樟树组织培养育苗技术

谭定新

摘 要：樟树是生长于我国南方地区的常绿阔叶乔木的代表树种，但传统育苗技术中的播种育苗、扦插育苗和嫁接育苗各有不足，组织培养育苗作为一种新型快繁育苗技术，有望在实现工厂化优质育苗方面后来居上，因此本文对该项技术进行了分析。

关键词：樟树；组织培养；育苗

樟树[Cinnamomum camphora （L.） Presl.]是我国南方地区常见的阔叶常绿乔木，从东部的台湾、浙江到西部的四川，由北面的湖北至南方的海南，如此广阔的国土上都可见到它婆娑的身姿。樟树高大挺拔，树形美观，能吸烟滞尘和固土防沙，是优良的绿化树种；材质坚韧，纹理优美，防虫耐腐，又是上好的用材树种；根、茎、叶中可提取香精油，还是重要的化工原料树种。所以，樟树种植非常受欢迎。目前樟树育苗可采用播种育苗、扦插育苗、嫁接育苗和组织培养育苗（组培育苗）4种方式。播种育苗发芽率高，但易变异，无法保持母本优势。扦插育苗能保持品种优良特性，但受材料和季节局限，且多代繁殖也会出现品质衰退现象。嫁接育苗可保持优良品系，但同样存在材料和季节限制问题。组培育苗既可保持品种优势，又不受材料和季节影响，是工厂化育苗的最佳方式。虽然樟树组培育苗试验已取得不少积极成果，但规模化生产鲜有报道。作为一项朝阳技术，当前存在的困难是暂时的，组培育苗必然具有广阔的前景，因此本文对该项技术进行了分析。

一、材料选择

1.树种选择。按用途分类，樟树有香料工业原料、景观绿化、防护林、珍贵用材等用途。以叶精油种类和含量区分，樟树包括芳樟、脑樟、油樟、异樟、龙脑樟和杂樟等类别。组培育苗时，应先根据用途选择适宜的品种。香料工业原料用樟树必须满足一定的叶精油含量，芳樟中芳樟醇含量应达到33.32%～97.69%，脑樟中脑樟含量应达到32.33%～92.03%，油樟中黄樟油素含量应达到36.53%～69.35%。其他用途的樟树对叶精油含量没有严格要求，可按主要用途来选择，如景观绿化用樟树应选择高大、树形优美的树种，防护林用樟树应选择枝繁叶茂、防风固沙效果好的树种，珍贵用材樟树宜选择材质紧密、纹理优美的树种。

2.外植体选择。目前，樟树组培育苗主要采用以下外植体：启动培养采用茎段，愈伤组织诱导采用茎段、嫩叶和侧芽，初代培养采用嫩枝和嫩梢，继代培养采用茎段和嫩梢，增殖培养采用茎段和嫩枝，生根培养采用茎段、嫩枝、嫩梢及继代单芽。另外还有利用子叶胚培养的。一般情况下宜选择当年生、健壮的嫩枝或嫩梢，取回实验室后剪去叶片、冲洗干净、切段后在无菌条件下消毒。

3.培养基选择。樟树组培育苗培养基大都采用MS培养基或改良MS培养基、DCR1培养基，再加入细胞分裂素6-BA（6-苄基氨基嘌呤）/6-KT（6-糠氨基嘌呤）及生长素NAA（萘乙酸）/IBA（吲哚丁酸）/2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）/IAA（吲哚乙酸），还可加入GA（赤霉素）、蔗糖等。

二、组织培养

1.无菌环境的保障。组培育苗要求无菌环境，如果污染很可能面临全部失败的风险。工厂化育苗应从更衣室、接种室、培养室到存放培养基的储藏室都保持无菌条件。除了日常消毒和专人管理以外，还应确保室内湿度不超过70%。

2.外植体消毒。消毒有多种方法。一是先用75%酒精浸泡15～20s，无菌水冲洗5～8次，在0.1%HgCl2溶液内浸泡8～15min，再以无菌水冲洗5～8次，用无菌滤纸吸干外植体表面水分后进行接种。二是把外植体放入0.2%灭菌净中并在超声波清洗仪内处理20～30min，无菌水洗净后，再在滴加了3滴吐温-80的0.1%HgCl2溶液内处理5min，无菌水洗净后接种。

3.初代培养。初代培养物应为长1～2cm，含1个腋芽的茎段或2～3个腋芽的顶梢。培养基为或，并加入3.0%蔗糖。培养温度为25～30℃，每日光照12～16h，光照强度1000～3000lx。

4.继代培养。观察初代培养物获得新芽丛后就可以进行继代培养。将芽丛分切，每个部分有2～3个芽，作为继代培养物。培养基为改良MS+6-BA 0.8mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1或或。另加入3.0%蔗糖。培养温度和光照条件同初代培养。接种25d后增殖倍数应达到2.69～3.46倍，芽苗生长状况应良好，即粗细适中，无愈伤组织及芽顶尖褐化坏死现象，并且叶片舒展。繁殖系数是工厂化生产稳产高产的决定性因素，如果繁殖系数较低，应调整培养基配方。扩繁有以芽繁芽和以段繁段两种方式，一般前者繁殖较快，但易产生褐化、玻璃化等问题，后者繁殖系数相对小一些。玻璃化一般认为是因透气性差、细胞分裂素浓度过高所致，故应采用无菌透气滤膜并维持较低激素水平。

5.生根培养。从继代培养物中挑选生长健壮、苗高≥1.5cm的芽苗，用于生根培养。培养基为MS+IBA 1.0mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1或1/2MS+IBA 0.5mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1或1/3MS+IBA 0.35mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+Ac 0.2 g·L-1或1/2MS+IBA 2.0mg·L-1+IAA 1.7 mg·L-1+6-BA 0.1mg·L-1+ NAA 0.05 mg·L-1。另加2.0%蔗糖和0.7%卡拉胶。培养温度和光照条件同初代培养。培养时间10～15d，生根率应达94%～96%以上。

6.驯化。生根转接后要进行驯化，方法是先置于光照800lx的培养架上，待10d再置于光照1500lx培养架的顶层，再7d后置于加遮荫网的大棚中，光照1500～3000lx炼苗30d，苗高达到30cm以上即可移栽。

7.移栽。移栽基质可采用泥炭土与黄心土体积比1：4配制或65%泥炭、25%木糠、10%珍珠岩配制的轻质基质，后者方便运输、根系吸水能力强。容器可选用塑料营养袋或多孔穴盘。移栽后立即浇水，搭建塑膜小拱棚，喷施800～1000倍多菌灵1次。逐步打开薄膜，小苗长出新叶后可薄施肥。1个月后进行正常水肥管理。

三、结语

组培育苗技术已在农作物和一些林木育苗生产中获得成功应用，樟树组培育苗试验也取得不少积极成果。但组培育苗工厂化生产是一个系统工程，目前在规模化生产方面的技术并未完全成熟，随着结合生产的研究不断深入，樟树组培育苗规模化生产为期不远了。

参考文献：

[1] 周丽华，蔡燕灵，曾令海，等. 樟树优良家系的组培育苗技术研究[J]. 热带作物学报，2013，34（1）：67-73.

[2] 余荣卓. 樟树品种选择在园林绿化中的应用[J]. 农学学报，2013，3（08）：52-56.