猪精液的品质检查和稀释分装储存
2016-03-08吕成继黑龙江省林口县畜牧兽医局动物疫病预防与控制中心157699
吕成继 黑龙江省林口县畜牧兽医局动物疫病预防与控制中心 157699
猪精液的品质检查和稀释分装储存
吕成继黑龙江省林口县畜牧兽医局动物疫病预防与控制中心157699
对种公猪采精后,精液的品质检查和稀释、分装、储存、运输便成为重要环节。
1 精液品质检查
(1)采精量。采集精液后称重,按每克1mL计,避免以量筒等测量精液的体积。
(2)颜色。正常的精液是乳白色或浅灰色,精子密度越高,色泽愈浓,透明度愈低。带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应废弃。
(3)气味。猪精液略带腥味,如有异常气味,应废弃。
(4)pH值(酸碱度)。以pH计或pH试纸测试,正常范围为7.0~7.8。
(5)精子活力检查。精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率。在显微镜下观察,一般按0.1~1.0区间的10级评分法估计,鲜精活力要求不低于0.7。检查活力时要求载玻片和盖玻片都应在37℃下预热。
(6)精子密度。指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要标准。要求用血细胞计数板计数或精液密度仪测定。血细胞计数方法:以微量加样器取具有代表性原精液200uL,用3%NaCl稀释10倍;在血细胞计数板上放一盖玻片,取1滴稀释液后精液置于计数板的槽中,靠虹吸将精液吸入计数室内;在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数,将该数乘以50万,即得到原精液每毫升所含的精子数(即精液密度)。
(7)精子畸形率。畸形率是指异常精子的百分率。一般要求畸形率不超过18%。其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆萨染色,利用相差显微镜可直接观察活精子的畸形率。公猪使用过频或在高温环境下会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多,如巨型精子、短小精子、双头或双尾精子、顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或尾部分离、尾部变曲的精子等。要求对每头公猪每2周检查一次精子畸形率。
2 精液稀释、分装、储存和运输
(1)稀释液。稀释液按稀释液配方配制,配好应及时贴上标签、标明品名、配制日期、时间及经手人等。在冰箱内4℃条件下保存,不超过24小时。
(2)原精液稀释后体积计算。原精液总有效精子数=原精液体积(或重量g)×精子密度(单位:个/mL)×活率。
原精液稀释后的体积(或重量)=原精液稀释后可分装的份数(取整数)×每份精液的体积(或重量)。每份精液中有效精子数推荐值为30亿,每份精液的体积推荐值为80~100mL。
(3)精液稀释。精液采集后应尽快稀释,原精储存不超过30分钟。未经品质检查或检查不合格 (活力0.7以下)的精液不能稀释。稀释液与精液要求等温稀释,两者温差不超过1℃,即稀释液应加热至33~37℃,以精液温度为标准,来调节稀释液的温度,绝不能反过来操作。稀释时,将一个塑料杯(1000~1500mL)放在电子秤上,除皮后,将装精液的采精袋从保温杯中取出,放入这个大塑料杯中,并将袋口翻在杯外。如果集精容器为一次性纸杯,则需将纸杯中的精液倒入装入食品袋的塑料杯中并放在电子秤上。也可在此时称量并记录精液重量。然后向杯中徐徐加入与精液等温的稀释液,直到达到所计算出的最终重量。稀释倍数的确定。要求每个输精剂量含有效精子数30亿以上。稀释后要求静置片刻再作精子活力检查,如果稀释前后活力无太大变化,即可进行分装与保存。如果活力显著下降,则不要使用。
(4)精液分装。一次性输精瓶的分装。是将塑料杯中稀释后的精液分别加入不同的输精瓶中,使精液面达到输精瓶上相应的刻度处(如100mL),然后拧上输精瓶盖。一次性输精袋分装。将输精袋的两个悬挂孔挂在专门用于分装精液的支架上,在输精袋中插上一次性塑料漏斗,放在电子秤上,然后除皮。将塑料杯中稀释后的精液通过漏斗徐徐加入输精袋中,直到达到规定的重量(如100g),取下漏斗和输精袋,挂上一个新的输精袋,再将漏斗插入,分装另一袋精液。分装后的输精袋用塑料热封口机封口。在输精瓶或袋上表明公猪品种、耳号、生产日期、保存有效期、稀释液名称和生产单位等。
(5)精液储存。将分装后的输精容器放入泡沫塑料盒中,在室温下缓慢降温30分钟,再将输精容器放入17℃恒温箱内的搁架上保存。保存过程中不要频繁打开冰箱,并且每隔12小时轻轻翻转一次,防止精子沉淀而引起死亡。短效稀释液可保存3天,中效稀释液可保存4~6天,长效稀释液可保存7~9天,无论何种稀释液保存精液,都应尽快用完。
(6)精液运输。由于热应激或冷应激,以及紫外线的影响,精液品质会发生变化,使精子活力降低。因此,精液运输应置于保温较好的装置内,保持在16~18℃。精液运输过程中应避免强烈震动。