结核感染T细胞、结核抗体、抗酸染色3种方法的临床评价

滕晓梅

(徐州市第一人民医院检验科，江苏徐州 221002)



·经验交流·

结核感染T细胞、结核抗体、抗酸染色3种方法的临床评价

滕晓梅

(徐州市第一人民医院检验科，江苏徐州 221002)

摘要:目的评价结核感染T细胞检测、结核抗体、抗酸染色3种方法检测对结核病诊断的价值。方法对怀疑结核的患者标本进行抗酸染色的检测、结核感染T细胞检测、结核抗体的检测，最后对3种方法的结果对结核病的诊断效果进行判断。结果本研究共纳入80例患者，抗酸染色阳性的24例，结核感染T细胞检测四项结果均阳性的58例，结核抗体阳性的65例，最终确诊结核患者为62例。结论3种方法中抗酸染色作为一个传统的方法不可丢弃，抗酸染色的方法最可靠，但是阳性率偏低；结核感染T细胞检测容易出现假阴性，此方法检测时间漫长，但是是一种具有较高敏感性和特异性的检测结核感染的技术；结核抗体检测容易出现假阳性(打过卡介苗的患者也可以出现阳性)，也是一种不可缺少的辅助诊断方法。在对结核病的诊断过程中，三者进行联合检测可以增加了对结核病诊断的正确率，减少假阳性率与假阴性率。

关键词:结核感染T细胞检测；结核抗体；抗酸染色；结核病

结核病是一种古老的疾病，卡介苗应用有效地遏制了结核病的发展。但是，近几年结核病的发病率又有增加的趋势，这和人口的流动有很大关系。尽早地确诊和治疗能够有效地预防结核病的传播，及时地发现结核病尤为重要。这就对检测手段提出了一定的要求，既要准确又要快速，而且损伤小、成本小。笔者所在的实验室能对结核病做出辅助诊断并能对所开展的项目进行研究。

1资料与方法

1.1一般资料2013年至2014年本院住院并确诊为结核病的患者。

1.2方法结核感染T细胞、结核抗体检测及抗酸染色3种检测严格按照SOP文件进行操作。(1)结核感染T细胞检测：采集不少于4 mL静脉血于肝素抗凝管中，2 h内将全血颠倒混匀每分钟3～5次倒入标记为“T”、“N”、“P”三种培养管中，再混匀5次后37 ℃培养(22±2)h，培养后3 000～5 000 r/min离心10 min，取上清液加入待测样品孔中，混匀封板37 ℃ 60 min后加酶标试剂50 μL。混匀封板37 ℃放置60 min，洗板5遍，加显色剂A、B液各50 μL，37 ℃避光显色15 min，加终止液震荡混匀，10 min后450 nm检测。(2)结核抗体：将待测血清2滴加入检测孔中，水平放置，15 min内观察结果，超过15 min判断结果无效。(3)抗酸染色：采用热染法，将合格标本涂于玻片上，自然干燥后经火焰固定，滴加石碳酸复红，用微火加热保持染液冒蒸汽约5 min。冷却后水洗，滴加酸性酒精脱色至无色，水洗。滴加亚甲蓝染色约1 min，水洗镜检，查找抗酸杆菌。

2结果

3种检测方法各有优缺点，阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。3种检测方法对两组临床标本检测结果见表1。

表1　　3种检测方法及联合检测对80例临床标本检测

3讨论

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的一种传染性疾病，结核分枝杆菌属于放线菌目分枝杆菌科分枝杆菌属，它可侵犯全身各器官。结核感染T细胞检测的原理为全血标本经结核分枝杆菌特异性抗原体外刺激后产生的γ干扰素(IFN-γ)，根据IFN-γ的浓度判断是否具有针对结核分枝杆菌特异性的T细胞免疫反应。结核抗体检测是用基因工程重组的结核杆菌抗原去检测样本中的抗体。抗酸染色则用染色法去检测患者标本(痰、胸腹水、尿等)是否存在结核杆菌。3种方法各有缺陷和优点，结核感染T细胞的检测局限性易出现假阴性，例如培养过程中培养细胞易受损或者受试者本身如果免疫缺陷都可以出现假阴性；如果以往感染过结核或者注射过卡介苗结核抗体可能阳性或者强阳性；患者在排菌期抗酸染色阳性率很高，如果不在排菌期也能查到结核杆菌但是易被忽略。3种方法损伤性最小的为抗酸染色，准确率最高的为抗酸染色，费用最少的也为抗酸染色，操作最复杂的为结核感染T细胞的检测。但是三者结合可以提高结核临床诊断的准确率。

参考文献

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(收稿日期：2016-01-19)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.061

文献标识码：B

文章编号：1673-4130(2016)08-1149-02