见的疱疹病毒，全球分布广泛，人群普遍易感[1]。据报道，HSV感染与高血压病、冠心病和脑卒中等多种心脑血管疾病的发生发展相关[2-5]。虽有研究根据既往史诊断HSV感染，提出其是心房颤动(房颤)发生的独立危险因素[6]，但目前尚无定论。因此，本研究选取血清HSV IgG抗体作为HSV感染的检测指标，通过分析房颤患者的血清HSV IgG抗体水平，探讨HSV感染与房颤的相关性。

1对象与方法

1.1研究对象

连续入选2011年8月至2014年6月于北京安贞医院等22家医院住院治疗的4148例房颤患者。根据2014年美国心脏协会(AHA)/美国心脏病学会(ACC)/美国心律学会(HRS)房颤管理指南[7]中孤立性房颤定义制定排除标准：冠心病、充血性心力衰竭、风湿性心脏病、心肌病、先天性心脏疾病、瓣膜病、永久性起搏器植入、心脏术后、高血压病、糖尿病、甲状腺功能异常、慢性肾病、呼吸系统疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、阻塞性睡眠呼吸暂停、慢性咽炎、支气管炎、肺结核、其他肺部感染、肺气肿、胸膜炎、肺栓塞)以及其他慢性炎症性疾病和潜在恶性肿瘤等。此外，目前吸烟或体质量指数(BMI)≥27 kg/m2者也予以排除。最终纳入孤立性房颤患者103例(房颤组)，其中阵发性房颤74例，持续性房颤29例。同时，严格按照上述标准，从4209例流行病学对照研究队列中选取72例未合并房颤的健康人群作为对照组。

1.2血样采集与抗体检测

采集患者外周静脉血3 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝充分混匀，离心(1000g，30 min)后留取上清液，于-80℃低温冰箱中保存。血浆HSV1 IgG抗体和HSV2 IgG抗体水平采用ELISA法测定，试剂盒购自杰辉博高生物技术(北京)有限公司。各项生化指标及高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)水平测定严格按照标准步骤进行，研究所用仪器为Hitachi 917自动分析仪。

1.3统计学方法

2结果

2.1两组患者的基线资料比较

与对照组比较，房颤组患者的年龄较小[(57.7±10.9)岁比(64.7±8.3)岁，P<0.001]，血清总胆固醇水平较低[(4.8±1.0)mmol/L比(5.3±1.0)mmol/L，P=0.001]，LDL水平较低[(2.9±0.8)mmol/L比(3.2±0.8)mmol/L，P=0.035]，血清hs-CRP水平显著升高[(3.90±0.60)mg/L比(2.16±0.70)mg/L，P<0.001，表1)。阵发性房颤组与持续性房颤组的基线资料各项比较，差异均无统计学意义(均P>0.05，表2)。

表1　房颤组与对照组基线资料的比较

注：房颤，心房颤动；BMI，体质量指数；LDL，低密度脂蛋白；hs-CRP，高敏C反应蛋白；ACEI，血管紧张素转化酶抑制药；ARB，血管紧张素Ⅱ受体拮抗药；1 mmHg=0.133 kPa

表2　阵发性房颤组与持续性房颤组基线资料的比较

注：房颤，心房颤动；BMI，体质量指数；LDL，低密度脂蛋白；hs-CRP，高敏C反应蛋白；ACEI，血管紧张素转化酶抑制药；ARB，血管紧张素Ⅱ受体拮抗药；1 mmHg=0.133 kPa

2.2三组患者的血清HSV IgG抗体水平比较

HSV，单纯疱疹病毒图1　三组间HSV1 IgG抗体水平比较

HSV，单纯疱疹病毒图2　三组间HSV2 IgG抗体水平比较

对照组、阵发性房颤组和持续性房颤组的血清HSV1 IgG抗体水平分别为(217.95±53.18)μg/ml、(304.76±57.58)μg/ml和(322.99±60.35)μg/ml(图1)，血清HSV2 IgG抗体水平分别为(307.25±64.02)μg/ml、(407.22±59.1)μg/ml和(406.63±50.67)μg/ml(图2)；对照组的血清HSV1 IgG抗体、HSV2 IgG抗体水平显著低于阵发性房颤组和持续性房颤组(均P<0.001)；阵发性房颤组与持续性房颤组的血清HSV1 IgG抗体、HSV2 IgG抗体水平比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。2.3血清HSV IgG抗体与hs-CRP的相关性

血清HSV1 IgG抗体水平、HSV2 IgG抗体水平与hs-CRP水平呈中度正相关(rHSV1=0.532，P<0.001；rHSV2=0.446，P<0.001；图3、图4)。

HSV，单纯疱疹病毒；hs-CRP，高敏C反应蛋白图3　HSV1 IgG抗体与hs-CRP的相关性

HSV，单纯疱疹病毒；hs-CRP，高敏C反应蛋白图4　HSV2 IgG抗体与hs-CRP的相关性

3讨论

本研究结果表明，孤立性房颤患者的血清HSV IgG抗体水平显著升高，且与血清hs-CRP水平呈正相关，提示HSV感染相关的血清IgG抗体水平升高可能与房颤的发生具有一定的相关性。

房颤的病理生理机制十分复杂，目前尚无定论。离子通道变异、心肌电重构和心肌纤维化等多种机制均与房颤的发生发展相关[8-10]。近年来，炎症反应在房颤的发生与维持中发挥的重要作用已引起广泛关注。一方面，机体炎症反应的持续存在可增加房颤的发病风险[11]；另一方面，房颤患者也常合并心肌炎症反应或血清炎症介质水平升高[12]。

HSV分HSV1和HSV2两种血清型，是多种心血管疾病的潜在病原体之一。儿童及成年心肌炎患者的心肌组织标本中均可发现HSV1、HSV2基因组的存在[13-14]，特发性或遗传性扩张型心肌病患者行心肌活检时亦可检出HSV DNA[15]。HSV感染人体后可侵犯血管内皮细胞及平滑肌细胞[16]，引起血管炎症反应，促使动脉管壁增厚、外周血管阻力增加，导致高血压的形成[5]。同时，HSV感染诱导的炎症因子释放可干扰血管内皮细胞的脂代谢过程，促进脂质沉积和血小板聚集，在动脉粥样硬化的进程中发挥重要作用[2-4]。心力衰竭患者心肌组织中HSV基因组的持续存在提示主要心血管事件风险增加、短期预后不良[17]。而炎症性扩张型心肌病患者经抗HSV治疗后可出现左心室大小及左心功能的改善[18]。

HSV感染导致房颤发生发展，可能与以下机制相关。(1)系统性炎症反应：HSV进入人体后通常不能被特异性细胞免疫清除，多潜伏于神经细胞中，造成慢性持续性感染[19-20]。HSV的反复激活也可诱导C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及纤维蛋白原等炎症因子释放，引起系统性炎症反应[21-23]。血清炎症因子水平升高可干扰心肌细胞的收缩力和电位稳定性，诱导成纤维细胞活化，造成细胞外基质纤维化，为折返性心律失常的发生提供潜在基质[24]。(2)心肌局部炎性浸润：研究表明，孤立性房颤患者行心肌活检可见心肌细胞坏死、裂解，周围出现单核细胞和淋巴细胞为主的炎性细胞浸润[25]，这一改变与HSV感染性心肌炎的病理改变相符[26]。Yamashita等[27]对房颤患者的心房组织行免疫组化染色时也发现了大量聚集的CD68+巨噬细胞和CD3+T淋巴细胞，高度表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-6等炎症因子。Frustaci等[25]分析房颤患者不同部位心肌组织的CRP含量后指出，左心房心肌组织的CRP含量较冠状窦组织显著升高，提示心肌局部炎性浸润参与房颤的形成。本研究组推测，HSV感染可能通过全身系统性炎症反应和心肌局部炎性浸润双重通路诱发房颤。

既往研究显示，房颤患者的血清CRP水平可能受房颤类型和房颤病程的影响[28]。与阵发性房颤患者相比，持续性房颤及长程持续性房颤患者可出现血清CRP水平显著升高[29]。近期一项Meta分析还指出，CRP水平虽与持续性房颤和永久性房颤的发生相关，却与阵发性房颤无关[12]。本研究为明确房颤类型是否影响血清CRP水平，对阵发性房颤与持续性房颤患者行进一步分析。与上述研究结果不同的是，本研究中阵发性房颤与持续性房颤患者各项指标的差异均无统计学意义。可能原因在于本研究严格控制了包括高血压病、糖尿病、冠心病、吸烟、肥胖和慢性系统性炎症在内的多种危险因素，充分排除了其致血清CRP水平升高的潜在干扰。这一结果也表明，HSV感染引起的炎症反应在不同类型房颤的发生与维持中可能同样发挥重要作用。

本研究中对照组年龄高于房颤组，可能与人群选择有关，但因HSV IgG抗体水平有随年龄增长逐渐升高的自然趋势[30]，故仍能说明本组房颤患者HSV IgG抗体增高是有意义的。此外，为尽可能地严格控制房颤发生的危险因素，本研究最终仅从4148例房颤人群中筛选出103例孤立性房颤患者，样本量相对较小，未行多元回归分析，结论有待进一步研究证实。

综上所述，本研究在严格控制房颤相关多种潜在危险因素的基础上，通过血清学检测指标证实HSV感染与房颤的发生相关。这一发现有助于合理防治病毒感染，控制房颤危险因素，从而改善患者的临床预后。

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The relationship between herpes simplex virus infection and atrial fibrillation

LIJing-ye,LIUShao-wei,LIXin,GUOXue-yuan,ZHANGTing,RUANYan-fei,LIUNian,DUXin,DONGJian-zeng,MAChang-sheng.

DepartmentofCardiology,BeijingAnzhenHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100029,ChinaCorrespondingauthor:MAChang-sheng,Email:chshma@vip.sina.com

【Abstract】ObjectiveTo observe the correlation of herpes simplex virus (HSV) infection and atrial fibrillation (AF). Methods103 strictly selected homogenous lone AF patients were recruited, including 74 paroxysmal AF patients and 29 persistent AF patients. 72 healthy control subjects were selected from a population-based Chinese Arrhythmia Registry. Peripheral venous blood samples were collected and the concentration of IgG antibody against HSV was tested according to the standard procedure of the diagnostic ELISA kit. ResultsCompared to the control, AF patients were younger [(64.7±8.3) years vs. (58.2±10.6) years vs. (56.2±11.6) years，P<0.001] and had a significantly higher concentration of anti-HSV1 IgG [(217.95±53.18) μg/ml vs. (304.76±57.58) μg/ml vs. (322.99±60.35) μg/ml, P<0.001], anti-HSV2 IgG [(307.25±64.02) μg/ml vs. (407.22±59.1) μg/ml vs. (406.63±50.67) μg/ml, P<0.001] and high sensitivity C-reactive protein (hsCRP) [(2.16±0.71) mg/L vs. (3.90±0.59) mg/L vs. (3.90±0.63) mg/L，P<0.001]. There was a positive correlation between anti-HSV IgG levels and hsCRP levels (rHSV1=0.532，P<0.001；rHSV2=0.446，P<0.001). Conclusions The expression of IgG antibody against HSV was increased in AF patients, and it has a positive correlation with hsCRP levels.

【Key words】Atrial fibrillation;Herpes simplex virus infection;High sensitivity C-reactive protein

DOI:10.3969/j.issn.1004-8812.2016.05.005

通信作者：马长生，Email: chshma@vip.sina.com

【中图分类号】R541.75

(收稿日期:2016-02-13)