Myd88在狼疮性肾炎患者血清组织中的表达及意义

赵彦丛

(邯郸市涉县医院 输血科,河北 邯郸056400)



Myd88在狼疮性肾炎患者血清组织中的表达及意义

赵彦丛

(邯郸市涉县医院 输血科,河北 邯郸056400)

狼疮性肾炎对系统性红斑狼疮(SLE)的预后影响较大,导致的肾功能衰竭是该病主要死亡原因之一。已有报道[1]发现Toll受体在该病免疫应答过程中起着重要作用，人髓样分化因子88(Myd88)是该信号通路中接头蛋白，调控着信号的转导，Myd88在免疫应答中具有非常重要的作用。本研究通过检测Myd88在狼疮性肾炎患者血清组织中表达，对其临床意义进行了分析，现报道如下。

1资料与方法

1.1临床资料

2014年2月-2015年2月64例狼疮性肾炎患者为观察对象，根据SLEDAI评分分成2组，A组非活动期32例，男3例，女29例，年龄18-46岁，平均(30.8±6.4)岁，病程1个月-6年，平均(1.4±1.2)年，B组活动期32例，男2例，女30例，年龄19-48岁，平均(31.2±6.2)岁，病程3个月-8年，平均(1.6±1.3)年，排除合并感染、肿瘤和其他自身免疫性疾病。32名健康志愿者作对照组，男4例，女28例，年龄20-45岁，平均(29.8±5.8)岁，3组的性别、年龄等资料比较无显著差异(P>0.05)，具可比性。

1.2诊断标准

狼疮性肾炎的诊断标准[3]：①尿蛋白定量>0、>5g/d或>4mg/(kg.h)；②尿红细胞>5g/HPF(离心尿检)；③肾功能出现异常；④肾活检异常；4项中具备任1项即符合狼疮性肾炎。

1.3免疫组化法检测组织Myd88表达制作肾组织切片：经皮肾穿刺活检取得肾组织，福尔马林缓冲剂固定，梯度酒精脱水，浸蜡包埋，切片，温水展开，置于多聚赖氨酸防脱载玻片，温箱烤干，待染色。免疫组化染色按试剂盒说明书操作。每张切片选3个高倍视野观察。将检测结果同肾脏病理活动指数、系统性红斑狼疮疾病活动度评分(SLEDAI)评分和24 h尿蛋白定量进行比对，Spearman相关检验分析相关性。

1.4统计学分析

2结果

A组、B组Myd88阳性表达率25.0%、53.1%，对照组阳性表达率为0，组间比较差异具统计学意义(P<0.05)，见表1；B组的肾脏病理活动指数、SLEDAI评分和24h尿蛋白定量均明显高于A组，Myd88同上述肾脏功能性指标呈正相关性，见表2。

表1　3组的Myd88免疫组化分析结果

注：组间免疫组化评分比较：A、B组明显高于对照组，t=8，24，P<0.01；B组明显高于A组，t=16，P<0.01.组间阳性表达率比较：A、B组明显高于对照组χ2=9.14，23.2，P=0.003，<0.01；B组明显高于A组，χ2=5.3，P=0.02

表2　　　Myd88同肾脏病理活动指数、SLEDAI评分和

3讨论

系统性红斑狼疮是常见自身免疫疾病，流行病学调查显示我国该病患病率为0.007%，以育龄女性居多。多数学者[2,3]认为狼疮性肾炎是一种免疫复合物介导性肾炎，自身反应性T、B淋巴细胞高度活化、多种细胞因子的相互作用、免疫复合物的形成与沉着等是肾损害发生的主要机制。系统性红斑狼疮通过免疫复合物沉积等途径造成多个系统和器官的损害，狼疮性肾炎严重影响预后。

Toll样受体信号通路在自身免疫应答中起重要作用，该受体通过识别病原相关分子模式诱导免疫效应分子表达，激活多种前炎性因子参与抗感染过程[4,5]。该受体同特异性配体结合后可刺激如IL-6、IL-12和TNF-a等细胞因子表达，从而对免疫细胞进行调控，其同自身免疫性疾病相关性受到广泛关注。Myd88是该信号通路中的重要蛋白，参与传递多种不同受体的活化信号，实验发现该蛋白参与促炎症细胞因子IL-6的调节[6]。本研究通过免疫组化法检测狼疮性肾炎患者血清组织中Myd88的表达水平，并将检测结果同疾病活动度进行了相关性分析。表明活动期和非活动期的狼疮性肾炎患者的Myd88阳性检出率明显高于健康志愿者，Myd88免疫组化评分均高于健康志愿者，说明狼疮性肾炎患者血清组织Myd88处于高表达水平。Myd88被誉为TLR 信号通路的“瓶颈”，TLR/Myd88 信号通路被证实和自身免疫性疾病存在密切关联。TLR通路信号由 Myd88 传导，最终激活下游转录因子，其中包括NF-κB、IRF 3、2中转录因子上调机体防御蛋白和促炎症因子TNF-α、IL-6、IL-12、INF-β的表达，该通路是多调节功能传导通路，在免疫炎症反应中发挥重要作用。一般来说，正常人炎症因子处于平衡状态，狼疮性肾炎患者炎症因子多，可能和Myd88表达增多有关。肾脏病理活动指数、SLEDAI评分和24 h尿蛋白定量均是肾脏损害程度的反映指标，通过分析Myd88同上述指标关联性发现活动期狼疮性肾炎肾脏病理活动指数、SLEDAI评分和24 h尿蛋白定量明显高于非活动期，活动期患者Myd88表达量和阳性率明显高于非活动期，Myd88表达量同肾脏病理活动指数、SLEDAI评分和24 h尿蛋白定量呈正相关。Myd88高水平表达可能促使炎症因子表达，一定程度的反映肾功能损害程度，对该病临床预后有重要指导意义。通过上述分析可以看出接头蛋白 Myd88同自身免疫性疾病间存在关联，笔者认为该蛋白不仅可以用于指导疾病治疗效果，还可以将其作为疾病干预治疗靶点，用RNA 干扰、基因敲除、靶点化合物治疗等方式来调节Myd88表达。增强 Myd88 信号可用来提高疫苗效能、提高病毒载体介导基因治疗效果等[7]，而削弱 Myd88 信号有益于自身免疫性疾病和某些炎性疾病的的治疗。

参考文献：

[1]Wenzel J,Held C,Palmisano R,et al.Measurement of TLR-induced macrophage spreading by automated image analysis:Differential role of Myd88 and MAPK in early and late responses[J].Front Physiol，2011,2(18):71.

[2]Chaudhary A,Ganguly K,Cabantous S,et al.The brucella TIR-like protein TcpB ineracts with the death domain of Myd88[J].Biochem Biophys Res Commun,2012,417(1):299.

[3]吴燕燕，王易.Toll样受体信号通路中Myd88的研究进展[J].免疫学杂志，2012,28(3):262.

[4] 章烈，李园，周总光.髓样分化因子 88 的研究进展：把握 TLR 信号通路中的瓶颈[J].中国普外基础与临床杂志，2013,20(6):685.

[5]Li W,Liu HD,You WC,et al.Enhanced cortical expression of myeloid differentiation primary response protein 88(Myd88) in patients with traumatic brain injury[J].J Surg Res，2013,180(1):133.

[6]李佩宏，李文奇.IgA肾病患者尿蛋白和血管内皮生长因子的相关性研究[J].重庆医学，2014,12(8)：918.

[7]陶于洪,罗秋红.Toll 样受体与肾脏疾病研究进展[J].实用儿科杂志,2012,27(17):1362.

免疫组化结果判定：细胞核或细胞质中出现棕黄色颗粒提示阳性细胞，判读时参考如下标准：①阳性细胞百分比<1%计0分，1%-10%计1分，10%-30%计2分，30%-60%计3分，60%以上计4分；②阳性细胞染色强度：无黄色颗粒计0分，淡黄色计1分。黄色计2分，棕黄色计3分。免疫组化评分为2项评分结果之和，0-2分为阴性3-7分为阳性。

文章编号：1007-4287(2016)05-0806-02

(收稿日期：2015-08-11)