尿肠型脂肪酸结合蛋白与粪钙卫蛋白在诊断早产儿喂养不耐受及坏死性小肠结肠炎中的价值

姜 燕 李和勤 白亚飞 曹 博

(陕西省宝鸡市妇幼保健院儿童医院新生儿科，宝鸡市 721000，E-mail：jiangyan9006@sina.com)

论著·临床研究

尿肠型脂肪酸结合蛋白与粪钙卫蛋白在诊断早产儿喂养不耐受及坏死性小肠结肠炎中的价值

姜 燕 李和勤 白亚飞 曹 博

(陕西省宝鸡市妇幼保健院儿童医院新生儿科，宝鸡市 721000，E-mail：jiangyan9006@sina.com)

目的 探讨尿肠型脂肪酸结合蛋白(UIFABP)与粪钙卫蛋白(FC)在诊断早产儿喂养不耐受(FI)及其并发坏死性小肠结肠炎(NEC)的临床价值。方法 240例早产儿，其中120例发生FI(A组)，120例未发生FI(B组)。分别于开始喂养前(S1期)、发生FI当天(S2期)和第5天(S3期)、发生NEC当天(S4期)收取两组尿液、粪便，采用酶联免疫法检测UIFABP和FC浓度。结果 A组与B组UIFABP浓度、FC浓度比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，A组的UIFABP及FC浓度均随观察时间延长而升高(P<0.05)。各个时间点NEC组的UIFABP浓度高于无NEC组，S2至S4期NEC组的FC浓度均高于无NEC组；NEC组的UIFABP和FC浓度随观察时间延长而升高(P<0.05)。S3期UIFABP诊断早产儿发生NEC的界限值为1.892 mg/ml，敏感度为93.0%、特异性为56.8%；S4期UIFABP浓度诊断早产儿发生NEC的界限值为2.563 mg/ml，灵敏度为76.7%，特异度为97.3%。S3期FC浓度对早产儿发生NEC的诊断界限值为198.9 μg/g，灵敏度为96.5%，特异度为79.6%。S4期FC浓度对早产儿发生NEC的诊断界限值为254.4 μg/g，灵敏度为94.7%，特异度为61.2%。结论 FI早产儿的UIFABP与FC浓度持续升高。FI早产儿出现NEC可能性较大。早产儿发生FI第5天FC浓度、UIFABP异常升高，提示有发生NEC可能，对诊断NEC具有积极作用。

喂养不耐受；尿肠型脂肪酸结合蛋白；粪钙卫蛋白；坏死性小肠结肠炎

喂养不耐受(feeding intolerance，FI)是早产儿中常见的一类疾病，常表现为喂养物残留、腹部胀满、呕吐甚至发生呕血[1-3]。该病可对早产儿的发育造成诸多不良影响，如FI后期常常可发生坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis，NEC)等[4]。目前多数学者多关注于尿肠型脂肪酸结合蛋白(urine intestinal fatty acid binding protein，UIFABP)和粪钙卫蛋白(fecal calprotectin，FC)水平对已发生NEC患儿的影响[5-7]。而关于两者在发生NEC前的FI患儿的研究报告较少。因此，本文通过对比喂养耐受早产儿与FI早产儿在不同时间点的UIFABP与FC水平，探讨UIFABP与FC水平的变化及其对FI早产儿发生NEC的临床意义，旨在为早产儿NEC的临床诊断和预防提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2010年3月至2015年3月我院新生儿科收治的500例早产儿作为研究对象，将500例早产儿随机配对，共计250对。纳入标准 (1)患儿出生胎龄<34周；(2)出生体重<2.5 kg；(3)本研究进行期间所有患儿均为在院治疗；(4)所有观察对象监护人知情同意并自愿参加。排除标准 (1)伴有严重呼吸系统疾病者；(2)伴有严重心血管疾病者；(3)伴有肝炎、黄疸等疾患者；(4)伴有先天性胃肠疾患者；(5)伴有代谢障碍性疾病者；(6)具有心脏病、代谢病等家族遗传病者。根据早产儿住院期间是否发生FI对研究对象进行二次剔除，符合以下4点中任意一点则需剔除：(1)住院期间配对的两个早产儿均未发生FI；(2)住院期间两组早产儿均发生FI；(3)观察期间，配对的两个早产儿未能全部完成相关检查者；(4)两组均发生NEC者；(5)不符合纳入标准者。二次剔除后，最终纳入240例早产儿。将120例住院期间发生FI的早产儿设为A组，120例未发生FI的早产儿为B组。其中，A组男58例、女62例，胎龄(31.2±1.7)周，出生体重(1.38±0.46)kg。B组中男68例、女52例，胎龄(31.4±1.6)周，出生体重(1.52±0.39)kg。两组的性别、胎龄及出生体重比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有早产儿纳入观察对象前均经监护人知情同意，并自愿参加。

1.2 相关诊断标准 FI诊断标准：(1)胃内残余量增加,符合以下任意一点即可：① 胃内残余量>50%前次喂养量；② 胃内残余量>30%前次喂养量，多次发生。③ 胃内残余量>10%日喂养总量。(2)排除败血症和NEC导致的血便。新生儿NEC诊断标准：(1)体温波动较大、呼吸微弱或骤停；(2)呼吸性酸中毒；(3)腹胀、大便隐血、肠壁积气、腹部按压时患儿哭闹剧烈；(5)腹部X线提示肠梗阻。

1.3 研究方法 分别于开始喂养前(S1期)、A组患儿发生FI当天(S2期)和第5天(S3期)收取两组早产儿尿液、粪便。于患儿确诊为NEC当天(S4期)收取早产儿的尿液、粪便，同时收取与其配对的早产儿的尿液、粪便。尿液标本不少于8 ml，粪便标本不少于4 g，所有标本分别收集于无菌塑料瓶内，并对塑料瓶进行组别、日期标记。于标本收集后12 h内置于-80℃冰箱内冷存。采用酶联免疫法检测，分别采用UIFABP试剂盒(美国Abcom公司)、FC试剂盒(德国AG公司)检测UIFABP和FC浓度。

1.4 统计学分析 采用19.0软件进行统计学分析，计量资料以(x±s)表示，组间比较采用t检验，重复测量资料采用重复测量方差分析。计数资料比较采用χ2检验。UIFABP和FC水平对诊断NEC的意义采用受试者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲线进行分析。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组UIFABP和FC浓度比较 两组的UIFABP浓度比较，差异无统计学意义(F分组=0.837，P分组=0.257)；两组的UIFABP浓度均随时间变化而上升趋势(F时间=81.718，P时间<0.001)，其中A组的UIFABP浓度随观察时间延长而升高；时间与分组之间存在交互作用(F交互=6.471，P交互=0.031)。见表1。两组FC浓度比较，差异无统计学意义(F分组=0.711，P分组=0.327)；两组的FC浓度均有随时间变化的趋势(F时间=143.187，P时间<0.001)，其中A组的FC浓度随观察时间延长而升高；时间与分组之间存在交互作用(F交互=8.319，P交互=0.021)。见表2。

表1 两组UIFABP浓度的比较(x±s，mg/ml)

表2 两组FC浓度的比较(x±s，μg/g)

2.2 NEC者及无NEC者UIFABP和FC浓度比较 240例观察对象中发生NEC患者57例，其中A组36例(30.0%)，B组21例(17.5%)。A组NEC发生率高于B组(χ2=5.177，P=0.023)。

NEC组与无NEC组的UIFABP浓度比较，差异有统计学意义(F分组=7.159，P分组=0.027)，在各个时间点前者均高于后者；两组的UIFABP浓度有随时间变化的趋势(F时间=172.098，P时间<0.001)，其中NEC组的UIFABP浓度随观察时间延长而升高；时间与分组之间存在交互作用(F交互=14.258，P交互=0.007)。见表3。 两组间的FC浓度比较，差异有统计学意义(F分组=6.027，P分组=0.037)，S2至S4期，NEC组的FC浓度均高于无NEC组；两组的FC浓度有随时间变化的趋势(F时间=180.289，P时间<0.001)，其中NEC组的FC浓度随观察时间延长而升高；时间与分组之间存在交互作用(F交互=11.038，P交互=0.014)。见表4。

表3 NEC者及无NEC者UIFABP浓度的比较(x±s，mg/ml)

表4 NEC者及无NEC者FC浓度(x±s，μg/g)

2.3 UIFABP和FC浓度诊断早产儿发生NEC的ROC曲线分析 S3期UIFABP浓度为1.892 mg/ml时，诊断早产儿发生NEC的敏感度为93.0%、特异性为56.8%，曲线下面积为0.740；S4期UIFABP浓度为2.563 mg/ml时，诊断早产儿发生NEC的灵敏度为76.7%、特异度为97.3%，曲线下面积为0.842。S3期FC浓度为198.9 μg/g时，诊断早产儿发生NEC的灵敏度为96.5%、特异度为79.6%；S4期时FC浓度为254.4 μg/g时，诊断早产儿发生NEC的灵敏度为94.7%、特异度为61.2%，曲线下面积为0.799。

3 结 论

随着医疗技术的不断提高，我国早产儿的出生比例逐年增长[8]。早产儿由于组织功能、肌肉、骨骼的发育尚不完全，因此较易引起FI现象的发生[9-11]。FI是早产儿中常见的疾病，其不仅影响新生儿的生长发育，而且不能保证新生儿内环境的稳定[12]。有研究表明，FI的早产儿往往可出现细菌感染，继而导致NEC的发生[13]。而自1964年美国学者提出NEC以来，关于其形成的病因病机尚存在争议。目前多数学者认为，NEC的发生多是由于食物积存、肠道蠕动无力、细菌滋生导致[14-16]。此外，目前关于NEC发病前的研究较为少见。

本研究结果显示，两组患者的UIFABP浓度、FC浓度无差异(P>0.05)，但两组患者的UIFABP浓度、FC浓度变化趋势不同，A组患者的UIFABP浓度均随观察时间延长而升高，而B组患者在S3期时即开始下降；A组患者的FC浓度均随观察时间延长而升高，而B组患者呈现先升高后降低的变化趋势。该结果表明FI患儿在发生FI时，UIFABP和FC浓度升高，而发生NEC时，FI患儿UIFABP、FC浓度仍持续升高，但未发生FI的早产儿则出现下降趋势。引起该现象的原因可能是由于FI早产儿肠道内食物残渣长期积存，促进细菌繁殖，以导致UIFABP和FC分别在尿液及粪便中的浓度大幅度升高；同时，UIFABP和FC浓度升高可能对发生NEC具有一定的影响作用，因此两指标在NEC发生时及发病前具有不同的表现特征[17-18]。

由于新生儿生理特点的限制，新生儿疾病进展较快，而早产儿在发生NEC时往往在数小时内可演变为肠坏死等危重疾病，严重者甚至危及患儿生命。目前对NEC的诊断主要是血常规、粪便隐血试验以及C-反应蛋白等实验室指标，虽然以上指标是目前诊断该病的主要指标，但血常规、粪便隐血试验以及C-反应蛋白等的异常，往往是在病情发展的后期出现，因此，寻找NEC早期的敏感指标，能够帮助该病的预防与治疗。本研究结果发现，A组NEC发生率高于B组(P<0.05)，提示FI早产儿较喂养耐受早产儿更易发生NEC。此外，在各个时间点NEC组的UIFABP浓度高于无NEC组，S2至S4期NEC组的FC浓度均高于无NEC组(P<0.05)；NEC组的UIFABP和FC浓度均随观察时间延长而升高(P<0.05)，而无NEC组的UIFABP和FC在S3或S4期时开始下降。UIFABP是一种常见的脂肪酸结合蛋白，该蛋白常存在于消化道的黏膜层[19]。当消化道受损时，尤其是小肠发生缺血坏死时，可通过血循环直接由尿液排出，因此在发生NEC时，UIFABP浓度升高。FC为感染发生时的保护蛋白，有研究指出，FC在粪便中的浓度最高，比血液中浓度约高5倍[20]，因而在炎症发生过程中或症状出现前，FC浓度即开始异常升高。

本研究进一步分析了UIFABP和FC浓度在诊断NEC中的价值，结果显示，当S3期(FI第5天)时，UIFABP对诊断NEC的敏感性较高；当S3期(FI第5天)时，FC浓度的升高对诊断NEC的敏感性与特异性较高。因此，笔者认为，由于UIFABP和FC浓度在早产儿发生NEC的早期便可出现异常升高，通过对UIFABP和FC浓度的检测，有可能成为日后研究新生儿发生NEC早期诊断的新突破。

综上所述，FI早产儿的UIFABP、FC浓度持续升高。FI早产儿出现NEC可能性较大。同时，早产儿发生FI第5天FC浓度、UIFABP异常升高，提示有发生NEC可能，需提前预防，指标的异常变化对诊断NEC具有积极作用。

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Clinical value of urine intestinal fatty acid binding protein and fecal calprotectin for diagnosis of feeding intolerance and necrotizing enterocolitis in preterm neonates

JIANGYan,LIHe-qin,BAIYa-fei,CAOBo

(DepartmentofNeonatology,theChidren′sHospital,theMaternalandchildHealthCareofBaojiCity,ShannxiProvince,Baoji721000,China)

Objective To explore the clinical value of urine intestinal fatty acid binding protein(UIFABP) and fecal calprotectin(FC) for the diagnosis of feeding intolerance(FI) and necrotizing enterocolitis(NEC) in preterm neonates.Methods Two hundred and forty preterm neonates included 120 preterm neonates with FI in Group A and 120 preterm neonates without FI in Group B.The urine and stool were collected before starting feeding(S1),when FI occurred(S2) and on the 5th day of FI(S3) in Group A,and when diagnosed as NEC(S4).Then the concentrations of intestinal fatty acid binding protein and FC were detected using enzyme-linked immunosorbent assay.Results There was no significant difference in the concentration of UIFABP or FC between Group A and Group B(P>0.05).The concentrations of UIFABP and FC of Group A increased with the increase of observation time(P<0.05).The concentration of UIFABP in the group with NEC was higher than that in the group without NEC at each time point,and the concentration of FC in the group with NEC was higher than that in the group without NEC from S2 to S4.The concentrations of UIFABP and FC of the group with NEC increased with the increase of observation time(P<0.05).The diagnostic boundary value of UIFABP for NEC was 1.892 mg/ml at S3,the sensitivity and specificity were 93.0% and 56.8% respectively.The diagnostic boundary value of UIFABP for NEC was 2.563 mg/ml at S4,the sensitivity and specificity were 76.7% and 97.3% respectively.The diagnostic boundary value of FC for NEC was 198.9 μg/g at S3,the sensitivity and specificity were 96.5% and 79.6 % respectively.The diagnostic boundary value of FC for NEC was 254.4 μg/g at S4,the sensitivity and specificity were 94.7% and 61.2% respectively.Conclusion The concentration of UIFABP or FC constantly rises in the preterm neonates with FI.And the preterm neonates with FI are prone to develop NEC.For the preterm neonates,the abnormal increase of UIFABP and FC on the 5th day of FI probably suggests the NEC,which is valuable for the diagnosis of NEC.

Feeding intolerance,Urine intestinal fatty acid binding protein,Fecal calprotectin,Necrotizing enterocolitis

姜燕(1979～)，女，本科，主治医师，研究方向：新生儿呼吸窘迫。

R 174.4

A

0253-4304(2016)05-0660-05

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.05.17

2015-11-27 2016-02-22)