濮阳市高危型人乳头瘤病毒感染状况及分布特征

刘大宁

濮阳市高危型人乳头瘤病毒感染状况及分布特征

刘大宁

目的 了解河南省濮阳地区女性高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染状况及分布情况，为防治HPV感染和宫颈癌提供科学依据。方法采用荧光定量PCR方法，对我院初次进行13种高危型HPV检查的2 170名妇女检查结果进行分析。结果 2 170例标本中高危型HPV阳性为219例，总感染率为10.09%；多重感染12例，占总感染标本5.48%。其中16、58、52及68型感染最多。且31～40岁组分布高危型HPV感染率较高，为10.99%。结论 河南濮阳地区HPV流行整体符合亚洲人群分布规律，感染年龄高峰在31～40岁，主要为单基因型感染。

人乳头瘤病毒；荧光定量PCR；亚型分布

宫颈癌（SCC）是一种常见肿瘤，在所有危害女性健康的恶性肿瘤内位居第二。临床研究发现：持续的高危型HPV感染是引发SCC与癌前病的主要危险因素［1］。而HPV感染存在地域性差异，且差异很强；感染人群因种族、国家与地区不同，HPV感染率、型别分布具有差异［2］。本研究了解本地区高危型HPV感染状况及型别分布特点，对防治HPV感染及宫颈癌早期预防有重要作用。

1 资料与方法

1.1 资料选取

2015年1～9月濮阳市人民医院妇科门诊及住院的2 170名妇女进行HPV筛查，年龄21～70岁，所有患者研究前均未接受过HPV筛查，筛查前6个月未行宫颈与阴道手术，检查前3 d未行性生活与阴道用药。用宫颈取样器刷取宫颈脱落细胞，置于无菌玻璃管中，密闭送检。4℃保存，3 d内检测。

1.2 仪器与试剂

采用ABI7300荧光定量PCR仪，对16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59及68型HPV的特异性DNA核酸片段进行检测。

1.3 方法

将无菌生理盐水1 ml放入标本试管内，震荡并摇匀，吸取液体移到1.5 ml离心管内，行5 min 13 000 rpm离心。沉淀加无菌生理盐水1 ml混匀，13 000 rpm离心5 min，再洗涤1次。沉淀加入100 μl核酸提取液混匀，沸水浴10 min，13 000 rpm离心5 min，取上清4 μl作为PCR反应模板。取36 μl HPV检测混合液与0.4 μl Taq酶，振荡混匀，3 000 rpm离心数秒。将配制好的混合液分别置于PCR反应管中，将标本、阳性对照品、H2O（阴性对照）的处理上清液4 μl分别加入PCR反应管，行PCR扩增反应。PCR扩增循环参数：94℃×2 min；93℃×10 sec，62℃×31 sec，循环40次；单点荧光检测在62℃。扩增曲线呈典型S型，为阳性。

1.4 统计学方法

SPSS 19.0统计软件进行分析。采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 高危型HPV总感染

2170例标本中阳性标本219例，2 170例标本中高危型HPV阳性为219例，总感染率为10.09%，多重感染为12例，占总感染标本的5.48%。

2.2 高危型HPV各亚型分布

13种高危型HPV均被检出，阳性检出标本：16型86例，56型15例，18型5例，45型9例，35型6例，59型12例，39型12例，51型10例，58型23例，52型21例，31型6例，33型8例，68型20例；其中16、58、52及68型感染最多，总检出率分别为3.96%、1.06%、0.97%、0.92%，在高危型HPV阳性标本中所占比率为39.27%，10.50%，9.59%，9.13%。

2.3 高危型HPV感染的年龄分布

阳性检出例数：21～30岁39例，31～40岁71例，41～50岁80例，51～60岁21例，61～70岁8例，高危型HPV感染率分别为10.03%（39/389）、10.99%（71/646）、9.51%（80/841）、9.68%（21/217）、10.38%（8/77）。31～40岁组高危型HPV感染率较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

目前，临床已鉴定出100多种亚型HPV，其中约40多种HPV和生殖道感染有关［3］。临床依据HPV病毒致病力分为高危型、低危型，高危型HPV种类多，易引发宫颈癌、喉癌、肉瘤及膀胱癌等多种恶性肿瘤［4］，危害患者健康及生命安全。

临床研究表明［5］，HPV16是全世界HPV感染类型中最为常见的一种；而HPV33、HPV56多见于亚洲地区，HPV58多发于南美洲，HPV31是欧洲常见类型。有研究显示［6］，河南地区HPV感染率较高的是HPV16、58、52与33型，HPV18型感染率较低。本研究显示，濮阳地区HPV16、58、52及68型感染最多，前3种与中国最常见HPV感染一致。

部分研究显示［7］，经济落后地区、发展中国家的HPV感染年龄呈U型分布曲线。而李晨等研究表明：随着人们年龄的增长，总HPV感染率与高危亚型感染率不断增多，尤其是HPV16［8］。本研究显示，31～40岁年龄组感染高危型HPV高于其他年龄组，可能与当代社会性生活过早及多性伴侣现象的出现有关。

HPV在普遍存在于人群内，多数为一过性的HPV，35岁以后持续的高危型HPV感染是造成宫颈癌的直接因素，特别表现为基因亚型同一的持续感染，发生宫颈癌风险大。通过对本地区高危HPV分型的检测和分析，可为HPV感染的预防诊断和宫颈癌的防治提供参考。在后期研究中，需对标本量进行进一步扩大，为流行病学研究HPV疫苗提供科学依据。

［1］ 刘彬，吴泽妮，刘潇阳，等. 人乳头瘤病毒与子宫颈腺癌病因关系研究［J］. 中华肿瘤杂志，2016，38（4）：277-282.

［2］ 张志明，姜小建. 妇女感染人乳头瘤病毒状况及其亚型分布特征研究［J］. 黑龙江医学，2016，40（3）：240-241.

［3］ 张靖，高波，康赟，等. 中国女性宫颈人乳头瘤病毒感染型别分布区域性特征的Meta分析［J］. 中华微生物学和免疫学杂志，2014，34（12）：913-920.

［4］ 李世君，王芳. 1803例女性人乳头瘤病毒基因分型检测及感染情况分析［J］. 内蒙古医学杂志，2016，48（1）：46-48.

［5］ 李晨，程玉峰，李爱禄. 妇科门诊女性人乳头瘤病毒感染型别分布特征及临床分析［J］. 山东大学学报（医学版），2015，53（11）：73-76.

［6］ 智艳芳，徐雪峰，李肖甫，等. 河南地区宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者HPV感染型别分析［J］. 哈尔滨医科大学学报，2014，48（2）：142-146.

［7］ 何彩华，曾祥兴. 人乳头瘤病毒基因型检测及其人群分布特征［J］. 国际免疫学杂志，2014，37（6）：549-553.

［8］ 李晨，程玉峰，李爱禄. 妇科门诊女性人乳头瘤病毒感染型别分布特征及临床分析［J］. 山东大学学报（医学版），2015，53（11）：73-76.

The Infection Status and Distribution Characteristics of High-risk Human Papillomavirus in the Puyang City

LIU Da'ning Clinical Laboratory，The People's Hospital of Puyang City，Puyang He'nan 457000，China

【Abstract】

Objective To understand the infection status and distribution characteristics of female high-risk human papillomavirus in the puyang city of he’nan province，to provide the scientific basis for prevention and cure of HPV infection and cervical cancer. Methods We used the fluorescence quantitative PCR for analysis of the inspection result of 2 170 women inspected by HPV inspection of 13 high risk HPV examination of the first time at our hospital. Results The positive of high-risk hpv was 219 cases of the 2 170 cases of specimens，the total infection rate was 10.09%. The multiple infections was 12 cases，which was accounted for 5.48% of the total infection specimens，the maximum was 16，58，52 and 68-type among them. And the distribution of group of 31～ 40 years old was higher of high-risk hpv，that was 10.99%. Conclusion The entirety of hpv popular of the puyang in he’nan that was meeting the distribution regularity of asian people，the peak of infection age was 31～40 years old，and the mainly was single genotype infection.

Human papilloma virus，Fluorescent quatititive PCR，Subtype distribution

R373

A

1674-9316（2016）15-0016-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.15.009

濮阳市人民医院检验科，河南 濮阳 457000