慢性牙周炎患者血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关细胞因子浓度水平差异

陈玮粲，解 飞，张辰升，李 晔

（1.河北省保定市第一中心医院，保定 071000；2.隆尧县医院，邢台 055350）

慢性牙周炎患者血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关细胞因子浓度水平差异

陈玮粲1，解 飞2，张辰升2，李 晔1

（1.河北省保定市第一中心医院，保定 071000；2.隆尧县医院，邢台 055350）

目的：探讨慢性牙周炎患者血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关细胞因子浓度水平差异，为慢性牙周炎的临床治疗提供理论基础。方法：选取本院2014年5月～2015年12月收治的慢性牙周炎患者36例进行研究，同时选择同期健康体检者35例进行对照，分别对受试者血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关因子水平（Th-1、Th-2、Th-17和IL-17）的表达差异的浓度进行分析，观察比较各细胞因子其浓度水平的差异，其中牙周炎患者经治疗后，观察其治疗前后的水平，对相关数据进行统计学分析。结果：在慢性牙周炎组血浆中Th1、Th17的浓度显著高于牙周健康的对照组，差异有统计学意义；而慢性牙周炎患者中Th2比例明显下降，与正常牙周相比，差异有统计学意义；在龈沟液中IL-17浓度明显升高，与健康牙周组相比，差异有统计学意义。观察组治疗后Th1、Th17的浓度显著低于治疗前，差异有统计学意义。结论：慢性牙周炎患者血浆中Th1、Th17的浓度较健康者升高，且在龈沟液中IL-17浓度明显升高，这提示IL-17可能是牙周炎发生重要的促炎症细胞因子。

慢性牙周炎；Th亚群细胞；细胞因子；IL-17

牙周炎是目前口腔科较为常见的，具有破坏牙周组织的破常见疾病之一，临床主要表现为牙龈出血和炎症以及牙周袋的形成和牙槽骨的吸收及牙齿松动等。研究发现，其是牙齿周围的软组织的炎性状态及对斑菌的直接免疫反应［1］。该病属难治性疾患，也是导致成人牙齿缺失的主要原因，易发展为慢性，且久治不愈［2］。

近年来研究发现［3］，牙周炎患者牙菌斑中的致病菌可激发宿主发生炎症反应和免疫反应，这不仅是造成和影响牙周破坏的重要原因，而且这些炎症免疫反应所释放的炎症细胞因子进入宿主外周血中，从而对全身系统产生一定的影响，以致全身系统性疾病，如冠心病、糖尿病等的发生。本组研究就慢性牙周炎患者血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关细胞因子的浓度水平进行分析，并与健康受试者进行对比，探讨其发生的促炎症细胞因子，取得了较好的效果，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取本院2014年5月～2015年12月收治的慢性牙周炎患者36例进行研究，其中男21例，女15例，年龄27～56岁，平均年龄为（43.8±6.3）岁，病程0.7～10年不等，平均病程（4.7±1.6）年，所有患者均满足慢性牙周炎的诊断标准，且排除侵袭性牙周炎、有高血压、糖尿病、类风湿关节炎、等全身系统性疾病者、孕妇和哺乳期患者、半年内有牙周治疗史或3个月之内有服用抗生素、激素类药物、吸烟者；同时选择同期健康体检者35例进行对照，其中男20例，女15例，年龄26～55岁，平均年龄为（43.6±6.6）岁；两组患者基本资料相似，P＞0.05，资料具有可比性。

1.2 方法治疗方法：慢性牙周炎患者给予牙周基础治疗（口腔洁治，龈下刮治，口腔卫生指导）后6周复查的数据。

血浆的采集：所有受试者于清晨采集外周静脉血2ml，采用肝素抗凝。且观察组在治疗前后均给予采血。

龈沟液采集［4］：所采取的龈沟液所在的牙龈均满足无龋损及牙髓，无根尖周病变，无咬合创伤，用滤纸条法收集龈沟液。

采用Elisa法对血浆和龈沟液相关细胞因子进行检测。Elisa试剂盒购买于BD公司，操作按照试剂盒的说明进行。

1.3 观察指标观察所有受试者血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关因子（Th-1、Th-2、Th-17和IL-17）水平的表达差异的浓度进行分析，观察组同时进行治疗前后的Th1、Th17的浓度对比，观察比较各细胞因子其浓度水平的差异，并进行统计学分析。

1.4 统计学分析采用SPSS 17.0 统计软件进行数据分析，所有数据均采用（s）表示，组间比较采用 t 检验进行数据分析，以α=0.05 为检验水准，设定P﹤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受试者血浆Th细胞亚群相关细胞因子浓度水平比较在慢性牙周炎组血浆中Th1、Th17的浓度显著高于牙周健康的对照组，差异有统计学意义，P＜0.05；而慢性牙周炎患者中Th2比例明显下降，与正常牙周相比，差异有统计学意义，P＜0.05；见表1。

表1 两组受试者血浆Th细胞亚群相关细胞因子浓度水平（pg/mL）比较

2.2 两组受试者龈沟液中IL-17细胞因子浓度水平比较在龈沟液中IL-17浓度明显升高，与健康牙周组相比，差异有统计学意义，P＜0.05，见表2。

表2 两组受试者龈沟液中IL-17细胞因子浓度水平比较（pg/mL）

2.3 牙周炎患者治疗前后Th1、Th17的浓度的比较观察组治疗后血浆Th1、Th17的浓度显著低于治疗前，两组相比，差异有统计学意义，P＜0.05，见表3。

表3 牙周炎患者治疗前后Th1、Th17的浓度的比较（pg/mL）

3 讨论

牙周炎是常见的口腔疾病之一，其发病率高，是成人病理性缺、失牙的主要原因。且研究发现［5］，慢性牙周炎与急性心肌梗死和慢性冠心病、早产和低出生体重儿、糖尿病等密切相关，严重危害人类健康。牙周炎以牙銀炎症和牙槽骨进行性吸收为主要临床表现，以往认为牙菌斑生物膜是发病的始动因素，随着免疫学的发展，近年大量研究证实［6］牙周炎是由T细胞介导的细胞免疫应答为主的多种致炎因子共同参与的疾病。文献报道，在牙周炎组织中发现由浆细胞产生的免疫球蛋白，这进一步说明获得性免疫在牙周炎发病中的作用。

目前多项研究证实［7］，牙周炎和众多致病菌的感染相关，发生牙周炎的致病菌在人体的聚集导致牙周微生态的失调、人体免疫力低下，从而引起牙周炎的发生。目前已有文献对牙周炎患者的外周血Th细胞群进行分析，结果发现［8］，慢性牙周炎患者外周血中Th1和Th17的含量显著高于健康受试者组，而Th2所占百分含量显著低于健康组，这证实慢性牙周炎是由T细胞介导的细胞免疫应答为主的多种致炎因子共同参与的疾病。

免疫学研究发现［9］，初始的T细胞受到佐剂类型、抗原类型可识别微环境中的细胞因子，而辅助性T细胞在接受内源或外源的抗原刺激后可向Thl和Th2细胞两个方向分化。Thl细胞亚群标志性细胞因子是IL-2、IL-12、IFN-Y、TNF-a促进细胞免疫应答。故本组研究在前期研究基础上进一步对血浆和龈沟液中Th亚群细胞相关细胞因子浓度水平进行分析，并与健康者进行对比，结果发现，在慢性牙周炎组血浆中Th1、Th17的浓度显著高于牙周健康的对照组，差异有统计学意义；而慢性牙周炎患者中Th2比例明显下降，与正常牙周相比，差异有统计学意义；在龈沟液中IL-17浓度明显升高，与健康牙周组相比，差异有统计学意义。这与目前的文献报道结果相似。

IL-17由Th17细胞产生，具有高度的致炎作用，研究发现［9］，其在自身疫应答对抗微生物感染引起的细胞媒介组织破坏的发病机制中起着重要的作用，同时其同时参与和其他细胞亚群的相互作用，调控机体对感染的应答。而在牙周炎中Th细胞存在于牙周病的组织破坏阶段，主要通过诱导细胞释放前炎症因子，及动员中性粒细胞的细胞因子而发挥作用。

已有文献报道［10］，IL-17 作为一种强大的促炎因子参与了牙周组织的炎症反应，并随着炎症程度的加重，IL-17 作用增强，这与细胞因子间相互协调作用从而促进炎症反应有关。此外，牙周炎患者外周血表达和分泌IL-17 水平明显升高，其水平的高低可反映疾病的活动程度，这对临床制定治疗慢性牙周炎的临床方案，以及判断治疗后的疗效有着一定的指导意义。

为观察Th亚群细胞浓度水平与牙周炎的相关性，本组研究对牙周炎组患者治疗后Th1和Th17水平进行分析，结果发现，观察组治疗后血浆Th1、Th17的浓度显著低于治疗前，两组相比，差异有统计学意义。这说明Th亚群细胞浓度水平与牙周炎具有较大的相关性。

综上所述，慢性牙周炎患者血浆中细胞因子IL-17较健康者升高，这提示IL-17可能是牙周炎发生重要的促炎症细胞因子，为临床上的治疗提供理论依据。

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Level of Th subsets in plasma and gingival fluid in patients with chronic periodontitis

Chen Wei-can1, Xie Fei2, Zhang Chen-sheng2, Li Ye1

(1.Baoding First Central Hospital of Hebei Province, Baoding 071000, China; 2.Longyao County Hospital, Xingtai 055350, China)

ObjectiveTo investigate the difference of Th subsets in plasma and gingival sulcus fluid in patients with chronic periodontitis, and to provide theoretical basis for clinical treatment of chronic periodontitis.MethodsSelect the hospital 2014 may 2015 December of chronic periodontitis patients with 36 cases were investigated. Meanwhile, the selection of healthy in the same period were 35 cases were compared to differences in the expression of plasma and gingival crevicular fluid Th cell subsets associated factor (Th-1 and Th-2, Th17 and IL-17) concentrations were analyzed and compared the cytokine concentration differences were observed, which periodontitis patients after treatment observed before and after the treatment, the level and the relevant data were statistically analyzed.ResultsIn the chronic periodontitis group, the plasma concentrations of Th1 and Th17 was significantly higher than that of periodontal healthy control group, the difference is statistically significant, and patients with chronic periodontitis of Th2 cell ratio decreased significantly, compared with the normal periodontal ligament, the difference is statistically significant. The concentration of IL-17 in gingival crevicular fluid was significantly higher, compared with the periodontal health group, the difference is statistically significant . After treatment, the concentration of Th17 and Th1 in the observation group was significantly lower than that before treatment, the difference was statistically significant.ConclusionPlasma levels of Th1 and Th17 in patients with chronic periodontitis were higher than those in healthy subjects, and the concentration of IL-17 was significantly increased in the gingival sulcus fluid, which suggested that IL-17 might be an important pro-inflammatory cytokine in periodontitis.

chronic periodontitis； Th subgroup cell； cytokine； IL-17

R781.4；R541.4

A

1673-016X（2016）06-0134-03

2016-09-12

陈玮粲，E-mail：1834181709@qq.com