EB病毒感染对系统性红斑狼疮发病的影响与检验学研究

陈 亮刘晓华王 倩（ 辽宁省辽阳市第二人民医院检验科，辽宁 辽阳 000； 辽宁省辽阳市中心医院检验科，辽宁 辽阳 000； 中铁十九局集团中心医院检验科，辽宁 辽阳 000）



EB病毒感染对系统性红斑狼疮发病的影响与检验学研究

陈 亮1刘晓华2王 倩3
（1 辽宁省辽阳市第二人民医院检验科，辽宁 辽阳 111000；2 辽宁省辽阳市中心医院检验科，辽宁 辽阳 111000；3 中铁十九局集团中心医院检验科，辽宁 辽阳 111000）

【摘要】目的 探讨EB病毒与系统性红斑狼疮（SLE）的关系与临床意义。方法 对100例SLE和80例正常对照组应用PCR检测了外周血单个核细胞中EB病毒DNA；用ELISA检测了血清EB病毒壳抗原的IgG（VCA-IgG）抗体。结果 SLE组外周血DNA检出率（34%）明显高于正常对照组（10%），差异有非常显著意义（P＜0.01）；SLE组和正常对照组血清中EB病毒VCA-IgG检出率分别为50%和15%，差异有非常显著意义（P＜0.01）。结论 SLE与EB病毒感染具有统计学相关性。

【关键词】系统性红斑狼疮；Epstein-Barr病毒

系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫病，病因至今未明。目前较为一致的观点是在遗传因素的基础上，由于某些外界因素（如病毒感染）的作用使组织结构发生变化，免疫功能失调而致病［1-2］。有学者发现，在SLE患者外周血循环中可检测到Epstein-Barr（EB）病毒的几种抗原系统，并推测EB病毒在本病的发病过程中可能发挥某种作用［3-4］。为进一步探讨SLE与EB病毒感染的关系我们对100例SLE患者和80例正常对照组采用聚合酶链反应（PCR）技术检测了外周血单个核细胞中

EB病毒DNA；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了血清中EB病毒壳抗原的IgG抗体（VCA-IgG）。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：100例SLE均系辽宁省辽阳市第二人民医院住院患者，其中男12例，女88例；年龄16～54岁，平均33岁，诊断符合1998年美国风湿病学会诊断SLE标准，其中活动期58例，非活动期42例。病情活动度判断标准按urowitz等1990年提出的“狼疮活动计算标准”，积分≥2分为病情活动，＜2分为病情非活动性。正常对照80例，来自健康献血员，对照组年龄、性别构成比与SLE组无显著差异（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 EB病毒DNA测定：取SLE患者及正常人新鲜抗凝血3 mL，用淋巴细胞分离液（密度1.077 g/mL，上海试剂二厂）分离单个核细胞，生理盐水洗细胞一次，将细胞悬浮于（TES）中，加10%（SDS）至终浓度为0.5%，加蛋白酶E（5 mg/mL）20 µL，55 ℃水浴30 min，然后用等体积酚和氯仿异戊醇各抽提2次，去蛋白；加2.5倍体积无水乙醇沉淀DNA用75%乙醇洗涤1次，加50～100 µL TE液溶解DNA，测260 nm吸光度A值，定量DNA。EB病毒PCR诊断试剂盒来自美国Cetus公司，含TaqNDA聚合酶，EB病毒引物，4种脱氧核苷三磷酸及标准PCR缓冲液。两条引物为（1）GTCATCATCCGGGTCTC；（2）TTCGGGTTGGAACCTCCTTG，扩增产物为269 bp。PCR扩增反应总体积为25 µL，其中5'和3'引物各1 µL，10×缓冲液2.5 µL，dNTP l µL， Taq酶1 U，模板DNA100 ng，加水至25 µL。置于PCR扩增仪中。94 ℃骤变性2 min。循环为94 ℃，30 s；55 ℃，45 s；72 ℃，45 s。共35个循环，最后72 ℃延伸3 min。取10 µL PCR产物作2%琼脂糖电泳，溴乙锭染色。柴外透射仪下观察结果，以PBR322DNA/Hae marker作为分子量标准。PCR扩增仪为美国PE公司9600型。

1.2.2 EB病毒VCA-IgG测定：EB病毒VCA-IgG试剂盒购自天津四方公司，操作步骤按试剂盒说明书。

1.3 统计学处理：采用PEMS 3.1对数据进行统计学处理，计量资料以（x-±s）表示，采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

3 讨 论

根据相关数据显示，初次剖宫产二次怀孕的产妇，在第二次分娩时仍会有80%的产妇选择剖宫产，虽然这比阴道分娩相比更为安全，但是对其手术的要求比较高，且手术时机的选择也极为重要，此外，大量临床资料表明，产后出血是瘢痕子宫剖产最为常见的并发症，而宫缩乏力是引起产后出血的主要原因。使用缩宫素对再次剖宫产产妇进行治疗，其作用较快，在肌注3 min之后则会起效，因为缩宫素的半衰期较短，极易被肝、肾、胎盘缩宫素酶等相关位置进行清除，其持续时间大约为30 min。然而缩宫素能够有效的减少子宫血流量，并对子宫上段收缩产生相应的刺激同时，缩宫素大剂量使用，也可能会产生不良反应［4］。欣母沛是甲基前列腺素，是天然前列腺素PGF2α的一种派生物，能够刺激产妇子宫平滑肌的收缩，对血管起到压迫作用，能够关闭血窦，最终起到止血的作用，且该药物的维持时间较长［5］。本研究通过对88例产妇运用不同预防方法能够发现，欣母沛联合宫缩素方法能够降低二次剖宫产的产妇在产后的出血率，对于产后出血情况的止血效果明显，此外两组产妇在用药后出现不良反应没有明显差异，不具有统计学意义（P＞0.05），且在经过相应治疗后不良反应消失。

综上所述，欣母沛联合宫缩素对于预防再次剖宫产产后出血的效果明显，且能在一定程度上减少其不同时段的产后出血量，并减少了宫缩素的反复用药过程，避免宫缩素剂量过大对产妇造成不良影响，临床价值显著，值得推广使用。

参考文献

［1］ 周润华，陈世雄，魏金柱，等.欣母沛预防产后出血200例疗效观察［J］.西部医学，2012，24（8）：1603-1604.

［2］ 王茜，朱玉莲，吴红梅，等.缩宫素联合欣母沛防治高危产妇剖宫产术后出血的疗效观察［J］.西部医学，2014，26（5）：611-612.

［3］ 陈荣芳，曹征然，王娟，等.产后大出血高危因素分析及欣母沛的预防效果［J］.中国妇幼健康研究，2014，25（4）：628-630.

［4］ 谭洁，孙杨燕，包理丽，等.欣母沛和缩宫素预防产后出血疗效观察［J］.中国现代医生，2012，50（25）：143-144.

［5］ 魏伟.欣母沛与缩宫素在预防和治疗产后出血中的临床对比分析［J］.中国医药指南，2014，12（19）：239-240.

中图分类号：R593.24

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）17-0095-02