237例孕妇羊水细胞染色体遗传分析

周 伟 李新伟 许世敏

237例孕妇羊水细胞染色体遗传分析

周 伟 李新伟 许世敏

目的 分析孕妇羊水细胞染色体异常情况及其与产前诊断各指征之间的联系，探讨羊水细胞染色体核型检查在产前诊断中的作用。方法 通过细胞遗传学方法，对237例具有产前诊断指征的孕妇进行羊水细胞培养，并分析其染色体核型。结果 237例孕妇羊水培养成功率98.73%（234例）。检出异常核型11例(4.7%)，其中数目异常占异常核型的54.55%（6例），以三体型为主，结构异常占异常核型的36.36%（4例）。在各项产前指征中，B超检查异常和高龄孕妇受检人数最多，超声指标异常的染色体核型异常检出率最高（8.06%），与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论羊水细胞的染色体核型分析能够有效地对胎儿染色异常进行诊断，是进行产前遗传诊断的有效手段。

产前诊断；羊膜腔穿刺；羊水细胞培养；染色体核型分析

染色体病是导致新生儿出生缺陷的重要因素之一，目前尚无有效地治疗方法，成为越来越严重的公共卫生和社会问题[1]。控制染色体病发生的关键手段是产前诊断[2]，其中在孕期进行羊水细胞染色体核型分析是目前诊断胎儿染色体疾病的主要方法之一。本研究对2010～2012年符合羊膜腔穿刺指征的237例孕妇进行羊水细胞染色体遗传分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010～2012年在郾城区人民医院产科就诊的具有进行羊膜腔穿刺指征的237例孕妇，受检孕妇年龄19～43岁，孕16～25周。根据孕期情况分为：（1）不良孕产史组36例；（2）高龄组（≥35岁）89例；（3）血清筛查高危异常组31例；（4）B超检查异常组62例；（5）不良接触史组19例。

1.2 方法 首先排除孕妇无羊膜腔穿刺禁忌证，签署知情同意书。常规消毒，在B超引导下进行羊膜腔穿刺，穿刺成功后先抽取1～2 mL羊水弃去，以防母体细胞污染。然后重新抽取羊水20 mL，离心获得羊水细胞并进行培养，细胞收获后进行G显带，显微镜下进行染色体核型分析，每例分析5个核型，计数30个中期分裂相，嵌合体计数加倍。

1.3 统计学方法 用SPSS 13.0统计包对相关数据进行统计学处理，计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 异常染色体检出率与羊水穿刺不同指征的关联 237例羊水细胞体外培养成功234例，成功率为98.73%。共检出染色体异常核型11例，异常检出率4.7%。见表1。其中，B超检查异常组的异常检出率为8.06%，明显高于其他组，在所有染色体异常病例中占比例也明显高于其他组（P＜0.05）；高龄组受检人数最多，异常率为4.49%；不良孕产史组异常检出率（2.78%）略低于血清筛查组（3.23%）。

表1 不同羊膜腔穿刺指征的染色体异常检出情况

2.2 染色体异常核型检出情况 染色体异常核型的检出情况见表2，其中染色体数目异常共6例，占异常核型的54.55%，包括4例常染色体三体型和1例特纳综合征，另有1例21-三体嵌合型；检出染色体结构异常4例，占36.36%，包括缺失、易位和倒位等；此外，还检测到1例染色体多态性核型。

表2 染色体异常核型分类

3 讨论

染色体异常容易导致新生儿先天性多发畸形、智力低下等，不但给家庭带来沉重负担，也影响新生人口的整体素质，通过及时准确的产前诊断能较好地避免出生缺陷的发生。本研究对237例具有产前羊膜腔穿刺指征的孕妇进行核型分析，成功234例，共检出异常核型11例，检出率为4.7%，接近相关报道[3]。调查显示，B超检查异常组的异常核型检出率最高，为8.06%。B超在胎儿畸形筛查中被广泛应用，为广大孕产妇所接受，由于B超对新生儿畸形的筛出率高[4]，所以，在染色体异常筛查中具有参考价值，应特别关注该类人群，提倡进行染色体筛查。高由于龄孕妇（≥35岁）卵子形成过程中容易发生染色体不分离，从而造成染色体数目异常，尤其是三体核型的发生[5]。本研究中高龄组的染色体异常检出率仅次于B超检查组，因此，对于高龄孕妇，产前诊断非常重要。血清筛查是常用的产前诊断手段之一，血液中甲胎蛋白（AFP）、妊娠相关蛋白（PAPP-A）等相关蛋白浓度的异常通常与新生儿神经管畸形及染色体异常相关[6]，本组异常染色体核型检出率为3.23%，明显高于普通人群[7]，这提示在孕早期对血清筛查异常孕妇进行核型分析的必要性。总之，在进行产前筛查时，应该综合不同的筛查指征，对高危孕妇进行羊水细胞染色体核型分析。

本研究所检测的染色体异常核型包括6例结构异常和4例数目异常，另有1例为染色体多态性。其中检出最多的是染色体三体型，这是最常见的染色体异常核型，常表现为严重的生长发育障碍、智力低下、多发畸形等，三体型的发生一般是由于生殖细胞在形成过程中发生染色体不分离所造成的，一般与孕妇年龄关系密切[8]。本研究中有3例三体型就是在高龄孕妇中筛查到的，所以对于高龄孕妇一般尽量建议进行唐氏筛查。在染色体数目异常中，有1例为特纳综合征，该核型容易导致胎儿流产或者新生儿性腺发育不全。结构异常中包括平衡易位和倒位各1例，这类畸变通常不会造成遗传物质丢失，胎儿一般正常，但携带者会产生异常配子，导致后代流产、死胎以及染色体异常，所以应加强生育指导，详细告知孕妇其子代今后的婚育风险，以便孕妇能够更好的进行选择[3]。此外，本研究还发现1例染色体多态性，由于染色体多态仅是染色体微小变化，一般妊娠结局良好，但也有报道该类染色体异常可导致异常生育，有一定的遗传效应，具体的机制和影响有待进一步研究[9]。总之，虽然目前也有一些无创或微创的产前诊断技术，但由于价格昂贵，技术要求高以及不成熟等局限性，目前还不能被推广使用。为了预防染色体病患儿的出生，检出携带者，通过羊水染色体核型分析进行产前诊断，能有效地检测出染色体异常患者，为孕产妇生育提供正确的遗传指导依据，这对于提高人口素质、降低出生缺陷有重要意义。

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Objective To analyze the relationship of the chromosomal karyotypes in amniotic fluid cell with the prenatal diagnosis indications, and investigate the significance in prenatal diagnosis indications. Methods Amniotic fluid cell culture and karyotypes analysis were carried out in the 237 cases of pregnancy women for prenatal diagnosis. Results 234 cases were cultured successfully in 237 pregnancy women, the successful rate was 98.73%.11 fetuses(4.7% )were found with abnormal karyotypes which incluted 6 cases of numerical abnormalities chromosomes(54.55% in abnormal chromosome) and 4 cases of tructural abnormality chromosomes(36.36% in abnormal chromosome). Detection rate of abnormal karyotype on ultrasound was highest(8.06%), there was significantly difference compared with the other groups(P＜0.05). Conclusion Amniocentesis and chromosomal karyotyping in amniotic fluid cells which carrying out in the high risk pregnancy women is the effective prenatal diagnosis methods.

Prenatal diagnosis; Amniocentesis; Amniotic fluid cells culture; Chromosomal karyotyping

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.10.002

河南省科技厅年度计划项目 （132300410471）

河南 462002 漯河医学高等专科学校 （周伟 李新伟） 漯河市郾城区人民医院 （许世敏）