Livin、Survivin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

2016-03-04张春敭刘东雷朱登彦

中国老年学杂志 2016年4期

关键词：非小细胞肺癌

张春敭　杨　洋　刘东雷　朱登彦　赵　佳　吴　恺　吴　彬　张　岩　赵　松

(郑州大学第一附属医院胸外科　河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室　郑州大学肿瘤分子外科研究所郑州市胸部肿瘤重点实验室，河南　郑州　450052)

Livin、Survivin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

张春敭杨洋刘东雷朱登彦赵佳吴恺吴彬张岩赵松

(郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州大学肿瘤分子外科研究所郑州市胸部肿瘤重点实验室，河南郑州450052)

〔摘要〕目的研究Livin、Survivin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测45例NSCLC病人的癌和癌旁组织标本中Livin及Survivin的表达，分析其与临床参数的关系以及二者表达的相关性，并通过随访研究其与NSCLC患者5年生存率的关系。结果Livin和Survivin在NSCLC癌组织中的阳性表达率均显著高于癌旁组织(P<0.05)，在NSCLC癌组织中的表达与患者性别、年龄、是否吸烟、癌组织类型、肿瘤的大小、分化程度和TNM分期均无关(P>0.05)，而与是否有淋巴结转移有关(P<0.05)；Livin和Survivin的表达无相关性；Livin和Survivin表达阳性者5年生存率均明显低于表达阴性者(P<0.05)。结论Livin和Survivin蛋白与NSCLC发生、发展、转移及预后有关，对NSCLC临床诊断和预后判断具有一定的指导意义。

〔关键词〕Livin；Survivin；非小细胞肺癌

第一作者：张春敭(1982-)，男，博士，主要从事胸部肿瘤的基础与临床诊治研究。

肺癌中最常见的为非小细胞肺癌(NSCLC)，占肺癌总数的80%以上〔1〕。Livin和Survivin是凋亡抑制蛋白家族(IAP)的新成员，已有大量研究证实，肿瘤细胞中二者有普遍过表达现象，已成为肿瘤预后和治疗研究的新热点〔2~4〕。本实验旨在研究Livin和Survivin蛋白在NSCLC中的表达及其相关性，并分析其表达与5年生存率的关系。

1材料与方法

1.1一般资料收集郑州大学第一附属医院2013年1~12月行手术切除的NSCLC患者的癌组织标本45例，以及相应的距肿瘤边缘5 cm以上的癌旁组织标本作为研究对象。全部患者术前均无放疗、化疗及其他抗肿瘤治疗史。其中男28例，女17例，年龄36~75岁，平均(58.5±14.3)岁；吸烟者25例，非吸烟者20例；其中腺癌13例，鳞癌32例；高、中、低分化癌分别为14例、20例和11例；肿瘤直径≥3 cm者34例，<3 cm者11例；有淋巴结转移者26例，无淋巴结转移者19例；TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期者28例，Ⅲ~Ⅳ期者17例。

1.2检测方法标本均以10%的甲醛固定，石蜡包埋，切3 μm厚片，免疫组化SP法染色。一抗为兔抗人Livin和Survivin 单克隆抗体，由北京博奥森公司提供；免疫组化试剂盒由上海国源生物技术有限公司提供，SP 通用型试剂盒由美国ZYMED公司提供。阳性对照为在同一条件下染色的Survivin和Livin 阳性切片，阴性对照为磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗，试验操作严格按说明书进行。

1.3结果判定以两人双盲法观察。Survivin蛋白阳性表达为位于细胞质的棕黄色颗粒，Livin蛋白阳性表达为位于细胞质或细胞核中的棕黄色或棕褐色颗粒。每例切片随机选取5个视野(400倍)，每个视野观察并记录100个肿瘤细胞中阳性细胞的染色强度和阳性细胞数。评分方法，(1)染色强度评分：0~3分相应分别为无着色、淡黄色、棕黄色和棕褐色；(2)阳性细胞数评分：阳性细胞比例≤5%为0分，5%～25%为1分，25%～50%为2分，>50%为3分；染色强度得分乘以阳性细胞比得分为综合评分结果，以综合评分≤1分为阴性，综合评分>1分为阳性。

1.4统计学方法采用SPSS13.0软件进行χ2检验。

2结果

2.1Livin和Survivin在癌组织和癌旁组织的表达Livin在NSCLC的癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为68.9%(31例)和8.9%(4例)，差异有统计学意义(P<0.05)；Survivin在NSCLC的癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为73.3%(33例)和6.7%(3例)，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2Livin和Survivin的表达与临床指标的关系在不同性别、年龄、是否吸烟、癌组织类型、肿瘤的大小、分化程度和TNM分期的患者中，Livin和Survivin在NSCLC癌组织中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)；有淋巴结转移者Livin和Survivin的阳性率均明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)，见表1。

2.3Livin与Survivin在NSCLC癌组织中表达的关系在Livin表达阳性的31例NSCLC癌组织中，Survivin阳性表达22例(71.0%)，在Livin表达阴性的14例NSCLC癌组织中，Survivin阳性表达11例(78.6%)，Livin与Survivin表达不具有相关性(χ2=0.29,P>0.05)。

2.4Livin和Survivin的表达与5年生存率的关系5年生存率在Livin和Survivin阳性组分别为25.8%(8/31)和30.3%(10/33)，阴性组分别为64.3%(9/14)和66.7%(8/12)，差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1　Livin与Survivin的阳性表达与NSCLC临床参数的关系〔n(%)〕

3讨论

Livin和Survivin是作用较强的凋亡抑制因子〔5〕，过表达可引起细胞凋亡不足，与肿瘤发生和进展关系密切。覃国亮等〔6〕报道Survivin阳性表达率与NSCLC临床分期和淋巴结转移有关。王栋等〔7〕研究也指出Survivin蛋白表达的阳性率与淋巴结转移和NSCLC肿瘤分期高度相关，而Livin蛋白表达阳性率则均与之无关。但张久荣等〔8〕报道Survivin蛋白表达的阳性率与NSCLC分化程度相关，而与淋巴结转移无关，Livin 蛋白表达的阳性率与淋巴结转移相关，而Survivin和Livin蛋白表达二者之间并无相关性，与韩宝林〔9〕的研究结果类似。

本研究结果提示Livin和Survivin可能在NSCLC的发生、发展中起重要作用，可能成为NSCLC诊断的新指标和潜在的治疗靶点。但二者在NSCLC癌组织中的表达并不具有相关性，且二者可能参与了NSCLC淋巴结转移，对预后判断具有一定的提示作用。另外本研究提示Livin和Survivin 的阳性表达在一定程度上提示NSCLC预后不良。总之，Livin和Survivin蛋白与NSCLC发生、发展、转移及预后有关，对NSCLC临床诊断和预后判断具有一定的指导意义，有望成为NSCLC治疗的潜在靶点，为NSCLC的免疫治疗提供新的思路。

4参考文献

1徐燕，王孟昭.非小细胞肺癌免疫治疗进展〔J〕.中国肺癌杂志，2014；17(1)：34.

2王栋，钱有辉.凋亡抑制蛋白 livin 的研究进展〔J〕.热带医学杂志，2011；11(11)：1335-8.

3孟宪红，庄丽维，付宜利.Livin 和 Survivin 在结肠癌及不同类型结肠腺瘤中的表达〔J〕.哈尔滨医科大学学报，2011；45(1)：51-4.

4伍干元，李建军，李龙平.Survivin 及 Livin 在中耳胆脂瘤组织中的表达及相关性研究〔J〕.中国实用医药，2011；6(1)：3-4.

5赵国徽，王家宏，贾志勇，等.Survivin 与结直肠癌关系的研究进展〔J〕.包头医学院学报，2011；27(6)：132-4.

6覃国亮，马广耀，冼磊，等.非小细胞肺癌中 Survivin 的表达及其临床意义的研究〔J〕.微创医学，2013；8(4)：400-2.

7王栋，钱有辉，王光锁，等.Livin，Survivin 蛋白在非小细胞肺癌胞核中的表达及意义〔J〕.热带医学杂志，2013；11(2)：10.

8张久荣，李田，陈石.Survivin 和 Livin 蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义〔J〕.临床肺科杂志，2012；17(1)：101-3.

9韩宝林.Bax，Livin 和 Survivin 在非小细胞肺癌组织中的表达〔J〕.天津医药，2012；40(5)：513-5.

〔2015-08-10修回〕

(编辑李相军/滕欣航)