一种为害温郁金的新病害温郁金枯萎病

2016-02-01王连平王汉荣浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021

浙江农业科学 2016年7期

关键词：小种郁金黄化

方　丽，王连平，王汉荣（浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江杭州 310021）

一种为害温郁金的新病害温郁金枯萎病

方丽，王连平，王汉荣*
（浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江杭州 310021）

近年来，在温州瑞安的温郁金基地中发生了一种严重的枯萎病害——温郁金枯萎病。该病害引起温郁金叶片枯黄，植株大量枯死，块茎腐烂，造成约20%～50%的产量损失，严重的致使温郁金整株死亡。经研究发现，该病害是由茄科劳尔氏菌侵染引起的。

温郁金；新病害；温郁金枯萎病；劳尔氏菌

文献著录格式：方丽，王连平，王汉荣.一种为害温郁金的新病害温郁金枯萎病［J］.浙江农业科学，2016，57（7）：985-986.

温郁金为姜科植物，是一种经济价值较高的中药材，主产区在温州瑞安一带。《中国药典》记载，温郁金性寒，味苦，辛，归肝、胆、心经。具有活血止痛，行气化瘀，清心解郁，利胆退黄等功效，为著名的中药“浙八味之一”，在中医临床治疗中有较广泛的应用。现代临床研究发现，温郁金块茎富含倍半萜烯醇类、生物碱和姜黄素类物质，对多种肿瘤细胞具有抑制及促进凋亡的作用［1-3］。2013年7月，在温州瑞安的温郁金产地出现了一种枯萎病。该病最初引起植株叶片失水状萎蔫，叶脉黄化，最后整个植株黄化枯萎，地下块茎腐烂。该病不仅严重挫伤农户发展温郁金的积极性，阻碍浙江温郁金产业的持续快速发展，而且也严重影响农民增收和农业增效。因此，必须尽快探寻温郁金枯萎病的防治药剂及其综合治理技术，遏制温郁金枯萎病的扩展蔓延，保障温郁金产业的持续稳定发展。

1　材料与方法

1.1病害标样采集

温郁金枯萎病病样采集于温州瑞安的温郁金基地；采样后将标样置于保鲜袋带回实验室分离，待用。

1.2病害症状观察

在田间系统地对自然病株和人工接种病株的症状进行观察记录。

1.3病原菌的分离和培养

分别对十几个温郁金的叶片、茎部和块茎病样用PSA、Richard、Czapek、NA等培养基进行常规组织分离和划线分离、纯化。获得分离自温郁金的茎部单胞菌株，编号为W-J-025，在TZC上28℃培养2 d，记录菌落形态、颜色。

1.4病原菌的生理小种鉴定

盆栽的茄子、番茄、烟草、温郁金和马铃薯等小苗，于温室内（20～28℃）种植2周后，用温郁金枯萎病病原分离物对小苗进行伤口接种，在XT5401-CD275TJH智能生物人工气候箱内，温度25℃、相对湿度98%以上、光照12 h黑暗12 h情况下，保湿培养，以健康的植株为对照，重复3次，每天定时观察记录发病情况，分析分离物的生理小种类型。

2　结果与分析

2.1田间症状

4月中下旬温郁金出土后就逐渐开始出现病症，初发病植株叶片呈轻微缺水状萎蔫，失去光泽，叶尖、叶缘或叶脉间微微发黄；随着叶片的不断抽生，发病叶片不断增多，症状也不断加重，上部叶片缺水状萎蔫明显，下部叶片的着生角度变大，叶片向叶背反卷，中脉渐渐黄化，叶缘、叶尖，或叶面随机出现不规则黄斑；随着病情加重，叶片黄化加重加深，叶面、叶缘，或叶尖出现枯死斑，有时病斑枯死前呈水渍状，直至整叶枯黄，整个植株叶片自下而上地枯黄，最后整株黄化枯死；死后茎基部、块茎常常腐烂。有时发病叶片呈现水浸状、青褐色的急性枯死。

2.2病原菌的分离及培养性状

对十几个温郁金的叶片、茎部和块茎病样进行画线分离和组织分离，叶片病样上获得3个真菌分离物和8个细菌分离物，茎部获得1个真菌分离物和4个细菌分离物，块茎病样上获得12个细菌分离物。经柯赫法则证明真菌为非致病菌；在获得的24个细菌分离物中，茎部和块茎部分分离获得的8个菌株为致病菌。选择编号为W-J-025的病原菌作为典型菌株，置于25℃NA培养基上培养，保存备用。该菌株的革兰氏染色反应阴性，菌体杆状，具1～3根极鞭毛，能游动，好气性，不产生芽孢。在NA培养基上于28℃生长3 d，菌落灰白至暗褐色，平滑有光泽，湿润而呈黏液状，直径2～3 mm。在KMB培养基上不产生荧光色素。在TZC培养基上菌落初为白色，以后中央出现红色小点，菌落红色小点外的白边大小因菌株不同而不同。

2.3病原菌的生理小种

将分离自温郁金的3个代表菌株W-J-004、WJ-025、W-K-006和对照菌株S-1接种于茄子、番茄、烟草、温郁金、马铃薯等幼苗，15 d后调查发现：分离自温郁金的3个代表菌株均可侵染温郁金；W-J-025、W-K-006对茄子的致病力较强，对马铃薯有微弱的致病力；W-J-004能够侵染番茄，而对茄子的致病力弱；3个菌株均不能侵染烟草。对照菌株S-1能侵染除温郁金以外的其他4种植物，其中，对茄科植物茄子、番茄、烟草具有较强的致病力，对马铃薯的致病力较弱。根据邹阳等［4］的青枯劳尔氏菌生理小种划分标准，3个代表菌株W-J-004、W-J-025、W-K-006应属于茄科劳尔氏菌（Ralstonia solanacearum）4号生理小种。