中药清温消热饮的抗炎镇痛活性研究

赵婵娟

(重庆三峡职业学院动物科技系，重庆 404155)

中药清温消热饮的抗炎镇痛活性研究

赵婵娟

(重庆三峡职业学院动物科技系，重庆 404155)

为了研究清温消热饮的抗炎、镇痛作用，选择清洁级昆明系小鼠144只作为试验对象，采用小鼠炎性肿胀、疼痛反应模型对其进行药效学综合分析，结果显示，清温消热饮对小鼠的耳廓肿胀和足趾肿胀的4 h抑制率分别为23%和59.34%，与西药对照组地塞米松治疗效果无差异性(P>0.05)，与空白对照组比较差异极显著(P<0.01)。同时，清温消热饮组能延长小鼠疼痛反应时间和有效减少小鼠扭体反应次数，表现出与空白对照组显著差异(P<0.01)。结果表明清温消热饮抗炎效果显著，并具有良好的镇痛作用，试验为该中药方剂的进一步研发提供了支持。

中药；清温消热饮；抗炎；镇痛

清温消热饮由石膏、知母、金银花等中药组成。方中主药石膏透热除烦，生津止渴，配以苦寒质润之知母，清热解毒之金银花等辅药，具有养阴生津、泻火解毒等功效。目前，兽医临床上的一些多发病、常见病，如奶牛乳房炎、仔猪肠炎、传染性胸膜肺炎等炎性疾病，临床治疗过程中多采用甾体类和非甾体类药物进行控制，但这两类药物存在明显的副作用如肝肾毒性、消化道损害、免疫抑制等，局限了其使用范围。这就需要除甾体类和非甾体类以外的抗炎药物。因此，寻求其它新的抗炎药物对丰富临床治疗炎症性疾病具有重要意义。

现代中药药理研究发现，中药的活性成分如“苷类”“生物碱类”“黄酮类”“萜类”等都具有良好的抗炎作用[1]。因此，我们根据中医“热”证(炎症)的病因病机，治则为“泻火解毒、养阴生津”[2]，选取石膏、知母等中药组成命名为清温消热饮，拟通过对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致小鼠足趾肿胀以及醋酸致小鼠扭体次数影响的试验，研究清温消热饮的抗炎及镇痛活性效果及机制，以期为进一步应用于临床奠定基础。

1 材料

1.1 实验动物 SPF级健康昆明系小鼠(许可证号：SCXK[渝]2012-0006)，18～22 g，雌雄各半，购自重庆市中药研究院试验动物研究所。小鼠的饲养温度环境18 ℃～25 ℃，相对湿度50 %～60 %，自由饮水采食，适应实验环境2～3 d，开始试验前禁食不禁水12 h。

1.2 中药及制剂 清温消热饮方中石膏、知母、金银花等中药材购于重庆市万州区全宏药店，并经重庆三峡职业学院动物科技系中兽医药教研室老师鉴定。制剂制备：取石膏先行煎煮30 min，然后将知母、金银花、甘草等药混合，煎煮3次合并煎液，浓缩至500 mL。加4 %明胶搅拌至无沉淀，4 ℃静置24 h，过滤，取滤液。加无水乙醇使含醇量分别达65 %，4 ℃静置24 h，离心过滤，取滤液于旋转蒸发仪中，挥发乙醇至无醇味。加无水乙醇使含醇量分别达75 %、85 %后，重复上述步骤。滤液加活性炭1.5 g，45 ℃，静置30 min，过滤，调节pH值至7.0，定容至含生药1 g/mL，高压灭菌，4 ℃保存备用[3]。

1.3 试剂及主要仪器 地塞米松磷酸注射液，湖北天药药业，批号：51409222、二甲苯，成都市科龙化工试剂厂，批号：20120204、角叉菜胶，南京奥多福尼生物科技有限公司，批号：20150724、DKQ打孔器，江苏好奇教学仪器有限公司、游标卡尺，上海精工、电子天平，上海精科天美教学仪器有限公司，精度为0.0001 g。

2 方法

2.1 小鼠耳廓肿胀试验 参照肖蓉等的方法[4-5]，选取健康小鼠30只，随机分为3组，即清温消热饮组(100 mg/kg体重)、地塞米松组(50 mg/kg体重)、空白对照组(生理盐水、等容积)，各给药组按照0.1 mL/10 g采用灌胃给药，1次/d，连续灌胃5 d。最后一次给药后2 h，在实验小鼠右耳两面均匀涂抹二甲苯30 μL致炎，左耳不做任何处理作为空白对照。致炎30 min后，脱颈处死小鼠，沿耳廓线剪下两耳，采用直径8 mm打孔器分别在两耳相同位置取下耳片，于电子分析天平上称重。按以下公式计算耳廓肿胀率及耳廓肿胀抑制率：

2.2 小鼠足趾肿胀试验

选择健康小鼠84只，每组28只，分组及给药方案与试验方法2.1耳廓肿胀试验相同。进行试验前测量右后足趾中央厚度，给药2 h后，用50 μL微量注射器注射0.1 %角叉菜胶溶液在小鼠右后足趾中部皮下，然后掉转向下注完，每只注射30 μL。并于注射完毕后0.5、1、2、3、4 h分别测定各鼠右后足趾厚度(用游标卡尺测量小鼠足趾中央厚度)。按以下公式计算小鼠足趾肿胀度、足趾肿胀率和足趾肿胀抑制率：

2.3 小鼠醋酸扭体反应试验 选择健康小鼠30只，分组及给药方案与试验方法2.1耳廓肿胀试验相同。末次给药后1 h，各鼠腹腔注射0.6 %醋酸溶液0.2 mL/只，观察并记录注射醋酸溶液后15 min内各小鼠扭体次数，以扭体反应次数为指标，对各组进行差异显著性分析。2.4 数据分析 应用SPSS19.0统计软件进行数据处理，计量资料以X±S表示，组间比较采用t检验，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

3 结果与分析

3.1 清温消热饮对小鼠耳廓肿胀的影响 二甲苯致小鼠耳廓肿胀30 min后，清温消热饮组炎症反应出现时间明显长于对照组和地塞米松组。致炎1 h后，清温消热饮组小鼠耳廓肿胀度明显降低，与空白对照组比较差异极显著(P<0.01)，肿胀率差异显著(P<0.05)；地塞米松组的小鼠耳廓肿胀度和耳廓肿胀率，与空白对照组比较差异显著。经统计得出耳廓肿胀抑制率，清温消热饮组为23.03 %，地塞米松组为27.01 %。而清温消热饮组与地塞米松组比较，耳廓肿胀度和肿胀率差异不显著，结果见表1。

表1 清温消热饮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

与对照组比较AP<0.01aP<0.05

3.2 清温消热饮对小鼠足趾肿胀的影响 0.1 %角叉菜胶注射小鼠足趾后，各组足趾厚度变化趋势均为1、2 h时间点足趾厚度逐渐增加，3、4 h时间点足趾厚度呈降低趋势。清温消热饮组在给药后1 h后能有效降低小鼠足趾肿胀，表现出与对照组极显著差异(P<0.01)，地塞米松组在给药后0.5、1、2、3、4 h时间段，足趾肿胀程度均下降，与对照组差异极显著(P<0.01)。根据清温消热饮组和地塞米松组给药后0.5、1、2、3、4 h的足趾肿胀抑制率结果显示，各用药试验组表现出明显的肿胀抑制效果，在4 h时肿胀抑制率最高，分别为59.34 %和56.31 %，表明各给药组均能有效抑制因为外源性物质所引起的炎性肿胀，调节炎症反应，结果见表2。

表2 清温消热饮对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响

与对照组比较AP<0.01aP<0.05

3.3 清温消热饮对醋酸致小鼠扭体次数及疼痛反应出现时间的影响 清温消热饮和地塞米松组扭体次数均低于空白对照组。在第一次扭体出现时间上，清温消热饮组明显比地塞米松组表现滞后，疼痛时间出现较晚。地塞米松组在有效减少由醋酸引起的小鼠扭体次数和延缓疼痛反应时间上，与对照组差异显著(P<0.05)，清温消热饮能显著降低小鼠扭体次数和延长疼痛反应出现时间，与空白对照组差异显著(P<0.01)，表明清温消热饮对化学刺激引起的疼痛有着明显的抑制作用，结果见表3。

表3 清温消热饮对醋酸致小鼠扭体次数的影响

注:与空白组比较AP<0.01aP<0.05

4 讨论与小结

炎症反应以红、肿、热、痛、机能障碍为其临床特征，局部血管反应为其损伤过程中的的重要环节。中医理论认为，炎症的临床症状大多以热毒炽盛、瘀血阻滞等实热为主，中医临床治疗以清热解毒、泻火滋阴、利湿及活血化瘀[2]。本试验抗炎中药方剂清温消热饮以养阴生津、泻火解毒等法进行组方，方中主用石膏长于透热除烦而生津止渴；知母苦寒质润，苦寒泻火，润以滋燥；辛甘、苦寒搭配，相须为用，除热而不伤正，清热不留邪；金银花清热解毒、轻扬宣泄、引营分之邪气外达气分而解；配伍凉血滋阴药，既甘寒养阴保津，又可助君药清营凉血解毒，祛邪扶正兼顾；甘草调和。“药有个性之特长，方有合群之妙用”，方中诸药调和，体现“透热转气”四字，清热同时不忘养阴，兼顾护阴之功。

现代药理研究发现，生石膏主要成分为含水硫酸盐，周永学[6]等试验证明石膏具有抗炎、解热的作用。知母为百合科植物，其化学成分主要有皂苷类、黄酮类、双苯吡酮类等多种成分，一些试验研究证明知母具有抗炎活性及抑制炎症因子的生成等作用[7-9]。金银花主要成分为绿原酸、异绿原酸、黄酮类化合物等，具有较强的抗病毒、抗炎抗菌活性和解热作用。Tac等[10]采用小鼠足趾肿胀模型对金银花水提物进行研究，结果发现金银花水提物能明显改善小鼠足趾肿胀程度和血管通透性。雷玲、宋建华、谢新华等[11-13]则通过试验发现，金银花不同浓度剂量组均有不同程度的解热、抗炎作用,有防止体温升高和消除炎症的作用,其中尤以高剂量组最为明显。现代药理研究证明方中所用石膏、知母、金银花等药从单方来说皆具有良好的抗炎、镇痛效果。清温消热饮方遵循中医方剂的“君臣佐使”的配伍原则以及整体观念、辨证论治的理论基础[14]，有效融合各药特长，综合表现抗炎、镇痛、活血祛瘀作用。

本试验通过耳廓肿胀和足趾肿胀两种抗炎试验模型和醋酸致小鼠扭体的镇痛试验来研究清温消热饮的抗炎、镇痛效果。结果显示，清温消热饮有效抑制耳廓和足趾肿胀、延缓足趾肿胀出现时间。在整体效果评价中，清温消热饮与地塞米松组的抗炎效果无显著差异。同时，试验中药复方制剂在对炎性肿胀和扭体疼痛反应出现时间上表现出明显的延迟性，进一步说明了对炎性渗出的抑制效果。因此，在中医理论指导下，探寻安全、有效、毒副作用小、适用范围广的抗炎解热方剂，对临床治疗炎症性疾病具有重要意义。

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(编辑：陈希)

Study on Anti-Inflammatory and Analgesic Activities of Qingwen Xiaore Yin in Mice

ZHAO Chan-juan

(Departmentofanimalscienceandtechnology，Chongqingthreegorgespolytechniccollege，Chongqing404155,China)

Experimental researchs were aimed at studying the the anti-inflammatory and analgesic activities of the traditional Chinese drug prescription Qingwen Xiaore Yin. 144 clean mice of Kunming were used experimental subject for inflammation models.Auricle swelling induced by dimethylbenzene and toes swelling caused by carrageenan were used to investigate the anti-inflammatory effect and acetic acid writhing test was made to observe its analgestic effect.The results showed that compared with blank control group ,traditional Chinese drug prescription Qingwen Xiaore Yin can significantly reduce the degree of ear and toe swelling (P<0.01)and the inhibit ratio respectively were 23% and 59.34% at 4 h,which compared with Western Medicine group hexadecadrol treatment, effect was no difference (P> 0.05).Meanwhile,compared with the control group , Qingwen Xiaore Yin could significantly prolong pain reaction time and reduce pain writhing reaction times(P<0.01).Conclusions can be drawn that traditional Chinese drug prescription Qingwen Xiaore Yin has obvious an anti-inflammatory and analgesic activities.

traditional Chinese medicin; Qingwen Xiaore Yin; anti-inflammation ; analgesia

重庆市市教委科技项目(KJ1503408)，万州区区科委科技项目(201501023)

赵婵娟，硕士，讲师，执业兽医师，从事中兽医学及动物药学临床研究。E-mail：zhaochanjuan@qq.com

2016-01-10

A

1002-1280 (2016) 04-0041-04

S853.7