即溶灵芝的质量控制

2016-01-30张佳丽宋翔李云兰

中国医药指南 2016年14期

关键词：糠醛灵芝光度

张佳丽宋翔李云兰*

（1 山西医科大学药学院，山西太原 030001；2 山西医科大学第二附属医院，山西太原 030001）

即溶灵芝的质量控制

张佳丽1△宋翔2△李云兰1*

（1 山西医科大学药学院，山西太原 030001；2 山西医科大学第二附属医院，山西太原 030001）

目的建立即溶灵芝的质量控制方法。方法采用紫外分光光度法测定灵芝多糖的含量。结果灵芝多糖的含量测定线性范围为3.44～17.19 μg/mL，回归方程为y=5.4036m+0.0370（r=0.9996）；三批样品中灵芝多糖的含量分别为（19.0±0.25），（24.1±0.93）及（14.6 ±0.17）g/100 g。结论本法简便灵敏，精密度高，重现性好，稳定性强，能对即溶灵芝的实际样品进行质量检测。

即溶灵芝；灵芝多糖；含量测定；质量控制

△并列第一作者

灵芝为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum （Leyss.ex.Fr.）Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao， Xu et Zhang的干燥子实体，具有增强人体免疫力、延年益寿等功效。即溶灵芝是由灵芝提取物制成的细腻、疏松、无结块的粉状物，一般为棕色或棕褐色，具有灵芝特有的香气，味苦，无异味。

灵芝多糖作为灵芝的一类重要活性成分，主要由D-葡萄糖，D-半乳糖等构成，具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等功效。植物体的碳素营养性状常以可溶性多糖的含量作为重要指标，因此本文以即溶灵芝的灵芝多糖作为含量测定指标。

1 材料

D-无水葡萄糖（0833-9501，含量≥99.0%）对照品购于中国药品生物制品鉴定所；蒽酮购于国药集团化学试剂有限公司（分析纯，30015014，技术条件符合Q/CYDZ 855-2008，批号20111207）；即溶灵芝供试品（批号分别为：20130310，20130311，20130312）。

2 方法与结果

2.1 含量测定原理：糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物。在一定范围内，糠醛衍生物的颜色深浅与糖的含量成正比，采用紫外分光光度法（北京普析1901型紫外-可见分光光度计）测定吸光度值，计算葡萄糖的含量，测定方法参照中国药典2010年版一部附录VA［1］。

2.2 溶液的配制：精密称取蒽酮0.1 g，加80%的硫酸溶液100 mL使之溶解，摇匀，即得硫酸蒽酮溶液。精密称取干燥至恒重的D-无水葡萄糖对照品13.75 mg，加水制成每1 mL含有0.1375 mg的对照品溶液。

取本品粉末约0.1 g，精密称定，置索氏提取器中，加水90 mL，电加热器加热回流提取至提取液无色，提取液转移至100 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取10 mL，加入乙醇150 mL，摇匀，4 ℃放置12 h，取出，离心，倾去上清液，沉淀加水溶解，转移至50 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.3 最大吸收波长的确定：精密量取对照品溶液0.6 mL（2.2项下），置10 mL具塞试管中，加水1.4 mL，加入硫酸蒽酮溶液6 mL，摇匀，置水浴中加热15 min，取出，加入冰浴中冷却15 min，照紫外-可见分光光度法（附录V A），在400～800 nm波长范围内扫描。样品在625 nm处有最大吸收峰，故选择625 nm为测定波长。

2.4 方法学考察

2.4.1 线性关系考察：分别精密吸取对照品溶液（2.2项下）0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，操作步骤同上，测定吸光度，以吸光度y为纵坐标，葡萄糖重量m为横坐标进行回归，得到线性方程为：y=5.4036m+0.0370（r=0.9996）。在3.44～17.19 μg/mL范围内，线性关系良好。

2.4.2 精密度试验：取对照品溶液（2.3项下），平行测定6次，吸光度的RSD为0.2%。精密度良好，能够满足定量分析的一般要求。

2.4.3 稳定性试验：精密量取供试品溶液（2.2项下）（批号20130310）2.0 mL，操作步骤同上，测定吸光度，放置不同时间后（0，10，20，30，60，120，240，480 min）重复测定，8次测定吸光度的RSD为0.44%，说明供试品溶液在8 h内较为稳定，能够满足定量分析的一般要求。

2.4.4 重现性试验：制备6份供试品溶液（2.2项下）（样品批号20130310），操作步骤同上，测定吸光度，计算含量及RSD。试验结果的RSD值为1.6%，满足定量分析的一般要求。

2.4.5 加样回收率试验：精密称取样品（样品批号20130310，葡萄糖含量189.0 mg/g）6份，分别精密加入无水葡萄糖对照品适量，操作步骤同上，测定吸光度，计算回收率和RSD。由试验结果可知（n=6），平均加样回收率为（101.8±1.27）%，RSD值为1.2%，满足定量分析的一般要求。

2.5 含量测定：分别精密称取样品（批号分别为20130310，20130311，20130312）各3份，按2.2项下制备供试品溶液，操作步骤同上，测定吸光度，计算样品中葡萄糖的含量。由试验结果可知，三批即溶灵芝样品，以无水葡萄糖计（n=3），含量分别为（19.0 ±0.25），（24.1±0.93），（14.6±0.17）g/100 g，RSD值分别为1.3%，3.9%，1.2%。