多种抗凝剂引起血小板假性减低1例报道



·个案与短篇·

多种抗凝剂引起血小板假性减低1例报道

徐阳1，刘莉君2，张磊1，张彦平1，王金华1

(西安交通大学医学院第二附属医院：1.检验科；2.肿瘤科，陕西西安 710054)

乙二胺四乙酸(EDTA)作为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的抗凝剂，在临床上获得认可，已得到广泛的应用。但临床有报道称EDTA可诱导血小板(PLT)聚集，使PLT的计数假性减低，即临床所诊断的EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)[1]，严重影响PLT计数的准确性。EDTA-PTCP发病率较低，约为0.1%，临床主要表现为重型假性PLT减少症，但患者并无出血现象[2]。在平时工作中，如果检验工作者没有引起足够重视，或是由于经验不足，此种PLT假性减低很容易被认为PLT减少症，造成临床的误诊，给患者诊断带来严重影响。本院检验科近期发现1例在乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作用下，PLT出现聚集的情况，采用枸橼酸钠和肝素重新抽血检测，仍发现有少量聚集，因临床少有报道，现总结如下，以供各临床医生和检验工作者参考。

1资料与方法

1.1一般资料患者女，53岁。近半年因进食量少、头晕、全身乏力、面色苍白来院就诊。查血常规：白细胞(WBC)6.2×109/L，红细胞(RBC) 2.8×1012/L，血红蛋白(Hb) 80 g/L，PLT 26×109/L，门诊拟诊断为缺铁性贫血，入住本院血液科。患者既往无出血史，当地查血常规，取指尖末梢血，均未发现有PLT计数减少。凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)(109 mmol/L枸橼酸钠抗凝)均在正常参考范围内。查体：全身皮肤黏膜无黄染，无皮疹分布、无出血点分布、鼻腔及牙龈无渗血。

1.2检测仪器血常规检测仪器为Sysmex XE-2100五分类血细胞分析仪，试剂为Sysmex原装试剂；推片机Sysmex SP1000i；染液为瑞-姬氏染液，由珠海贝索生物技术有限公司提供；阅片机为Cellavision DM96；采血管使用EDTA-K2血常规管，浏阳市三力医用品有限公司生产。

2结果

在血常规检测中发现在EDTA抗凝状态下有

大量PLT聚集，改用枸橼酸钠及肝素进行重新抽血检测仍发现有PLT聚集现象。

图1　　EDTA抗凝发现有大量PLT聚集

图2　　枸橼酸钠抗凝发现PLT聚集

图3　　肝素抗凝仍发现PLT聚集

血常规检测结果显示RBC、WBC及相关参数基本在正常范围内。PLT计数26×109/L，因平均PLT体积(MPV)、PLT体积分布宽度(PDW)、大PLT(P-LCR)比例、PLT比容未出结果，PLT直方图呈不规则锯齿状。符合本科室复检条件，则使用Sysmex SP1000i进行推片，Cellavision DM96进行阅片，发现有大量PLT聚集。见图1。采用枸橼酸钠及肝素进行重新抽血检测，PLT计数分别为102×109/L、110×109/L，结果虽已在正常参考范围内，PLT直方图仍呈不规则的锯齿状，遂推片、染色、阅片。见图2～3。

3讨论

EDTA因其对外周血WBC、RBC形态影响小，同时可与血液中的凝血因子Ⅳ(钙离子)形成螯合物，阻止血液凝固，ICSH推荐其为血细胞计数首选抗凝剂，已成为临床使用最多的一种抗凝剂。

EDTA可引起EDTA-PTCP,在国内已多有报道，但由于目前全自动血细胞分析仪计数PLT的工作原理多为经典的电阻抗法,即不同大小的血细胞通过阻抗回路会产生不同的电脉冲，仪器根据脉冲多少及脉冲大小来计算血细胞个数及细胞体积大小,致使在EDTA-PTCP状态下，部分聚集的PLT不能通过仪器检测微孔，而通过仪器检测微孔的PLT聚集块易被误认为有核细胞和RBC，导致PLT计数的假性减低及WBC计数的假性升高。

目前,认为EDTA-PTCP产生机制为EDTA作为抗凝剂可诱导PLT膜上糖蛋白的暴露，而暴露的糖蛋白会与嗜异性抗体反应，引起PLT的聚集[3]。随着有些学者对PLT功能的进一步研究,发现在自身免疫性疾病、心血管疾病、感染及妊娠时，EDTA-PTCP的发生率会有所增加[4]，相应科室应给予重视。实际工作中当遇到EDTA-PTCP时，常用的解决方案为：(1)选用其他抗凝剂(枸橼酸钠及肝素)重新进行抽血检测。(2)如果其他抗凝剂仍有聚集现象,应严格按照全国临床检验操作规程，使用1%草酸铵溶液手工法计数PLT或进行末梢血的血常规分析进行验证[5]。但如果重新抽血检测的结果达到正常参考范围，便认为该EDTA-PTCP患者PLT计数准确，不再怀疑枸橼酸钠及肝素抗凝血中仍会出现PLT聚集现象。近期本科室发现1例患者对枸橼酸钠及肝素也发生了聚集反应。本室的解决方法为：(1)如果枸橼酸钠及肝素抗凝血中PLT计数满足患者手术条件，在报告单备注仍有少量PLT聚集,已给医生简单提示。(2)如果临床需要患者的PLT的准确数值，即按照全国临床检验操作规程，使用1%草酸铵溶液手工法计数PLT,或采用末梢血在血细胞分析仪上计数。临床上虽然少有报道，但不容忽视，而其引起PLT聚集的机制尚不清楚，此案例是特殊现象，还是一种普遍存在，而又未被发现的情况有待进一步证实。所以，有必要考虑多种因素的影响，例如抽血是否规范、抗凝管、抗凝剂的抗凝效力(浓度)，以及患者其他的病理或生理因素等。如果有条件，可进一步查看患者临床资料及其他实验室的检测结果，回顾该病例检测前的治疗、诊断等混杂因素以查找原因。笔者在此只是列举此现象产生的可能原因，而其真正产生机制还有待各检验工作者的进一步探讨。

综上所述，临床中PLT计数存在很多的影响因素，因此在全自动血细胞分析仪出现“PLT Clumps？”报警或是PLT直方图呈不规则的锯齿状时应按照《国际血液学41条复检规则》[6]进行推片，瑞氏染色以排除PLT聚集引起的PIL假性减低，尽可能提供更加准确的PLT计数，避免引起临床的误诊、误治。

参考文献

[1]宓庆梅.EDTA依赖性假性血小板减少症一例[J]．中华检验医学杂志，2004，27(10):719.

[2]齐云晓.EDTA依赖性假性血小板减少症2例[J]．检验医学与临床，2015，12(5):719-720.

[3]郑军.EDTA依赖性假性血小板减少症血小板表面糖蛋白活化的研究[J]．中国血液流变学杂志，2007,17(3)：481-482.

[4]Isik A,Balcik OS,Akdeniz D,et al.Relationship between some clinical situtions,autoantibodies,and pseudothrombocytopenia[J].Clin Appl Thromb Hemost,2012,18(6):645-649.

[5]王威.多种抗凝条件下血小板假性减少1例报道[J]．国际检验医学杂志，2014，35(21):3006-3007.

[6]XE-2100血细胞分析复检标准制定协作组.Sysmex XE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨[J]．中华检验医学杂志，2008，31(2):752-757.

(收稿日期：2015-11-08)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.072

文献标识码：C

文章编号：1673-4130(2016)03-0432-02