超微粉碎技术对肉苁蓉有效成分含量的影响

卢爱莲陈清赔

超微粉碎技术对肉苁蓉有效成分含量的影响

卢爱莲1陈清赔2

目的探讨超微粉碎技术在肉苁蓉粉碎中的应用效果。方法对照组应用普通粉碎机粉碎肉苁蓉，实验组使用超微粉碎机粉碎，用HPLC法测定两组有效成分含量。结果实验组毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论与普通粉碎机相比，应用超微粉碎机粉碎肉苁蓉的效果更佳，能够有效提高松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量。

肉苁蓉；超微粉碎；含量

管花肉苁蓉为列当科植物，具有补肾壮阳、润肠通便的功效，是目前市场上产量最大，使用量最多的肉苁蓉［1］。粉碎是中药制剂制备的基本步骤，可促进药物的溶解与吸收，便于调剂和服用［2］。本研究主要对比分析普通粉碎和超微粉碎对肉苁蓉粉碎效果的影响，为进一步提高肉苁蓉的开发利用提供参考依据。

1 材料

选用超微粉碎机（江阴普友粉体设备有限公司），安捷伦1260型高效液相色谱仪（美国），普通粉碎机（山东临清宏源制药设备有限公司）。管花肉苁蓉采自新疆喀什地区的人工植场，经干燥后剪碎备用；松果菊苷、毛蕊花糖苷标准品由中国药品生物制品检定所提供；甲醇、乙腈均为色谱纯；醋酸为分析纯。

2 方法

2.1 粉末制备

两组称取等量的肉苁蓉，对照组在普通粉碎机粉碎过100目筛；实验组在超微粉碎机过400目筛，取出备检。

2.2 肉苁蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量测定

主要参照《中国药典》（2010版）［3］，应用高效液相色谱法（HPLC）测定毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量，具体操作如下。

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil-C18（4.6 mm×200 mm，5μm）；流动相：1%醋酸-乙腈-甲醇溶液（75：10：15）；柱温：30℃；流速：0.65 ml/min；波长：334 mm。

2.2.2 标准品溶液制定 分别称取2.0 mg毛蕊花糖苷标准品、松果菊苷标准品于10 ml的容量瓶中，加入50%甲醇溶液混合定容，用0.22μm微孔滤膜过滤，制成标准品溶液，存放于-4℃环境中，待用。

2.2.3 供试品溶液制定 称取实验组粉末1.0 g于100 ml容量瓶中，加入50 ml 50%甲醇封口，摇匀后称重，浸润30 min，超声波处理40 min，冷却后称重。计算超声处理前后的重量差，加入50%甲醇补给，摇匀静置取上清液过滤制成供试品溶液。

2.2.4 方法学考察 （1）线性关系考察。吸取毛蕊花糖苷、松果菊苷标准品溶液2.0 µl、4.0 µl、6.0 µl、8.0 µl、10.0 µl，采用微孔滤膜过滤后，在“2.2.1”色谱条件下测定样品色谱峰面积，以峰面积和浓度为坐标，建立标准曲线并进行回归分析。结果显示毛蕊花糖苷、松果菊苷的线性回归方程分别为y=1 549.2x+34.16（r=0.999 8）、y=1 310.4x+25.18（r=0.999 5），提示毛蕊花糖苷、松果菊苷在0.39～4.11 µg、0.42～4.04 µg范围内呈良好的线性关系。

（2）精密度试验。精密吸取毛蕊花糖苷、松果菊苷标准品溶液10.0 µl，在相同色谱条件下重复进样6次，测定峰面积并计算毛蕊花糖苷、松果菊苷的RSD，结果分别为0.30%、0.50%，均小于＜2.0%，符合药典规定，提示仪器精密度良好。

（3）稳定性试验。于2 h、4 h、8 h、12 h、24 h吸取供试品溶液，采用相同色谱条件，进样10 µl，测定峰面积并计算毛蕊花糖苷、松果菊苷的RSD，分别为1.78%、1.85%，提示供试品溶液在24 h内较为稳定。

（4）重复性试验。称取适量样品，按照“2.2.3”方法制备6份供试品溶液，采用“2.2.1”色谱条件，进样10 µl，以峰面积计算毛蕊花糖苷、松果菊苷的RSD，分别为0.84%、0.55%，提示本方法具有较好的重复性。

（5）回收率试验。称取0.5 g已知含量的样品，依次加入一定量的毛蕊花糖苷、松果菊苷标准品溶液，按“2.2.3”方法制备溶液，在同样色谱条件下进样10 µl，对峰面积进行测定并计算回收率，结果由表1可知，该方法测得的毛蕊花糖苷、松果菊苷平均回收率分别为98.6%、100.5%，RSD值均小于2%，提示该法较为准确，可应用于毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量测定。

表1 肉苁蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷回收率

（6）测定样品含量。分别称取两组粉末各1.0 g，按“2.2.3”方法制备4份供试品溶液，在“2.2.1”色谱条件下进样分析，对峰面积进行测定并分别计算毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量。

2.3 统计学方法

3 结果

经上述实验测定，实验组毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量比较 （）

表2 两组毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量比较 （）

注：a与对照组比较，P＜0.05

4 讨论

管花肉苁蓉具有补肾阳、益精血、润肠的功效，药用价值较高，有“沙漠人参”的美称，备受人们所青睐。相关研究报道［4］，肉苁蓉中的主要成分苯乙醇总苷具有抗氧化、提高免疫力、治疗不孕、加强记忆力等药理作用。因此，有效地提取肉苁蓉的有效成分制成多种剂型，有助于提高药物的功效。

以往一般应用浸渍法、煎煮法、索氏提取法等提取肉苁蓉有效成分，这些方法提取时间长，溶液需求量大，提取效率较低［5］。近年随着制药技术的发展，出现了微波提取法、超微粉碎法等，大大提高了肉苁蓉有效成分的提取率［6］。现为进一步探讨普通粉碎与超微粉碎的差异，本研究取等量的肉苁蓉分别进行研究，结果显示，实验组毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量高于对照组（P＜0.05），提示与普通粉碎相比，超微粉碎的粉碎效果更佳。在实际制药过程中可发现，普通粉碎所需提取时间更长或溶剂剂量更多，大大浪费了制药资源［7］；而超微粉碎后的粉末属于微粉的范畴（微米级范围），增加了肉苁蓉粉末的表面积和孔隙率，更有利于松果菊苷、毛蕊花糖苷的溶出，进而提高了肉苁蓉的生物利用度和治疗效果［8］。

综上，与普通粉碎机相比，应用超微粉碎机粉碎肉苁蓉的效果更佳，提高松果菊苷、毛蕊花糖苷的溶出度。

［1］王运涛，王兴军. 山东省东营柽柳接种管花肉苁蓉获得成功［J］.山东农业科学，2015，47（8）：157.

［2］张霞. 浅谈中药炮制与临床效应［J］. 中国中医药现代远程教育，2012，10（4）：69-70.

［3］国家药典委员会. 中华人民共和国药典［S］. 一部. 北京：化学工业出版社，2010. 附录 XIX 194.

［4］赵微，潘英妮. 肉苁蓉苯乙醇苷类成分药理作用研究进展［J］.亚太传统医药，2013，9（5）：77-79.

［5］沈文娟，岳亮，何英翠，等. 天然药物常用提取技术与方法研究概况［J］.中南药学，2011，9（2）：127-130.

［6］周春源，旺建伟. 中药提取分离技术的研究进展［J］. 黑龙江中医药，2016，45（2）：68-69.

［7］李德成，刘庆燕，韩传伟. 中药超微粉碎技术在中药制剂中广泛应用的优越性［J］. 世界中医药，2010，5（6）：430-431，439.

［8］张红刚，汪妮，李顺祥，等. 超微粉碎技术对中药有效成分提取效果影响研究［J］. 广州化工，2013，41（16）：63-65.

Effect of Superfine Pulverizing on the Contents of Effective Constituents of Cistanche Deserticola Ma

LU Ailian1CHEN Qingpei21 Pharmacy Department，Ningkang Hospital，Nanping Fujian 353000，China，2 Xiamen Medicine Research Institute，Xiamen Fujian 361000，China

ObjectiveTo explore the effect of superfine pulverizing on the contents of effective constituents of Cistanche Deserticola Ma.MethodsThe contents of the active ingredient was compared between ordinary and superfine pulverization.ResultsActeoside，echinacoside contents in the experimental group were higher than control group（P＜0.05）.ConclusionCompared with ordinary grinder，superfine crusher can effectively improve echinacoside acteoside contents.

Cistanche deserticola ma，Superfine pulverizing，Contents

R284

A

1674-9316（2016）24-0127-03

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.24.074

1 福建省南平市宁康医院药剂科，福建 南平 353000；2 福建省厦门市医药研究所，福建 厦门 361000