家畜伪狂犬病的诊断和防治

2016-03-09姜晓明辽宁省彰武县动物疫病预防控制中心123200

当代畜禽养殖业 2016年4期

关键词：狂犬病琼脂抗原

迟　曼　姜晓明　辽宁省彰武县动物疫病预防控制中心　123200

家畜伪狂犬病的诊断和防治

迟曼姜晓明辽宁省彰武县动物疫病预防控制中心123200

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的家畜及野生动物的急性传染病，主要表现为发热、奇痒及脑脊髓炎和神经炎综合症。新生仔猪以高热和神经症状为特征，有的有呕吐和腹泻症状。大猪多为隐性感染，多出现发热和呼吸系统症状，怀孕母猪出现流产和死胎。

1　流行病学

自然条件下，猪、牛、羊、犬、鼠、貂等都易感。猪是该病的主要宿主，成年猪感染后多不表现临诊症状，4周龄内仔猪死亡率几乎为100％。患病动物和带毒动物是该病的主要传染源，带毒猪可长期排毒。该病的传播途径为消化道感染，还可经皮肤伤口和交配感染。一年四季都可发病，但冬季和早春发病较多。

2　临诊症状

该病的潜伏期一般不超过10天，多数为3～6天。

猪的临诊表现因年龄不同而有明显差异。新生仔猪及4周龄内的仔猪发病后病情严重，症状也比较典型，在规模化猪场常发生大批死亡。仔猪突然发病，精神萎顿、停食，出现呕吐、腹泻、运动不协调，有的36小时内死亡。如未死亡，常出现神经症状，表现为兴奋不安，满圈乱跳，或两前肢如八字张开，或向后做转圈运动。有的病猪倒地伸舌，最后神经肌肉麻痹，衰竭而死亡。成年猪多为隐性感染，症状也较轻微，但怀孕母猪常见流产、产死胎或木乃伊胎，未死的弱胎也常于2～3天死亡。流行发病率可超过50％。

牛感染该病后通常呈致死性，各种年龄的牛都易感。特征症状是一些部位奇痒，病牛用舌舔或口咬发痒部位，引起皮肤褪毛、充血。部位多在鼻、乳房、后肢和后肢间的皮肤。剧痒可使病牛狂躁不安、嚎叫、啃咬发痒部位。随着病程发展而症状加剧，后期则表现为体弱，呼吸和心跳加快，有明显的痉挛，发生昏迷，一般在2天内死亡。

绵羊和山羊的症状与牛相似，亦表现不安、尖叫、大量出汗，随后痉挛和麻痹。山羊无奇痒症状，病程1～2天，死亡率较高。犬、猫症状与牛相似，也以奇痒为主要特征，啃咬痒部并惨叫。也发生咽部麻痹，大量流涎。其病程较短，一般在36小时内。死亡率常为100％。

3　病理变化

剖检病死猪，可见病变主要有鼻和咽喉黏膜充血、出血，有坏死灶。肺淤血、水肿，实质器官（如肝、脾、肾脏或扁桃体）有少数坏死灶。胃肠黏膜充血、出血，中枢神经系统出现非化脓性脑膜炎。剖检病牛，除痒部皮肤充血、发红和水肿外，其他与猪相似。

4　实验室检验

伪狂犬病的检疫检验方法有琼脂免疫扩散试验、病毒中和试验和荧光抗体检查法等。琼脂扩散试验适用于猪和其他动物的检疫、疫情监测和流行病学调查。本文主要介绍琼脂扩散试验。

（1）材料准备。先配制0.2moL/LTris液（取三羟甲基甲烷24.2g，加蒸馏水100mL）和0.1moL/L盐酸。使用时取 0.2moL/LTris液 25mL，加 0.1moL/L盐酸45mL，再加蒸馏水至100mL。抗原由猪伪狂犬病病毒感染收获的Vero细胞培养物，经超声波裂解后浓缩制成。本抗原-20℃冻结保存，有效期为2年。标准阳性血清能与标准抗原在24小时内产生一条明显而致密的沉淀线。被检血清保存于4℃或-20℃。

（2）试验方法。取琼脂糖0.9g加入0.05moL/L pH7.2Tris-盐酸缓冲液100mL、氯化钠0.292g、叠氮钠0.02g，于水浴中充分煮沸融化。取琼脂液7mL加至直径55mm的平皿里，制成3mm厚琼脂板。凝固后用直径4mm金属打孔器在琼脂板上打孔，作成7孔1组的梅花圆形（中间1孔，外周6孔），孔径4mm，孔间距3mm。用针头挑出孔中的琼脂。中心孔加抗原，外周孔1、4孔加标准阳性血清，2、3、5、6孔加被检血清，每孔以加满不溢出为度。加样后的琼脂平板加盖，放入湿盒置37℃温箱中反应，24小时后初判，48小时终判。

（3）结果判定。标准阳性血清孔与抗原孔之间应在24小时内出现一条清晰的白色沉淀线，本试验成立。若没有沉淀线或沉淀线不明显，试验应重做。

标准阳性血清孔与抗原孔之间形成沉淀线，而且被检血清孔与抗原孔之间也出现沉淀线，并与标准阳性沉淀线末端相融合，呈阳性反应。被检血清孔与抗原孔之间不出现沉淀线，但阳性沉淀线的末端向内弯向被检血清孔，呈弱阳性反应。被检血清孔与抗原孔之间不出现沉淀线，阳性沉淀线末端弯向被检血清孔，判定为阴性反应。若被检血清孔与抗原孔之间虽然有沉淀线，但与标准阳性血清沉淀线末端不相融合，呈交叉或直线，也判为阴性。