狭叶獐牙菜化学成分研究II

褚　峤，夏从龙

（大理大学药学与化学学院，云南大理　671000）



狭叶獐牙菜化学成分研究II

褚峤，夏从龙*

（大理大学药学与化学学院，云南大理671000）

［摘要］目的：研究龙胆科（Gentianaceae）獐牙菜属狭叶獐牙菜（Swertia angustifolia Buch.）的化学成分。方法：采用硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析分离纯化化合物，依据理化性质和现代波谱技术进行结构鉴定。结果：从乙酸乙酯部分分离鉴定了7个单体化合物，分别为香草酸（vanillic acid，1）、1，3，8-三羟基-5-甲氧基口山酮（1，3，8- trihydroxy-5-methoxy xanthone，2）、5，7，4′-三羟基二氢黄酮（5，7，4′-trihydroxy flavanone，3）、1-羟基-3，5，6-三甲氧基口山酮（1-Hydroxy-3，5，6-trimethoxy xanthone，4）、3，4-二羟基苯甲酸甲酯（methy -3，4-dihydroxy-benzoate，5）、邻苯二甲酸二异丁酯（diisobutyl phthalate，6）、1，8-二羟基-3，5-二甲氧基口山酮（methyl-bellidifolin，7）。结论：化合物1～7均为首次从狭叶獐牙菜中分离得到。

［关键词］狭叶獐牙菜；化学成分；分离研究

［DOI］10. 3969 / j. issn. 2096-2266. 2016. 04. 004

狭叶獐牙菜（Swertia angustifolia Buch.）为龙胆科獐牙菜属植物，分布于云南、广西、贵州等地。狭叶獐牙菜具有清热解毒、健胃、除湿利胆的功效，用于治疗黄疸型肝炎、胆囊炎等疾病〔1〕，常代替青叶胆（药典收载种）用药，资源较为丰富。通过文献查阅，国内主要对其生药学、含量进行研究〔2-3〕；陈丽元等对其氯仿部分进行了成分研究，分离得到4个单体化合物〔4〕。因此我们对其化学成分进行进一步研究，从95%的乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离出7个化合物。分别鉴定为香草酸（vanillic acid，1）、1，3，8-三羟基-5-甲氧基口山酮（1，3，8- trihydroxy-5-methoxy xanthone，2）、5，7，4′-三羟基二氢黄酮（5，7，4′-trihydroxy flavanone，3）、1-羟基-3，5，6-三甲氧基口山酮（1-Hydroxy-3，5，6-trimethoxy xanthone，4）、3，4-二羟基苯甲酸甲酯（methyl -3，4-dihydroxy-benzoate，5）、邻苯二甲酸二异丁酯（diisobutyl -phthalate，6）、1，8-二羟基-3，5-二甲氧基口山酮（methyl-bellidifolin，7）。

1　仪器与材料

1.1实验材料实验材料2008年10月采自云南省大理市凤阳桥后山，由大理大学药学与化学学院夏从龙教授鉴定为龙胆科狭叶獐牙菜（Swertia angustifolia Buch.）的全草。

1.2仪器与试剂瑞士Büchi R-210型旋转蒸发仪；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵；Bruker AM-400型核磁共振波谱仪；柱层析硅胶、薄层层析硅胶G和GF254（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20（Pharmacia公司）；其他化学试剂均为分析纯。CDCl3、DMSO-d6、Acetone-d6（Sigma-Aldrich公司）。显色方法为10%硫酸乙醇溶液处理后烘烤显色或碘蒸汽显色。

2　提取与分离

狭叶獐牙菜干燥全草9.8 kg粉碎，用95%乙醇回流提取，每次3 h，共提取3次，提取液合并浓缩得浸膏1.72 kg。加水分散后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得乙酸乙酯部位（89 g）。将乙酸乙酯部位样品用适量硅胶拌样，200～300目硅胶装柱，氯仿-甲醇系统洗脱得5个部分，经反复硅胶层析（氯仿/丙酮、氯仿/甲醇）洗脱、凝胶柱Sephadex LH-20层析得化合物1（4.6 mg）、化合物2（5.1 mg）、化合物3（5.3mg）、化合物4（5.1mg）、化合物5（4.3mg）、化合物6（6.8 mg）、化合物7（5.6 mg）。

3　实验结果

化合物1：C8H8O4；无色针晶（氯仿-丙酮）；13C NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：120.9（C-1），112.6（C-2），147.2（C-3），151.2（C-4），114.6（C-5），123.9（C-6），166.5（COOH），55.4（3-OCH3）。1H NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：13.31（1H，s，COOH），8.41（1H，s，OH），7.60（1H，dd，J=1.9，8.2 Hz，H-6），7.56（1H，d，J= 1.9 Hz，H-2），6.92（1H，d，J=8.2 Hz，H-5），3.91（3H，s，3-OCH3）。以上波谱数据与文献〔5〕报道对比，鉴定化合物1为香草酸。

化合物2：C14H10O6；黄色粗棒状结晶（氯仿-甲醇）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：181.5（C-9），164.9（C-1），98.7（C-2），166.0（C-3），93.9（C-4），158.3（C-4a），147.8（C-4b），146.2（C-5），124.4（C-6），115.9（C-7），151.1（C-8），114.2（C-8a），103.9（C-8b），62.3（5-OCH3）。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：13.33，9.89，8.36（3×1H，s，1，3，8-OH），4.37（1H，s，3-OH），7.40（1H，d，J=8.9 Hz，H-6），7.20（1H，d，J= 8.9 Hz，H-7），6.34（1H，d，J=2.2 Hz，H-4），6.23（1H，d，J=2.2 Hz，H-2），3.93（3H，s，5-OCH3）。以上波谱数据与文献〔6〕报道对比，鉴定化合物2为1，3，8-三羟基-5-甲氧基口山酮。

化合物3：C15H12O5；淡黄色粉末；13C NMR（100 MHz，Actone-d6）δ：79.1（C-2），42.6（C-3），196.4（C-4），164.4（C-5），95.9（C-6），166.5（C-7），94.9（C-8），163.5（C-8a），102.3（C-4a），128.1（C-1′），129.9（C-2′，6′），115.3（C-3′，5′），157.9（C-4′）。1H NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：12.19（1H，s，5-OH），9.72（1H，s，7-OH），8.61（1H，s，4′-OH），7.41（2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′），6.91（2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′），5.98（2H，brs，H-6，8），5.48（1H，dd，J=3.0，12.9 Hz，H-2），3.23 （1H，dd，J=12.9，17.1 Hz，H-3a），2.77（1H，dd，J= 3.0，17.1 Hz，H-3b）。以上波谱数据与文献〔7-8〕报道对比，鉴定化合物3为5，7，4′-三羟基二氢黄酮。

化合物4：C16H14O6；黄色针晶（氯仿-甲醇）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：162.9（C-1），96.8 （C-2），166.2（C-3），91.9（C-4），156.7（C-4a），149.1 （C-4b），147.6（C-5），149.9（C-6），114.9（C-7），120.9 （C-8），112.8（C-8a），103.2（C-8b），180.5（C-9），61.0 （5-OCH3），56.6（3-OCH3），56.1（6-OCH3）。1H NMR （400 MHz，DMSO- d6）δ：6.33（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.51（1H，d，J=1.8 Hz，H-4），7.34（1H，d，J= 9.2 Hz，H-7），7.62（1H，d，J = 9.2 Hz，H-8），3.36 （3H，s，3-OCH3），3.96（3H，s，5-OCH3），3.93（3H，s，6-OCH3）。以上波谱数据与文献〔9〕报道对比，鉴定化合物4为1-羟基-3，5，6-三甲氧基口山酮。

化合物5：C8H8O4；无色针状结晶（氯仿-丙酮）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：122.8（C-1），115.4（C-2），147.9（C-3），151.9（C-4），113.4（C-5），124.7（C-6），167.5（C-7），56.2（-OCH3）。1H NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：7.60（1H，d，J=1.9 Hz，H-2），6.29（1H，d，J = 8.2 Hz，H-5），7.58（1H，dd，J = 1.9 Hz，J=7.4 Hz，H-6），3.90（3H，s，-OCH3）。以上波谱数据与文献〔10-11〕报道对比，鉴定化合物5为3，4-二羟基苯甲酸甲酯。

化合物6：C16H22O4；无色油状物；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：132.3（C-1，2），130.9（C-3，6），128.8（C-4，5），167.7（C-7，7′），71.8（C-8，8′），27.7（C-9，9′），19.2（C-10，10′，11，11′）。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：7.77（2H，m，H-3，6），7.58（2H，m，H-4，5），4.12（4H，d，J=8 Hz，H-8，8′），2.07（2H，m，H-9，9′），1.02（12H，d，J=8 Hz，H-10，10′，11，11′）。以上波谱数据与文献〔12〕报道对比，鉴定化合物6为邻苯二甲酸二异丁酯。

化合物7：C15H12O6；黄色针状结晶（氯仿-甲醇）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：184.31（C-9），161.9 （C-1），97.3（C-2），167.2（C-3），92.9（C-4），157.7（C-4a），148.8（C-4b），142.6（C-5），121.4（C-6），107.2（C-7），149.1（C- 8），105.7（C- 8a），105.7（C- 8b），56.64（3-OCH3），56.29（5-OCH3）。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：11.93（1H，s，1-OH），11.52（1H，s，8-OH），7.52 （1H，d，J=9.0 Hz，H-6），6.99（1H，d，J=9.0 Hz，H-7），6.62（1H，d，J=2.3 Hz，H-4），6.40（1H，d，J = 2.3 Hz，H-2），3.89（3H，s，3-OCH3），3.84（3H，s，5-OCH3）。以上波谱数据与文献〔13-14〕报道对比，鉴定化合物7为1，8-二羟基-3，5-二甲氧基口山酮。

［参考文献］

〔1〕云南省怒江州卫生局.怒江中草药〔M〕.昆明：云南科技出版社，1991：224.

〔2〕夏从龙，杨月娥，刘光明.狭叶獐牙菜的生药学研究〔J〕.大理学院学报，2006，5（8）：17-19.

〔3〕夏从龙，张浩，刘光明，等.獐牙菜属及近缘植物中4种有效成分的HPLC含量分析〔J〕.药物分析杂志，2007，27（8）：1161-1164.

〔4〕陈丽元，李水仙，夏从龙.狭叶獐牙菜化学成分研究〔J〕.大理学院学报，2015，14（2）：1-3.

〔5〕王晓梅，张倩，热娜，等.锁阳全草化学成分的研究〔J〕.中草药，2011，42（3）：458-460.

〔6〕徐康平，徐平声，刘巍，等.川东獐牙菜的化学成分研究〔J〕.天然产物研究与开发，2002，14（6）：18-19.

〔7〕孙彤，邓安珺，李志宏，等.黄杞叶中黄酮类化学成分的研究〔J〕.中国药学杂志，2012，47（20）：1617-1620.

〔8〕赵雪梅，叶兴乾，席崂芳，等.胡柚皮有效成分的分离鉴定及其药理活性〔J〕.果树学报，2006，23（3）：458-461.

〔9〕GHOSAL S，CHAUDHURI R K，NATH A. Chemical Constituents of Gentianaceae IV：New Xanthones of Canscora decussate〔J〕. Journal of Pharmaceutical Sciences，1973，62（1）：137-139.

〔10〕马临.白花蛇舌草中四种活性成分的分离分析及药动学研究〔D〕.沈阳：沈阳药科大学，2008.

〔11〕罗晓东，吴少华，马云宝，等.大蒜果树的化学成分〔J〕.云南植物研究，2001，23（3）：368-372.

〔12〕耿家玲，耿长安，陈纪军.西南獐牙菜化学成分的研究〔J〕.天然产物研究与开发，2012，24（1）：42-46.

〔13〕字敏，罗钫，辛晓燕，等.獐牙菜属药用植物化学成分研究〔J〕.林产化学与工业，2000，20（3）：85-87.

〔14〕孙洪发，丁经业.川西獐牙菜（Swertia mussotii Franch）中口山酮成分的分离与鉴定〔J〕.植物学报，1981，23 （6）：464-468.?

（责任编辑李杨）

Chemical Constituent of Swertia angustifolia Buch.II

Chu Qiao，Xia Conglong*
（College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China）

〔Abstract〕Objective: To explore the chemical constituents of Swertia angustifolia Buch. Methods: Compounds were separated and purified by silica gel and Sephadex LH- 20 column chromatography and their structures were elucidated on the basis of physicochemical properties and spectral analysis. Results: Seven monomeric compounds were obtained from ethyl acetate extract of S. angustifolia，which were characterized to be vanillic acid（1），1，3，8-trihydroxy-5-methoxy xanthone（2），5，7，4′-trihydroxy flavanone （3），1-Hydroxy-3，5，6-trimethoxy xanthone（4），methyl -3，4-dihydroxy benzoate（5），diisobutyl-phthalate（6），methyl-bellidifolin （7）. Conclusion: All seven compounds were obtained from S. angusifolia for the first time .

〔Key words〕Swertia angustifolia Buch.；chemical constituents；separation study

［中图分类号］R284

［文献标志码］A

［文章编号］2096-2266（2016）04-0014-03

［基金项目］国家自然科学基金资助项目（81260677）；云南省教育厅科研基金资助项目（2012Z118）

［收稿日期］2015-09-21［修回日期］2016-01-05

［作者简介］褚峤，硕士研究生，主要从事天然药物资源与品质评价研究.

*通信作者：夏从龙，教授.