血清神经元特异性烯醇化酶、铁蛋白与糖尿病周围神经病变严重程度的关系

魏剑芬　张文彦　王　颖　吴乃君　程　燕　金秀平

华北理工大学附属医院内分泌科　河北唐山　063000

血清神经元特异性烯醇化酶、铁蛋白与糖尿病周围神经病变严重程度的关系

魏剑芬张文彦王颖吴乃君程燕金秀平

华北理工大学附属医院内分泌科河北唐山063000

[摘要]①目的研究2型糖尿病并发糖尿病周围神经病变(DPN)患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、铁蛋白(SF)水平与神经病变严重程度的关系，为DPN的防治提供理论依据。②方法用免疫放射分析法检测NSE、化学发光法测定SF水平，多伦多临床评分系统(TCSS)进行神经病变程度分级。糖尿病无周围神经病变患者50例为单纯糖尿病组。糖尿病周围神经病变患者100例为DPN组，观察DPN患者血清NSE、SF水平及TCSS的相关性。③结果DPN组患者血清NSE(19.67±4.21)μg/L、SF(428.72±86.28)ng/mL，高于单纯糖尿病组患者NSE(10.67±3.46)μg/L、SF(263.15±74.03)ng/mL，差异有统计学意义(P<0.01)；血清NSE水平与TCSS评分呈等级依赖性。④结论随着DPN严重程度增加，血清NSE、SF水平升高。

[关键词]2型糖尿病糖尿病周围神经病变神经元特异性烯醇化酶铁蛋白多伦多临床评分系统

糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy，DPN)是糖尿病最常见的慢性并发症之一。其发病率随病程逐年增多，病程5年约为16.7%，10年后可增加到42.5%以上[1]。神经病变症状严重影响患者生活，晚期导致截肢风险增加。DPN最常用检测方法是测量神经传导速度(nerve conduction velocity，NCV)，包括感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity，SCV)、运动神经传导速度(motor nerve conduction velocity，MCV)。NCV减慢是神经受损的直接证据，即使无神经症状的患者也可显示亚临床病变，NCV可作为DPN早期诊断的指标。临床上应用多伦多临床评分系统(TCSS)评分可进行病变严重程度分级。目前对微量元素与糖尿病并发症研究显示铁蛋白与糖尿病慢性并发症密切相关，神经元特异性烯醇化酶(NSE)是早期神经损害的标志及保护因子。我们对2型糖尿病周围神经病变患者检测血清铁蛋白(SF)、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平以及进行TCSS评分。研究不同程度神经病变患者SF及NSE水平变化，为早期预防和诊治DPN提供理论依据以提高其早期诊断率，早期干预治疗有助于控制患者并发症。

1对象与方法

1.1研究对象选取2014年10月～2015年10月在我院内分泌科门诊就医及住院的150例2型糖尿病患者，均符合1997年美国糖尿病协会(ADA)的诊断标准。糖尿病病程在2个月到30年，排除伴有急性并发症患者如感染性疾病、糖尿病酮症酸中毒和高血糖高渗状态等、严重心脑血管病变、其他系统性疾病肝肾功能不全、近期输血、铁剂治疗、血液系统疾病、恶性肿瘤。女78例，男72例，年龄30～76岁，平均(59.27±10.73)岁。糖尿病并发DPN的诊断标准(采用2010年中国2型糖尿病防治指南):①明确的糖尿病病史，或经糖尿病实验室检查证实存在糖尿病。②糖尿病诊断时或之后出现的神经病变。③临床症状和体征与DPN的表现相符，行神经肌电图检查确诊。

1.2研究方法所有患者禁食水8～12小时，于清晨8：00～10：00空腹抽取肘正中静脉血，分别测定血糖(FPG)、肾功能、肝功能、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)、同型半胱氨酸(Hcy)、SF(化学发光法)、NSE(放射免疫法)，操作按照说明书进行。DPN严重程度分级采用2001年多伦多大学糖尿病专家和神经病学专家提出的TCSS评分系统。TCSS评分系统包括神经自觉症状、神经腱反射、肢体感觉功能检测3项评分。①神经自觉症状包括下肢麻木、针刺样锐痛、灼痛、走路不平衡(如踩棉花感)、乏力及上肢症状各1分，共6分；②神经腱反射需检测双侧的膝、踝反射，反射分消失、减弱、正常。分别计2分，1分，0分，共8分；③脚拇趾感觉评分包括位置觉、触压觉、振动觉、温度觉和痛觉5项，共0～5分；总分为19分。共划分为3个等级：轻度神经病变6～8分；中度神经病变9～11分；重度神经病变12～19分。

1.3统计学处理所有数据采用统计学软件SPSS 17.0进行处理，计数资料比较采用χ2检验，计量资料比较采用t检验，指标间的相关性用线性相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1研究对象基本资料的比较DPN组与单纯糖尿病组比较性别构成经χ2检验差异无统计学意义(P>0.05)，说明本次研究对象的性别构成具有可比性。DPN组与单纯糖尿病组年龄经过t检验，差异有统计学意义(P<0.05)。DPN组与单纯糖尿病组病程比较，DPN组高于单纯糖尿病组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2各组生化指标及血清SF、NSE比较经t检验分析显示,DPN组患者HbA1C、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、SF、NSE高于单纯糖尿病组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1　DPN组和单纯糖尿病组一般资料比较±s)

表2　DPN组和单纯糖尿病组各项生化指标比较±s)

2.3SF与DPN的关系DPN组56例患者SF>400ng/mL，单纯糖尿病组15例，经χ2检验OR=2.97，说明SF高于正常范围时，糖尿病患者发生DPN的危险性增加1.97倍，见表3。

表3　两组SF的比较

2.4DPN与血清NSE水平的关系DPN组血清NSE>15μg/L患者52例，单纯糖尿病组11例，经χ2检验OR=3.84，说明血清NSE大于正常范围时，糖尿病患者发生周围神经病变的风险增加2.84倍,见表4。

表4　两组NSE水平的比较

2.5糖尿病周围神经病变程度与血清SF、NSE水平的关系经方差分析显示,随着DPN程度的加重，血清SF、NSE水平升高，差异有统计学意义(P<0.05),见表5。

表5　血清NSE、SF水平与神经病变严重程度的关系±s)

注：FSF=210.16;P<0.000;FNSE=207.19，P<0.000;*表示与无神经病变组比较P<0.05；▲表示与轻度神经病变组比较P<0.05；#表示与中度神经病变组比较P<0.05；

3讨论

DPN是2型糖尿病常见的慢性并发症之一，DPN早期症状不明显，常被忽视，一旦出现麻木、疼痛等表现，神经损伤常不可逆，给患者的生活带来较大影响。DPN的发病是多种因素共同作用的结果，多元化理论诠释了DPN发病的机制。神经营养因子缺乏、代谢相关综合因素等彼此存在着紧密联系，共同致病，如：蛋白激酶C途径的激活；多元醇途径过度激活；氧化应激增强；神经缺氧、缺血、代谢障碍；神经生长因子缺乏；免疫异常；遗传因素等。早期发现、早期治疗可明显减轻患者的痛苦，提高患者生活质量。外周神经系统的神经元位于靶器官及其附近的神经节,周围神经和血管供应的器官紧密捆绑在一起。血神经屏障和血脑屏障有滤过毒素，保护神经元作用，容易受到高渗物质、氧化应激等有害刺激[1]。铁是人体中含量最丰富的过渡金属，是许多含铁蛋白发生重要生化反应的必需元素，又作为生物氧化损伤的催化剂，通过芬顿(Fenton)反应，产生大量高细胞毒性的羟自由基造成组织器官损伤[2]。近年来大量研究提示铁与糖尿病及其并发症密切相关，铁代谢影响了糖代谢，而长期高血糖又损伤铁代谢通路，在相互关系中，氧化应激和炎症因子可能起到枢纽作用[3]。铁促进氧化应激是神经细胞损伤的重要病理机制，在体外试验中发现，神经细胞在含低浓度铁培养基(5μmol/L)中可以正常生长，而在含高浓度铁的培养基(≥10μmol/L)中，7g天以后就出现大量死亡，这些细胞死亡的原因是由于铁浓度的增高诱发氧化应激反应所致。随着铁浓度增加，神经元死亡率增加，丙二醛的含量增加，这些结果说明，高浓度铁培养的神经元死亡可能是由于铁诱导的脂质过氧化反应所致，铁过载可能加速了神经元的衰老和死亡[4]。本研究中，DPN组较单纯糖尿病组的SF水平明显升高(P<0.05)；并随着神经病变程度加重升高明显；当糖尿病患者SF水平高于正常时，其发生DPN的危险性增加1.97倍；加强对糖尿病患者SF水平筛查，及时采取干预措施，可能有利于降低DPN的发生率。

NSE是神经元和神经内分泌细胞所特有的一种蛋白酶，在神经损伤时其血清浓度升高，国内有学者发现 DPN 患者血清 NSE 升高，且与神经病变程度正相关，提出 NSE 可能是 DPN 的一个潜在生物标志物[5]，缺血缺氧是DPN 的主要致病因素，慢性暴露于高血糖及相关的缺血缺氧伴随着氧化应激，致DPN 的风险增加，其特征是神经细胞变性并常伴随再生；氧化应激激活神经元中一些糖酵解酶包括烯醇化酶，为了满足这种环境下对能量相对高的要求以增加神经元的存活，糖酵解酶活性被迫上调，在这些过程中，受影响的神经元中的烯醇化酶的合成可能发生改变，并有可能使NSE 漏入血中[6]。当神经组织受到各种损伤因素作用后如缺血缺氧、中毒或损伤，细胞膜完整性被破坏，由于NSE不与细胞内肌动蛋白结合故最易从细胞内释放出来并迅速进入细胞间隙进而释放入脑脊液或通过血脑屏障进入外周血，因此检测NSE的血清浓度可判断神经组织受损害的程度和病情预后[7]。DPN属于微血管病变，在慢性缺血、缺氧和神经脱髓鞘等各种致病因素作用下，血-神经屏障的通透性增大，NSE容易从血神经屏障漏出，血清NSE的释放增加，有利于受损神经元细胞的存活，发挥神经保护作用，并呈浓度依赖性的方式发挥作用。相关研究表明血清NSE可作为一种广谱的神经营养因子作用于神经系统，可促进各种如皮层神经元、神经胶质细胞、神经细胞、髓鞘的神经元存活。当神经受损时，神经元细胞分泌的NSE高于正常值几倍，通过神经纤维末梢摄取再经逆行轴浆运输至神经细胞体，起到营养神经作用[8]。本研究中DPN组较单纯糖尿病组的NSE水平明显升高；高于正常值时，糖尿病患者发生周围神经病变的风险增加2.84倍，随着神经病变程度加重，浓度逐渐增加，因此对患者检测血清NSE来早期发现神经病变这一新途径有可能作为糖尿病神经病变诊断的一个补充，但是还有待于大样本进一步研究。

参考文献

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[3]段发兰，李亚新， 杨飞翔.2型糖尿病患者血清铁代谢相关指标检测意义[J].现代检验医学杂志,2015，30(3)：151-153

[4]张琳，李竞.铁过载与糖尿病及其神经并发症的研究进展[J].重庆医学,2014，43(3)：369-371

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[6]叶晓梅，张敏.2型DPN患者血清NSE的变化及其与周围神经病变关系的研究[J].浙江临床医学,2015，17(3)：362-365

[7]翟海军，朱晶，NSE在糖尿病周围神经病变中的应用价值[J].现代检验医学杂志,2015，30(4)：161-163

[8]Odagiri E.Neuron specific enolase[J]. Nihon Rinsho. 2010,68(17):759-761

(2016-02-25收稿)(库雪飞编辑)

The relationship of serum neuron specific enolization enzymes and ferritin with the severity of diabetic peripheral neuropathy

WEIJianfen,ZHANGWenyan,WANGYing,etal

(AffiliatedHospitalofNorthChinaUniversityofScienceandTechnology,Tangshan063000，China)

[ABSTRACT]ObjectiveTo study the relationship between serum level of neuron specific enolase、serum ferritin and the severity of neuropathy in patients with type 2 diabetes mellitus combined with diabetic peripheral neuropathy.To provide theoretical basis for the prevention and treatment of DPN.MethodsDetection the level of neuron-specific enolase by the method of radioimmunoassay,the level of serum ferritin was determined by using the method of chemiluminescence method.TCSS for classification of neuropathy.There were 50 cases without diabetic peripheral neuropathy,100 cases of diabetic peripheral neuropathy,to observe the correlation of serum NSE,SF level and TCSS scores in patients with diabetic peripheral neuropathy.ResultsIn diabetic peripheral neuropathy patients,the level of NSE(19.67±4.21)μg/L、SF(428.72±86.28)ng/mL,were higher than those without diabetes peripheral neuropathy(NSE:10.58±3.46μg/L、SF:263.15±74.03ng/mL)(P<0.01).Serum NSE.SF level and TCSS scores were rank dependent.ConclusionSerum NSE and SF level are closely related to the severity of diabetic peripheral neuropathy.

[KEYWORDS]Type 2 diabetes.Diabetic peripheral neuropathy.Neuron-specific enolase.Serum ferritin.TCSS

【基金项目】河北省医学科学研究课题计划项目(编号：20150504)。

【作者简介】魏剑芬(1971-)，女，硕士，副主任医师。研究方向：糖尿病并发症。

[中图分类号]R 587.1

[文献标识码]A

[文章编号]2095-2694(2016)03-183-05