多乐氟氟保护漆对乳牙釉质脱矿和再矿化效果的实验研究

刘 奕，尚 兰，周夕湲，费 伟

(四川省医学科学院·四川省人民医院 a.口腔科，b.放射科，c.皮肤科，四川 成都 610072)

多乐氟氟保护漆对乳牙釉质脱矿和再矿化效果的实验研究

刘 奕a，尚 兰b，周夕湲c，费 伟a

(四川省医学科学院·四川省人民医院 a.口腔科，b.放射科，c.皮肤科，四川 成都 610072)

目的 体外评价多乐氟氟保护漆对乳牙早期龋的脱矿和再矿化效果。 方法 离体乳牙标本80例，分为多乐氟组、5%氟化钠溶液组及人工唾液对照组，利用pH-循环模型在乳牙标本上形成人工龋，然后进行脱矿-再矿化循环处理，比较三组釉质表面钙释出率、乳牙牙釉质显微硬度及牙釉质表面氟含量的变化。 结果 多乐氟组乳牙釉质表面钙释出率明显低于5%氟化钠溶液组及人工唾液组，再矿化后的显微硬度、表面氟含量明显高于5%氟化钠溶液组及人工唾液对照组，差异均有统计学意义(P< 0.05)。结论 多乐氟可明显抑制乳牙早期龋脱矿，促进其再矿化。

多乐氟；氟保护漆；乳牙；再矿化

氟是世界一致公认的防龋剂，能够抑制脱矿和促进再矿化的发生，通过再矿化过程改变牙齿矿物质的含量，可抑制或扭转早期牙齿的龋坏过程[1]。目前的氟制剂普遍存在:与牙釉质表面的结合能力差，在口腔内存在时间短以及使用时操作不便等问题[2]。高露洁棕榈有限公司研制并生产的多乐氟(氟化钠护齿剂)被引进中国市场所应用，多乐氟是涂布于牙面的一种高浓度氟的保护漆，能够在有唾液的情况下附着于牙表面，具有使用方便、安全高效的优点[2]。但是，目前国内在临床应用该制剂的时间较短，也缺乏相关的研究资料。为了观察多乐氟对乳牙龋齿的防护效果，本文通过对多乐氟氟保护漆对乳牙釉质早期龋脱矿及再矿化作用进行实验研究，对多乐氟对乳牙早期龋的再矿化效果进行体外评价，探索多乐氟护齿剂促进乳牙早期龋再矿化的能力。

1 材料与方法

1.1 一般资料 离体乳牙标本取自四川省人民医院儿童口腔科就诊的5～7岁儿童，均为因滞留而同时拔除的下颌乳中切牙，均签署知情同意书。提供乳牙标本的儿童无系统性疾病、遗传病及发育异常。乳牙牙根吸收不超过根长的1/2。采集的牙标本均用生理盐水洗净，去除附着的色素、菌斑、软组织，在体视显微镜下挑选釉质颜色正常、表面光滑、无裂纹、缺损及脱矿的乳牙80颗，置于去离子水(pH值调至中性)中，放入4 ℃的冰箱中保存备用。

1.2 主要仪器和试剂 慢速切片机(Iosmet型，美国)，研磨抛光机(Ecomet型，美国)，显微硬度仪(Buehler，英国)，X射线光电子能谱仪(Axis Ultra DLD型，英国)，5%氟化钠溶液，多乐氟护齿剂(美国高露洁公司生产，含5%氟化钠，即22600 ppm的氟)，人工唾液配方:20 mmol/L NaHCO3，3 mmol/L NaH2PO4，1 mmol/L CaCl2，pH值为7.0。

1.2 方法

1.2.1 样本处理 从80颗乳牙标本中随机挑选40颗用慢速切片机将其沿牙体长轴以唇舌方向对半切开，每颗牙的一半作为对照组(人工唾液组)，另一半作为多乐氟组。剩下的40颗乳牙也按同样方法对切，一半作为对照组(人工唾液组)，一半作为5%氟化钠溶液组，均以自凝塑胶包埋，凝固后在流水下将包埋好的釉质块打磨平整光滑，仅在牙冠唇面中1/3处开窗，形成1.5 mm×1.5 mm正方形釉质暴露区域，此区用于涂布实验制剂，其余部分用无色指甲油涂布抗酸。开窗区的牙釉质表面首先用75%乙醇消毒，自然干燥。

1.2.2 人工龋的形成 将上述处理好的三组的离体乳牙标本固定在pH-循环模型(pH-cycling model)上，进行如下循环:三组标本分别处理对应实验用液5 min(2 ml/每样本)，酸性缓冲液(50 mmol/L醋酸，1.5 mmol/L KH2PO4，pH5.0)，中性缓冲液(20 mmol/L羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5 mmol/LKH2PO4，pH7.0)处理1 min，循环重复12次，酸性缓冲液保留待测。采用原子吸收光谱法测定酸性缓冲液中的钙浓度，计算机辅助图象分析系统测定釉质块脱矿面积，用钙释出率[calcium depletion rate，CDR，μg/(mm2·h)]表示，观察结果。

1.2.3 再矿化处理 将已脱矿的乳牙釉质块，进行脱矿-再矿化循环，37 ℃水浴中振荡进行: 一周后将以上脱矿釉质块用去离子水冲洗干净。实验组釉质块分别涂布多乐氟和5%氟化钠溶液，对照组浸泡于人工唾液中，37 ℃孵育两周，实验液5天更换一次。

1.2.4 显微硬度测定 利用显微硬度仪测定包埋好的乳牙釉质块的表面洛氏硬度值，加载0.01 HK(98.07 mN)的负荷，加载时间15 s，每个样本在处理面不同位置测定5次取平均值，作为该标本的硬度值。测定脱矿前、后及再矿化后实验组和对照组乳牙釉质块的表面洛氏显微硬度值。用统计学方法分析比较脱矿前、后，及再矿化后釉质块的表面显微硬度值的变化情况。

1.2.5 X射线光电子能谱仪检测 将乳牙釉质块按相应分组分别涂布实验用药5 min后，将牙齿放入24 孔板(每孔1个牙齿、1 ml去离子水)，并置于37 ℃恒温水浴振荡箱中。分别于涂布后静置48 h，从每组各随机取出3 个釉质块，并在体视显微镜下用丙酮仔细擦除表面指甲油、用乙醇擦除氟化物涂膜；将三组标本置于干燥箱内干燥24 h后，常规真空镀膜，扫描电镜下用X 射线能谱仪测定各牙釉质表面氟含量(每个牙每个区域各随机测量3个点，取平均值)，单位为氟元素占所测元素(C、O、F、Na、Mg、Si、P、Ca)中的百分含量。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0 版本的统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差表示，两两比较采用t检验。P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组钙释出率的比较 经人工龋液浸泡后，肉眼观察牙釉质面开窗区对照组均呈现白垩色，表面无光泽，有的还出现明显的凹陷。多乐氟组、5%氟化钠溶液组及人工唾液组的单位面积钙析出率均值分别为(3.235±0.14)、(3.852±0.15)及(8.960±0.15)μg/ml，多乐氟组低于5%氟化钠溶液组，差异有统计学意义(t=8.8827，P< 0.05)。

2.2 三组表面显微硬度的比较 多乐氟组和5%氟化钠溶液组脱矿后及再矿化后表面显微硬度值均高于人工唾液对照组，脱矿后显微硬度值多乐氟组高于5%氟化钠溶液组，差异有统计学意义(t=6.6781，P< 0.05)，再矿化后表面显微硬度值多乐氟组高于5%氟化钠溶液组，差异有统计学意义(t=9.3321，P< 0.05)，见表1。

表1 各组牙釉质表面显微硬度分析 (HV)

2.3 三组能谱法测定比较 多乐氟组、5%氟化钠溶液组及人工唾液组氟元素含量分别为(0.36±0.15)wt%及(0.33±0.21)wt%及(0.18±0.08)wt%，多乐氟组高于5%氟化钠溶液组，差异有统计学意义(t=5.3296，P< 0.05)。

3 讨论

通常情况下，牙体表面的脱矿与再矿化保持着动态平衡[3]，龋损的形成是交替进行的釉质脱矿与再矿化的动态平衡被破坏的结果；而使口腔中形成一个有助于促进早期釉质龋再矿化的环境是控制龋病的重要方法[4]。氟对抑制脱矿和促进再矿化具有重要作用，氟离子可以竞争性地结合钙桥，阻碍菌斑形成，降低釉质溶解度和促进釉质再矿化[5]。其常用的方法主要是局部应用，包括含氟牙膏、含氟漱口水、氟化粘接材料、氟凝胶、氟泡沫和含氟涂料等[3]。

多乐氟是涂布于牙面的一种高浓度氟的保护漆，能够在有唾液的情况下附着于牙表面。目前，我国及欧美国家普遍使用的是高露洁公司生产的含5%氟化钠的多乐氟氟保护漆，用于牙脱敏及防龋效果显著[6]。多乐氟保护漆通过延长氟与牙釉质的接触时间，改善了含氟漱口液的不足。研究发现，乳牙釉质表面局部涂布多乐氟保护漆后，釉质中的氟浓度明显升高。缩短该制剂的涂布周期，能有效增加釉质表层内的氟含量，但釉质内氟含量并不随多乐氟涂布剂量增加而升高[5]。Lee等[7]也认为，应用多乐氟能够使釉质内氟含量大幅度提高。多乐氟的物理性状决定了它比传统的氟化钠溶液能更好地附着于釉质层。多乐氟在欧洲国家已广泛应用，近两年开始逐步进入我国。Weinstein等[8]在对62例12～24月龄的患龋高危儿童中使用多乐氟保护漆发现，患龋率下降8%。大量临床研究也发现，多乐氟对于缓解牙颈部牙本质过敏症状效果显著[9，10]。

多乐氟由于其含有天然树脂成分，可迅速粘结到牙齿表面并停留一段时间，多乐氟中的浓缩氟离子可在牙齿表面形成一层类似氟化钙的小球状物质大量沉积于牙釉质内，该小球状物质通过口腔内蛋白磷酸酶得以稳定，成为不可溶的氟化物保护层，可促进再矿化作用[1]。但该小球状物质并不能与釉质晶体持久结合，釉质内氟离子会不断析出，随着时间的推移，氟含量逐渐下降。因此，为了维持牙釉质内的氟含量，需要重复使用氟保护漆。多乐氟的临床作用有:①有助于抵御酸的侵蚀，改变牙齿表面的物理化学性质；②可进入到残留的菌斑中，抑制菌斑的细菌代谢，抑制脱矿，促进再矿化；③在菌斑和脱矿后的釉质中形成氟化钙，改善釉质的结晶性[11]。但由于国内在临床应用多乐氟护齿剂的时间较短，相关的研究资料也比较缺乏。本实验通过对多乐氟氟保护漆对乳牙釉质进行早期龋脱矿及再矿化的研究，初步证实多乐氟有较好地降低釉质脱矿和促进再矿化的效果。

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The effect of Duraphat varnish on demineralization and remineralization of deciduous teeth in an experimental study

LIU Yia，SHANG Lanb，ZHOU Xi-yuanc，FEI Weia

(a.Department of Oral Medicine，b.Department of Radiology，c.Department of Dermatology，Sichuan Academy of Medical Sciences & Sichuan Provincial People’s Hospital，Chengdu 610072，China)

FEIWei

Objective To evaluate the effect of Duraphat varnish on demineralization and remineralization of deciduous teeth.Methods Eighty isolated deciduous teeth were collected from clinic and randomly divided into three groups: Duraphat varnish group，5% sodium fluoride group and artificial saliva control group.The artificial caries were created in these specimens by using a pH cycling model and then，continually treated with demineralization-remineralization cycle.The calcium release rate，microhardness and fluoride distribution on the enamel were compared among the three groups.Results The results showed that the mean values of calcium release rate on enamel surface in the Duraphat group was significantly lower than that in the 5% sodium fluoride group and control group (P< 0.05).The mean values of microhardness after remineralization，and fluoride concentration in the Duraphat group was significantly higher than that in the 5% sodium fluoride group and control group (P< 0.05).Conclusion Duraphat varnish can obviously inhibit the demineralization and promote the remineralization of early caries of deciduous teeth.

Duraphat，Varnish，Deciduous teeth，Remineralization

四川省人民医院博士基金项目(编号：30305030568)

费 伟

R788

A

1672-6170(2016)02-0099-03

2015-09-28；

2015-11-16)