肉鸽大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

文│李贺侠（安徽省和县畜牧兽医局）

肉鸽大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

文│李贺侠（安徽省和县畜牧兽医局）

当前，在肉鸽养殖场中，大肠杆菌病已经逐渐成为重要的常见细菌性传染病之一。不同年龄段的肉鸽都可能感染大肠杆菌病，该病对幼龄鸽的危害比较严重，死亡率高。随着肉鸽规模化、集约化养殖的持续发展，饲养管理不善、卫生状况不良、气候突变、营养失衡以及其他应激因素均可诱发该病。肉鸽大肠杆菌病是由不同血清型的大肠杆菌引起的以腹泻为主要症状的一类疾病，临床表现为呼吸困难，精神萎靡，呆立闭眼，羽毛杂乱，腿爪干燥，排黄白色稀粪等，发病后死亡率较高。由于大肠杆菌的血清型较多，对药物的敏感程度也不一样，且易产生耐药性，在治疗时存在一定的盲目性，治疗后又易复发，容易对养殖业造成较大损失。

笔者结合工作实际，通过对某肉鸽养殖户送检的以腹泻为特征且病理解剖发现肝脏表面有针尖大小灰白色坏死灶的病死肉鸽进行病原的分离鉴定，选用药敏试验中筛选出的敏感药物进行治疗，取得较好效果，为该病的诊断、治疗提供参考依据。

一、材料和方法

1.材料。

（1）病料。某肉鸽养殖户送检的以腹泻为特征的病死肉鸽10只。

（2）培养基。麦康凯琼脂培养基，营养琼脂培养基以及各类糖发酵管等。

（3）药品与试剂。革兰氏碘液、95%乙醇溶液、沙黄溶液、糖发酵试管、甲基红试剂等；药敏纸片（头孢曲松、头孢他啶、头孢唑啉、头孢西丁、奥复星、头孢哌酮、先锋霉素、庆大霉素、头孢拉定、头孢呋辛、克林霉素、链霉素、阿米卡星、先锋霉素V、氨苄西林、环丙沙星、卡那霉素等17种抗菌药物纸片）购自杭州天和微生物试剂有限公司。

2.方法。

（1）细菌分离培养。无菌取病死肉鸽的心血、肝脏组织分别划线接种于麦康凯琼脂平板，37℃培养24～48小时，取若干个菌落涂片，革兰氏染色镜检，在油镜下观察细菌的形态及染色特性。挑取疑为大肠杆菌的菌落再划线接种于麦康凯琼脂平板，直至纯化为止，并对纯化后的细菌冷冻保存，备用。

（2）细菌生化试验。取纯培养物分别接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖等自制的糖发酵管中，37℃培养24～48小时，观察发酵管的反应情况。取纯培养物分别做糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、尿素酶利用实验。

（3）细菌的药物敏感试验。参考相关文献，将分离的菌株进行药敏试验，观察抑菌环情况。共检测17种药物：头孢曲松、头孢他啶、头孢唑啉、头孢西丁、奥复星、头孢哌酮、先锋霉素、庆大霉素、头孢拉定、头孢呋辛、克林霉素、链霉素、阿米卡星、先锋霉素V、氨苄西林、环丙沙星、卡那霉素。以抑菌圈直径大小作为药物敏感性高低的判定标准，具体情况为：抑菌圈直径大于15毫米者为高敏药物；直径为10～15毫米者为中敏；药物直径为10毫米以下者为耐药。

二、结果与分析

1.细菌分离培养。分离菌菌落在麦康凯琼脂培养基上呈红色圆形、边缘整齐、表面光滑、湿润、隆起。革兰氏染色镜检，分离菌为革兰氏阴性中等大小的杆菌，菌体两端钝圆，单个存在。

2.生化试验。分离菌能利用葡萄糖、麦芽糖、乳糖，产酸产气；吲哚试验为阳性；MR试验为阳性，VP试验为阴性。结果表明，该分离菌株为大肠杆菌。

3.药敏试验结果。药敏试验结果显示，该分离菌株只对头孢曲松、头孢西丁、头孢哌酮、先锋霉素V、环丙沙星5种药物高度敏感，对头孢他啶、奥复星、先锋霉素、氨苄西林、阿米卡星5种药物中度敏感，而对头孢唑啉、庆大霉素、头孢拉定、头孢呋辛、卡那霉素、克林霉素、链霉素7种药物有耐药性（见表1）。

表1 药敏试验结果

三、讨论

细菌的分离培养和生化试验结果表明，该群鸽所患疾病为大肠杆菌病。针对该场发病情况，建议采取对发病鸽舍、用具、环境进行彻底消毒，病死雏鸽进行无害化处理，加强饲养管理，降低饲养密度等措施，并根据药敏试验结果选用头孢曲松进行治疗，用药4天后电话回访养殖户，已无鸽只死亡，病情也得到有效控制。

大肠杆菌在环境中广泛存在，继发感染以及环境不良等均可诱发该病。该病主要侵害幼龄鸽群，且发病后很难继续存活，病死鸽又造成该病的继续传播，所以对养鸽业造成极大的威胁，成为养鸽业中日益突出的问题。加强饲养管理，保持鸽舍卫生清洁，做好消毒工作，合理通风，安排合理的饲养密度，及时更换巢窝，供应优质饲料和合格的饮用水，采取措施减少与降低浮尘，可有效预防大肠杆菌病。由于鸽大肠杆菌耐药性的广泛存在，因此在鸽大肠杆菌病的临床治疗中，通过药敏试验筛选出高敏药物对发病鸽进行治疗，避免耐药性的产生具有较大的意义。