MTHFR C677T基因多态性与复发性自然流产相关性的Meta分析①

孙玲玲，方　芳，荆洪英，雷力力

(佳木斯大学附属第一医院药剂科，黑龙江 佳木斯 154003)



MTHFR C677T基因多态性与复发性自然流产相关性的Meta分析①

孙玲玲，方芳，荆洪英，雷力力

(佳木斯大学附属第一医院药剂科，黑龙江 佳木斯 154003)

摘要：目的：运用Meta分析综合评价亚甲基四氢叶酸还原酶( MTHFR) C677T基因多态性与复发性自然流产的关系。方法：通过检索PubMed、中国知网等中英文文献数据库，收集所有关于MTHFR C677T基因多态性与复发性自然流产相关的病例对照研究，提取所需数据应用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果：共收入13篇文献，其中7篇中文相关文献和6篇英文文献。包括病例组1646例，对照组4072例。Meta分析结果表明：TT型发生复发性流产的风险比CC/CT高1.33倍[RR=1.33，95%CI=0.85~2.09]，其中国内和国外人群TT型发生复发性流产的风险分别比CC/CT型高1.90倍[RR=1.90，95%CI=1.25~2.89]和0.58倍[RR=0.58，95%CI=0.22~1.49]；TT型发生复发性流产的风险比含C等位基因型高1.40倍[RR=1.40，95%CI=0.81~2.40]，其中国内和国外人群TT型发生复发性流产的风险分别比含C等位基因型高2.25倍[RR=2.25，95%CI=1.41~3.59]和0.48倍[RR=0.48，95%CI=0.48~1.55]。结论：MTHFR C677T 基因多态性与复发性流产的易感性密切相关，但其病因关联性仍有待于在人群中进行大规模的研究加以论证。

关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性；复发性自然流产；Meta分析

复发性自然流产(Recurrent spontaneous abortion,RSA)指自然流产连续发生两次或以上，育龄妇女中的发生率约为1%~2%[1]。近年来研究表明，亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)的缺陷与孕妇复发性自然流产的发生有关，MTHFR在叶酸代谢及 DNA 甲基化 和 DNA 合成修复过程中起关键作用，是参与叶酸代谢过程中的关键酶[2]，它可以催化5，10-亚甲基四氢叶酸转变成5-甲基四氢叶酸。MTHFR基因已发现存在多个突变位点，而在这些变位点中研究最多的是MTHFR基因 cDNA序列上第4外显子677位点核苷酸C>T，目前研究的热点是突变位点与疾病的相关性。目前，国内外已有关于MTHFR多态性与复发性流产相关性研究报道，但却不尽相同。随着现代分子生物学技术的进步，越来越多的研究表明在影响不良妊娠的诸多因素中，遗传因素占据了很大优势。探讨MTHFR基因多态性与胎儿先天畸形、自然流产、肿瘤性疾病及心脑血管疾病的关系的研究更是被广泛关注[3~5]。因此，我们通过对MTHFR C677T基因多态性与复发性流产相关的中英文文献的收集和进行更全面系统的分析与评价，为复发性流产疾病临床方面提供参考依据。

1　资料与方法

1.1文献检索

在PubMed、Highwire、CNKI上检索了关于MTHFR C677T与RSA相关的所有文章。检索时间均从2009年至今。检索主题词分别为中英文形式为MTHFR、RSA、polymorphism、genotype、复发性流产、亚甲基四氢叶酸还原酶。

1.2纳入与排除标准

1.2.1纳入标准

①MTHFR C677T基因多态性与复发性自然流产相关研究；②以复发性流产患者为病例组，正常人为对照组；③流产次数或孕次数≥2且至少有1次或1次以上孕史；④文献为中文或英文；⑤根据病例组、对照组数据计算出RR和95%置信区间(CI)。

1.2.2排除标准

①非相关性研究；②数据不完整或描述不清；③结果不符合纳入标准文献数据；④对重复或重叠文献选择数据最完整文献。

1.3数据提取

选择符合以上纳入和排除标准的文献，对检索到的文章质量进行评价。每个研究提取以下信息：第一作者的姓名，出版年限，国家，病例组和对照组3种基因型的例数。其中考虑内容主要包括：对照组的选取及复发性流产病例诊断。对于质量较差的文献予以剔除。

1.4统计学方法

采用RevMan5.3软件进行统计分析，并完成相关图表的绘制。计数资料采用相对危险度(relative risk，RR)，以95%可信区间(confidence interval，CI)表示。对所纳入的文献进行异质性检验，根据异质性检验结果选择效应模型，异质性检验(P<0. 05)，采用随机效应模型，否则采用固定效应模型。

2　结果

2.1纳入文献基本特征

见表1。根据1.2纳入与排除标准，对检索到文献进行整理，最终纳入13篇中英文标准文献，共累计病例组人群1646例，对照组人群4072例。其中国内病例组821例，对照组927例；国外病例组825例，对照组3145例。

表1　纳入Meta分析文献一般特征

2.2MTHFR C677T基因多态性与RSA关系的Meta分析

2.2.1TT型与RSA相关性

经过异质性检验，TT型存在异质性(P<0.01，I2=83%)，采用随机效应模型。Meta分析结果显示，TT型发生复发性流产的风险比CC/CT高1.33倍[RR=1.33，95%CI=0.85~2.09]，病例组与对照组差异无统计学意义(P<0.05)，见图1。分别对国内和国外人群进行分析，经异质性检验，国内人群存在异质性(P<0.05，I2=69%)，国外人群存在异质性(P<0.01，I2=84%)，均采用随机效应模型。Meta分析结果显示，国内人群TT型发生复发性流产的风险比CC/CT型高1.90倍[RR=1.90，95%CI=1.25~2.89]，病例组与对照组差异有统计学意义(P<0.05),见图2。国外人群TT型发生复发性流产的风险比CC/CT型高0.58倍[RR=0.58，95%CI=0.22~1.49]，病例组与对照组差异无统计学意义(P<0.05)，见图3。

图1　国内外TT与RSA相关性Meta分析森林图

图2　国内TT与RSA相关性Meta分析森林图

图3　国外TT与RSA相关性Meta分析森林图

2.2.2TTvsCC与RSA相关性

经过异质性检验，TT型存在异质性(P<0.01，I2=90%)，采用随机效应模型。Meta分析结果显示，TT型发生复发性流产的风险比含C等位基因型高1.40倍[RR=1.40，95%CI=0.81~2.40]，病例组与对照组差异无统计学意义(P<0.05)，见图4。

图4　国内外TTvsCC与RSA相关性Meta分析森林图

分别对国内和国外人群进行分析，经异质性检验，国内人群存在异质性(P<0.01，I2=78%)，国外人群存在异质性(P<0.01，I2=90%)，均采用随机效应模型。Meta分析结果显示，国内人群TT型发生复发性流产的风险比含C等位基因型高2.25倍[RR=2.25，95%CI=1.41~3.59]，病例组与对照组差异有统计学意义(P<0.05)，见图5。国外人群TT型发生复发性流产的风险比含C等位基因型高0.48倍[RR=0.48，95%CI=0.48~1.55]，病例组与对照组差异无统计学意义(P<0.05)，见图6。

图5　国内TTvsCC与RSA相关性Meta分析森林图

图6　国外TTvsCC与RSA相关性Meta分析森林图

2.3发表偏倚

对纳入 Meta 分析的13篇MTHFR C677T 基因多态性与复发性流产的研究文献进行发表偏倚评价，结果显示，倒漏斗图基本对称，发表偏倚较小。

3　讨论

随着精准医学和分子生物学的发展，一些药物相关基因多态性与疾病的相关性研究越来越受关注[11~14]，为临床疾病的诊断和治疗提供了依据。MTHFR是一种黄素蛋白，其相对分子质量为14500，它是一种依赖叶酸的酸，广泛存在于动物的肝脏中。1995年，Frosst[6]等首次发现了MTHFR 677C→T突变位点，是目前发现的MTHFR最常见的突变位点之一。MTHFR 677C→T基因是一种常见的突变位点，在体内有三种基因型，分别是野生型纯合子(CC型)，杂合子(CT型)和突变纯合子(TT型)。MTHFR 677TT纯合子已与同型半胱氨酸水平增加有关，可以引起绒毛膜血管形成缺陷，导致胎盘早剥和梗死，可能导致妊娠丢失[7~11]。 本研究表明 MTHFR C677T 突变纯合子(TT)可能增加流产风险，特别是中国女性这个人群中，而在其他国家地区人群中并未发现存在相关联性。这可能是因为由于两人群的遗传背景、饮食、地域环境等不同，可能会影响 MTHFR 的活性也可能是其重要原因，这有待于我们进一步的探究。但由于本文所选的英文文献较少，所以可能导致本次结果的偏差。更有待于大样本数据进一步探究MTHFR C677T与复发性流产之间的关联性，以为治疗和预防该疾病提供实验室依据。

参考文献：

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[2] 李栋，景学安，王华义，等.孕期化学物接触及基因多态性与先天性心脏病[J]. 中国公共卫生，2009，25(9):081-1083

[3] Gemmati D，Ongaro A，Tognazzo S，et al.Methylenetetrahydrofolate reduetase C677T and A1298C gene variants in adult non-Hodgkin's lymphoma patients: association with toxicity and survival [J].Haematologica，2007，92(4):478-485

[4] Callejion G， Mayor-Olea A， Jimenez AJ， et al. Genotypes of the C677T and A1298C polymorphisms of the MTHFR gene as a cause of human spontaneous embryo loss [J]. Hum Reprod ，2007，22 (12):3249-3254

[5]Van der Put NM， Gabreels F， Stevens EM，et al. A second common mutation in the methylenetetrahydrofolate reductase gene:an additional risk factor for neural tube defects[J]. Am J Hum Genet，1998，62 (5):1044-1051

[6]Frosst P，Blom HJ，Milos R， et al. A candidate genetic risk factor for vascular disease:a common mutation in methylenetetrahydrofolate[J].N-at Genet，1995，10(2):111-113

[7]NelenWL，BultenJ，SteegersEA，et al. Maternaland chorionic vascularizationin recurrentearly pregnancyloss[J]. Hum Reprod，2000，15:954 -60

[8]DiSimone N，RiccardiP，Maggiano N，et al. Effectoffolic acid on homocysteine-inducedtrophoblastapoptosis[J]. Mol Hum Reprod，2004，10:665-669.

[9]左璐，方芳，杨军，等.佳木斯地区健康人群与高血压患者CYP3A4*1G基因多态性分析[J].黑龙江医药科学，2015，38(1)：7-9

[10]杜美霖，方洪壮，张天英，等.ACE基因多态性在佳木斯正常人高血压患者中的分布[J].黑龙江医药科学，2015，38(3)：161

[11]田寅，太史靖华，国玉芝， 等.CYP1B1SNPrs1056827,rs1056836基因多态性与乳腺癌关联研究频率[J].黑龙江医药科学，2015，38(5)：1-2

[12]荆洪英，董立华，谷继卜，等.癫痫患者CYP2D6*10基因多态性分析[J].黑龙江医药科学，2012，35(5)：3-4

中图分类号：R714.21

文献标识码：A

文章编号：1008-0104(2015)06-0052-04

基金项目：①1.佳木斯大学研究生创新项目，编号：LM2014_057；2.佳木斯大学科学技术面上项目，编号：13Z1201549。

作者简介：孙玲玲(1990～)女，黑龙江佳木斯人，在读硕士研究生。

通讯作者：雷力力(1958～)女，黑龙江佳木斯人，学士，主任药师，硕士研究生导师。E-mail:leill888@126.com。

(收稿日期：2015-06-15)