中药天麻中天麻素的含量测定
2016-01-28李钊李维聪
李钊 李维聪
中药天麻中天麻素的含量测定
李钊 李维聪
目的探讨分析不同产地中药天麻的天麻素含量。方法从合法的药材公司购买标示产地为四川江油、云南昭通、甘肃康县、贵州大方的天麻各一批次若干,在色谱条件:YMC-Triart C18 色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm);检测波长:220 nm;柱温: 30℃;流动相: 0.05%磷酸水溶液(B)-甲醇(A)梯度洗脱,0~10min,B(98%);10~20min,98%B→95%B;20~60min ,95%B→60%B;60~85min,60%B维持;流速为 0.8ml/min;进样体积:20 μl;测定其中天麻素含量。结果云南昭通平均天麻素含量为0.51%,贵州大方为0.42%,四川江油为0.35%,甘肃康县为0.27%。结论云南昭通所含天麻素含量较高。
中药;天麻;天麻素;含量
天麻为兰科植物天麻干燥块茎,是一种名贵中药材,始载于《神农本草经》,又称赤箭、离母、定风草根、木浦、明天麻、冬麻、春麻等;根状茎肥厚,无绿叶,在自然界中通常以块茎或者是种子繁殖、生长,是多年生草本类植物;性甘味平,归肝经。具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络功效,用于小儿惊风、 癫痫抽搐、 破伤风、 头痛眩晕、 手足不遂、 肢体麻木,风湿痹痛等神经系统疾病[1]。为进一步探讨天麻的质量,本文于合法的药材公司购买标示产地为四川江油、云南昭通、甘肃康县、贵州大方的天麻各一批次若干,分别对天麻素含量进行测定。
1 仪器与试药
WL-100高速粉碎机,R-1001N旋转蒸发仪,WB-200水浴箱,1/100000天平,岛津LC-20A 高效液相,甲醇(色谱级),乙腈(色谱级),超纯水机(自制),磷酸(分析级);天麻素对照品(成都曼斯特生物科技有限公司,纯度>99.5%)天麻药材选择云南昭通,四川江油,甘肃康县,贵州大方几个主要天麻产区样品,经副主任中药师鉴定为兰科植物天麻。
2 方法
2.1 色谱条件 色谱柱:YMC-Triart C18 色谱柱(4.6mm× 250mm,5 μm);检测波长:220 nm;柱温为 30℃;流动相:0.05%磷酸水溶液(B)-甲醇(A)梯度洗脱,0~10min,B(98%);10~20min,98%B→95%B;20~60min,95%B→60%B;60~85min,60%B维持;流速为 0.8ml/min;进样体积:20 μl。
2.2 供试品及样品制备
2.2.1 标准品 精密称取天麻素标准品适量于10ml容量瓶中,加流动相稀释至刻度,得到浓度为51.2 μg/L天麻素对照品。
2.2.2 供试品制备 精密称取干燥天麻样品,粉末(过三号筛)3 g,加入50ml 60%甲醇,50℃超声提取 60min,补足缺失的重量,过滤,取续滤液 10ml 浓缩至近干,加流动相溶解后定容至 25ml容量瓶中,摇匀,过0.45 μm 微孔滤膜,即得。
2.3 标准曲线的绘制 取天麻素对照品溶液,分别稀释1、2、 4、 8、 10后,参照“2.1项”检测条件进行测定,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,进行线性拟合,得到天麻素的线性方程是:y=235.5A1-254.3(r=0.9995),线性范围为 5.12~51.2 μg/L。
2.4 精密度检测 取对照品溶液,对照溶液进样量10 μl,连续进样6次,测定峰面积,测定吸光RSD为1.34%,符合标准规定,可见仪器精密度良好。
2.5 重复性 精密称取同批号粉碎过筛(40目)的天麻样品6份,参考“2.2.2项”处理样品后,制作供试品共6份,按照“2.1项”检测条件进行检测,结果对应RSD为1.47%(<2.00%),符合标准规定,因此具有良好的重复性。
2.6 稳定性试验 取样品溶液与对照品溶液,分别在0、2、4、8、16、24 h密量取20 μl注入分析仪器,进样测定,两组溶液峰面积的RSD为1.3%(<2.0%),符合标准规定。结果表明对照品和供试品溶液至少在24 h内基本稳定。
2.7 回收率实验 准确称取6份样品,粉碎过筛(40目),0.5 g/份,然后加相应的标准溶液,进行定容。按照“2.1项”检测条件进行检测,得到回收率。测定结果表明:平均回收率分别是102.13%,RSD分别是1.07%。
2.8 样品中天麻素测定 参照“2.2.2项”上供试品制作方法及“2.1项”相关检测条件,对各批次样品中 天麻素含量进行测定。
3 结果
含云南昭通平均天麻素含量为0.51%,四川江油平均天麻素含量为0.35%,贵州大方为0.42%,甘肃康县为0.27%。
4 讨论
天麻早在《神农本草经》中就有记载,将其称之为“赤箭”,至明代,李时珍的《本草纲目》则集以往之大成,对天麻等作了系统概述[2]。天麻在自然界的形态特征具体表现在植株高30~100cm,此类植物根状茎肥厚,块茎状椭圆形至近哑铃形,长8~12cm,直径3~7cm,具有较密的节,一般生长在疏林下,林中空地,灌丛边缘或海拔400~3200 m位置[3],分布于我国各个领域。目前以云南昭通天麻中天麻素含量最高,质量更优。
本文以天麻有效成分天麻素为例对不同来源的天麻含量进行测定结果显示,云南昭通天麻中天麻素平均含量0.51%,与上述结论基本相符。临床使用天麻时,必须要保证药材符合质量标准,并结合患者的体质应用,确保用药的合理性和安全性,避免药物风险事件的发生。
[1]杜庆波.天麻药理活性与临床应用研究新进展.齐齐哈尔医学院学报,2013,34(16):2434-2435.
[2]龚其海,石京山,杨丹莉,等.天麻素在中枢神经系统的药理作用及其机制.中国新药与临床杂志,2011(3):176-179.
[3]李颖,毛瑞阳,杜晓红.天麻素对同型半胱氨酸诱导的细胞因子表达的影响.中华中医药学刊,2014,32(2):393-395.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.09.217
2016-02-29]
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