血清维生素D浓度与子宫内膜癌相关性研究*

西安交通大学第二附属医院妇产科(西安710004)　段　钊　韩红芳　王　颖



血清维生素D浓度与子宫内膜癌相关性研究*

西安交通大学第二附属医院妇产科(西安710004)段钊韩红芳王颖

摘要目的：探讨血清维生素D浓度与子宫内膜癌的相关性。 方法：收集子宫内膜相关病变患者118例为试验组，其中子宫内膜增生症22例，子宫内膜癌96例，并以30例体检健康妇女作为对照组。收集所有研究对象的清晨空腹肘静脉血标本。采用放射免疫法检测标本血清中维生素D的浓度。结果：子宫内膜癌患者血清维生素D水平较正常对照组减低，随着子宫内膜癌病理分级及FIGO分期的升高，血清维生素D浓度逐渐减低，有淋巴转移患者较无淋巴转移者血清维生素D浓度亦减低，差异均有统计学意义。结论：血清维生素D浓度与子宫内膜癌恶性程度呈负相关。

主题词子宫内膜肿瘤 维生素D@抗肿瘤作用

本研究通过检测子宫内膜癌患者血清维生素D的浓度，初步探讨血清维生素D水平与子宫内膜癌临床病理学特征间的相关性。

对象与方法

1研究对象收集2014年1月至2015年12月西安交通大学第二附属医院妇产科收治的子宫内膜相关病变患者118例为试验组，其中子宫内膜增生症22例，子宫内膜癌96例，并以30例体检健康妇女作为对照组。收集研究对象的清晨空腹肘静脉血标本。所有病例按照子宫内膜活检或术后病理学诊断分组，所有患者均未行放疗、化疗和激素治疗，试验组年龄28～72岁，平均年龄50.5岁，对照组年龄25～70岁，平均年龄45.5岁。子宫内膜癌的分类按照1988年国际妇科病理协会(ISGP)的分类法分类，并按2009年5月国际妇产科联盟(FIGO)重新修订的子宫内膜癌的手术病理分期标准进行病理分级和分期[1]。

2方法标本采集及预处理 取患者的空腹静脉血5ml，分离血清，冻存于-80℃的冰箱。血清VD测定采用采用酶联免疫法检测，酶标仪检测血清25(OH)2VD3，具体操作步骤按照说明书进行。

3统计学方法所有数据应用SPSS13.0 软件包进行统计分析, 方法包括t检验、单因素方差分析等，P<0.05认为有显著性差异。

结果

正常对照组25(OH)2VD3水平为37.78±4.95pg/ml，子宫内膜癌患者为29.39±6.36pg/ml，子宫内膜增生症为31.51±3.86pg/ml，子宫内膜癌和子宫内膜增生症患者血清25(OH)2VD3水平均显著低于正常对照组，子宫内膜增生症与子宫内膜癌之间无显著性差异(P=0.148)；病理分级结果为：G1级患者血清25(OH)2VD3水平为34.16±6.07pg/ml，G2级的患者为30.65±5.60pg/ml，G3级的患者为25.06±5.71pg/ml。两两比较的结果显示，病理分级G1和G3级(P=0.02)、G2和G3级(P=0.000)的患者血清25(OH)2VD3水平均有统计学意义；G1和G2级患者无显著性差异(P=0.054)；FIGO分期Ⅰ期患者血清25(OH)2VD3水平为33.72±5.26pg/ml，Ⅱ期患者为29.76±6.24pg/ml，Ⅲ期患者为25.79±5.63pg/ml。两两比较的结果显示Ⅰ期和Ⅱ期(P=0.032)，Ⅰ期与Ⅲ期(P=0.003)，Ⅱ期与Ⅲ期(P=0.021)患者血清 25(OH)2VD3水平差别有统计学意义；无淋巴结转移的患者血清25(OH)2VD3水平为30.46±5.97pg/ml，淋巴结转移的患者为24.74±6.06pg/ml，差别有统计学意义(P=0.001)。表明血清25(OH)2VD3水平与子宫内癌恶性程度呈负相关性。

讨论

维生素D的前体7-脱氢胆固醇存在于皮肤中，在阳光的作用下转化为维生素D3，维生素D3随血液循环到肝脏转化为维生素D的另一种形式25位单脱氧胆固醇，这种形式的效用更大。随后25位单脱氧胆固醇进入肾脏被转化为1，25位二羟胆钙化醇，此形式是维生素D活性形式，活性最强。25(OH)D3是维生素D在血液中的主要运输形式，其血清浓度高，半衰期长，是评价体内维生素D营养状况最为可靠的指标。我们测定所指的维生素D也就是25(OH)D3血清水平。

流行病学及实验室研究证明了维生素D及其类似物具有明显可靠的肿瘤防治作用。目前认为，维生素D作为促进钙吸收的活性物质，与钙的协同发挥抗肿瘤作用；维生素D的受体作为核受体，参与靶基因的调控，进而干预肿瘤细胞的增殖与分化，影响瘤细胞的生物学行为。维生素D还可结合到细胞表面膜受体或者其它受体，介导第二受体激活旁路通路，控制许多参与过量表达生物活性的基因表达。另外，维生素D通过调控细胞周期、诱导细胞凋亡、影响生长因子等途径达到预防和治疗癌症的作用。

维生素D在体内外试验中均可抑制子宫内膜癌的生长和转移。Yabushita等[2]发现50nmol的calcitriol可以抑制子宫内膜癌RL95-2细胞株的生长，RL95-2细胞的生长形态也发生改变，由极性腺样结构转变为柱状。维生素D与铂类药物联合使用，可以增强铂类药物抗肿瘤作用。Saunders等[3]研究证实卡铂和calcitriol联合应用可以以浓度依赖方式抑制肿瘤细胞生长。因而可以确定维生素D对子宫内膜癌无论单用，还是与抗肿瘤药物联合应用，均能抑制瘤细胞生长。Lee的研究[4]发现calcitriol与雌激素联合使用促进了子宫内膜癌细胞凋亡和细胞周期阻滞，显现了抗肿瘤作用。

Nada等的研究发现一个并不引起血钙升高的维生素D2衍生物抑制了裸鼠的移植卵巢以及子宫内膜癌的生长。这也是通过体内补充维生素D抑制肿瘤的生长，相对于培养细胞抗肿瘤作用更令人信服维生素D的抗子宫内膜癌的作用。美国乔治敦大学的一项研究也发现,补充维生素D可以降低肥胖实验鼠患子宫内膜癌的风险。研究人员通过对实验鼠进行基因处理, 使实验鼠容易发生子宫内膜癌。在随后的实验中对实验鼠添加维生素D在食物中。研究发现, 经过补充维生素D的肥胖实验鼠患子宫内膜癌明显降低(25%), 而未添加维生素D肥胖实验鼠子宫内膜癌发生率显著增高(67%)。不过,补充维生素D对体重正常的实验鼠却未显现保护作用。

本研究发现与健康妇女相比，子宫内膜癌患者的血清25(OH)D3水平明显降低，且有统计学意义；值得注意的是子宫内膜癌患者的25(OH)D3水平与FIGO分期、病理分级、淋巴结转移相关，提示25(OH)D3水平与与子宫内膜癌的发生发展存在一定的关系。本研究的发现证实维生素D水平降低可能与子宫内膜癌的发生发展有关，维生素D补充可能有益于子宫内膜癌患者。因而，维生素D在治疗子宫内膜癌时有一定的临床指导意义。

参考文献

[1]Peerelli S.Revised FIGO staging for carcinoma of the vulva,cervix ,and endometrium[J].Int J Gynaecol Obstet,2009,105(2):103-104.

[2]Yabushita H, Hirata M, Noguchi M, Nakanishi M. Vitamin D receptor in endometrial carcinoma and the differentiation-inducing effect of 1,25-dihydroxyvitamin D3 on endometrial carcinoma cell lines[J]. J Obstet Gynaecol Res. 1996;22:529-39.

[3]Saunders DE, Christensen C, Wappler NL,etal. Additive inhibition of RL95-2 endometrial carcinoma cell growth by carboplatin and 1,25 dihydroxyvitamin D3[J]. GYNECOL ONCOL. 1993;51:155-9.

[4]Lee LR, Teng PN, Nguyen H,etal. Progesterone enhances calcitriol antitumor activity by upregulating vitamin D receptor expression and promoting apoptosis in endometrial cancer cells[J]. Cancer Prev Res (Phila). 2013;6:731-43.

(收稿：2016-02-02)

【中图分类号】R737.33

【文献标识码】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.011

Biological effects of siRNA interference targeting MeCP2 gene on cervical cancer Hela cells

Department of Obstetrics and Gynecology, The Second Affiliated Hospital

of Xi'an Jiaotong University(Xi'an 710004)Duan ZhaoHan HongfangWang Ying

ABSTRACTObjective To investigate the biological effects of MeCP2 on cervical cancer Hela cells and molecular mechanism. Methods siRNA interference were used to knockdown MeCP2. MTT assay were used to analyze the effects of MeCP2 on proliferation of cervical cancer Hela cells. To analyze the effects of MeCP2 on the cell cycle and apoptosis of cervical cancer Hela cells with flow cytometer. To examine the effects of MeCP2 siRNA on the expression of Cyclin D1, P-ERK1/2 and P-p38 with Western Blot. Results MeCP2 mRNA and protein significantly decreased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01). MeCP2 siRNA inhibits proliferation of cervical cancer Hela cells. The number of S and G2/M phase cells significantly decreased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01), meanwhile the number of G1/G0 phase cells remarkably increased (P<0.01). The number of early apoptotic cells and late apoptotic cells remarkably increased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01). It was found that Cyclin D1 and P-ERK1/2 proteins significantly decreased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01), P-p38 proteins remarkably increased (P<0.01). Conclusion MeCP2 promotes proliferation of cervical cancer Hela cells through regulating P-ERK1/2 and Cyclin D1 expression, and inhibits apoptosis by suppressing P-p38 MAPK signal pathway.

KEY WORDSEndometrial NeoplasmsVitamin D@Antitumor activity

*陕西省自然科学基金资助项目(2013JM4012)