急性脑梗死患者TNF-α和TNF-β的含量变化及相关因素分析

廖庆红　付建辉★　汪　飞　陈诗莉

急性脑梗死患者TNF-α和TNF-β的含量变化及相关因素分析

廖庆红付建辉★汪飞陈诗莉

目的 探讨急性脑梗死患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肿瘤坏死因子-β（TNF-β）的含量变化及其相关因素的分析。方法 选取65例脑梗死患者为观察组，同期健康体检人群40例为对照组，检测TNF-α及TNF-β水平。结果 观察组TNF-α与TNF-β水平均明显高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。TNF-α和TNF-β水平与神经功能缺损评分、脑梗死面积呈明显正相关（P均＜0.01）。评分越高，脑梗死面积越大，TNF-α和TNF-β水平增高越明显。TNF-α与TNF-β水平呈明显正相关（r=0.455，P＜0.01）。结论 TNF-α与TNF-β参与了脑梗死早期发病过程。TNF-α与TNF-β水平与脑梗死病情的严重程度及预后有关。

TNF-α TNF-β 脑梗死

肿瘤坏死因子（TNF）作为一种具有广泛生物效应的炎性细胞因子，分为TNF-α和TNF-β两种。研究显示，发生急性脑梗死时，TNF-α在病灶周围及血浆中浓度增高［1］。TNF-α被认为是脑梗死疾病病理生理机制中的关键介质，参与脑梗死的炎症免疫过程。目前大多数研究集中于TNF-α在心脑血管疾病中的作用机制，而TNF-β与脑梗死的关系并未引起重视。本文就TNF-α和TNF-β与脑梗死发生的相关性作进一步探讨，旨在了解急性脑梗死患者血清中TNF-α和TNF-β含量变化，探讨其在急性脑梗死中的作用及临床意义。报道如下。

1　临床资料

1.1一般资料 连续收集2012年6月至2014年6月脑梗死患者65例为观察组，男43例，女22例；年龄39～86岁，平均年龄（58.3±7.3）岁。同时随机抽取门诊健康人群40例为对照组，男28例，女12例；年龄45～80岁，平均年龄（55.9±6.7）岁。纳入标准：（1）均符合WHO脑梗死诊断标准。（2）发病48～72 h内经头颅MRI/CT检查，明确梗死灶。（3）患者均知情同意，自愿参加。排除标准：（1）有房颤、感染性心内膜炎等可致心源性脑栓塞疾病。（2）近期有急性感染性疾病。（3）严重心、肝、肾功能障碍或造血系统疾病，肿瘤等。（4）近期服用糖皮质激素或免疫抑制剂以及溶栓治疗者。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2分组 脑梗死组根据第四届全国脑血管病学术会议通过的脑卒中患者神经功能缺损评分标准中“改良爱丁堡-斯堪的那维亚卒中量表”进行分组，轻型组0～15分，中型组16～30分，重型组31～45分。根据评分标准分为轻型23例、中型24例、重型18例。根据头颅CT或MRI所示病灶大小，将脑梗死分为大面积脑梗死（病灶直径＞4cm）亚组15例，中等面积脑梗死（病灶直径1.5～4.0cm）亚组28例，小面积脑梗死（病灶直径＜1.5cm）亚组22例。

1.3方法 （1）标本采集：所有观察对象清晨抽取空腹肘静脉血5ml，标本用无菌生化抗凝试管留取，以3000r/min离心10min后分离血清，置于-20℃冰箱内保存待测。（2）TNF-α和TNF-β检测：采用ELISA法检测，试剂盒购自美国TPI公司，仪器为FJ-2008型自动γ免疫计数仪检测。操作严格按试剂盒使用说明书进行。此外，甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）检测。TC、TG用酶法，HDL-c、LDL-c用直接法测定。

1.4统计学方法 采用SPSS13.0统计软件包。计量资料以 （x±s）表示，组间比较采用单因素方差分析及两两比较的SNK法测定，不同面积组间血清中TNF-α和TNF-β含量比较采用成组的t检验，并且进行方差齐性检验。TNF-α和TNF-β之间相关性采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1脑梗死组与对照组一般资料比较 脑梗死组患者的年龄、性别构成与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05），而TG、TC、LDL-c浓度均明显高于对照组（P＜0.05），但HDL-c浓度则明显低于对照组（P＜0.05）。2.2 脑梗死组与对照组TNF-α和TNF-β含量变化 有临床神经功能缺损的各组脑梗死患者TNF-α和TNF-β水平均分别明显高于对照组（P＜0.05）；重型组血清TNF-α和TNF-β水平均高于中、轻型组（P＜0.01）；中型组TNF-α和TNF-β水平均高于轻型组（P＜0.05）。

2.3梗死面积不同的脑梗死患者TNF-α和TNF-β测定结果 大面积组患者血清TNF-α和TNF-β明显高于中等面积组和小面积组（P＜0.01）。中等面积组明显高于小面积组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.4脑梗死组血清TNF-α和TNF-β水平与梗死面积、神经功能缺损评分的关系 血清TNF-α和TNF-β呈直线正相关（r=0.328，P＜0.05）。TNF-α和TNF-β水平分别与梗死面积、临床神经功能缺损程度呈正相关（P均＜0.01）。

3　讨论

研究发现TNF-α具有促进修复以及造成脑组织缺血再灌注损伤的双重作用［2］。体外实验中，给予神经元兴奋性、代谢性及氧化应激性损伤刺激后，TNF-α具有促使轴索再生的保护作用［3］。在脑梗死炎症反应中，TNF-α通过损伤血管内皮细胞、增加血管壁通透性，释放多种炎性介质诱导产生炎症，以及增加兴奋性氨基酸、一氧化氮及自由基等的产生和释放，产生神经毒性，从而加重脑梗死后组织损伤的作用。有研究表明TNF-α表达与细胞凋亡呈正相关，表达水平下降，神经细胞凋亡下降，从而减轻了炎症反应［4］。

TNF-β主要是由Th1分泌，可诱导活化B细胞和巨噬细胞。TNF-β可引起核酸内切酶和caspase家族的级联反应促使细胞凋亡［5］。TNF-β在心脑血管疾病发病过程中的机制尚不清楚。TNF-β基因多态性与脑梗死密切相关，TNF-β基因高表达导致脑卒中发生的几率增大［6］。在基因水平上炎性细胞因子的变异可能会导致患者患脑卒中危险性增高。本资料发现脑梗死患者血清中TNF-α、TNF-β水平明显高于正常对照组，说明急性脑梗死患者发病早期即出现TNF-α、TNF-β升高现象。在梗死面积方面，大面积组患者血清TNF-α和TNF-β水平明显高于中等面积组和小面积组，中等面积组明显高于小面积组。在神经功能缺损评分方面，重型组血清TNF-α和TNF-β水平均高于中、轻型组（P＜0.05）；中型组的血清TNF-α和TNF-β水平均高于轻型组（P＜0.05）。血清TNF-α和TNF-β水平分别与梗死面积、临床神经功能缺损程度呈正相关，说明两者之间存在密切的关系。表明脑缺血后过度表达的TNF-α和TNF-β可以加重缺血再灌注损伤。随着梗死面积及神经功能缺损的加重，血管内皮完整性受到破坏，内皮功能损伤越严重，越加剧炎症反应，TNF-α和TNF-β表达越高，因此，推测TNF-α和TNF-β的水平在一定程度上反映了患者病情的轻重程度。

此外，本资料显示血清中TNF-α和TNF-β呈直线正相关。两者在脑梗死的发生发展过程中起到正反馈的联合作用。因此如何有效降低TNF-α和TNF-β水平，对于减轻炎症反应，神经功能的恢复，改善预后具有重要意义，这也为治疗脑梗死提供了新的方法。本资料不足之处在于实验样本量小、干扰因素较多，一定程度上实验结果会产生偏倚，因此需要长期、大样本量、多中心、多因素的随机双盲对照研究。

1 Trenkmann M，Brock M，GayRE，et al.Tumor necrosis factor alphainduced microRNA-18a activates rheumatoid arthritis synovial fibroblasts through a feedback loop in NF-kappa B signaling.Arthritis Rheum，2013，65（4）：916～927.

2 Chu WM. Tumor necrosis factor.Cancer letters，2013，328（2）：222～225.

3 Mattson MP，Barger SW，Furnkawa K，et al.Cellular signaling roles of TGF beta TNF alpha and beta App in brain injury responses and Alzheimers disease.Brain Res Rev，1997，23（1～2）：47～61.

4 Chen J，Wu X，Shao B，et al. Increased expression of TNF receptorassociated factor 6 after rat traumatic brain injury. Cell Mol Neurobiol，2011， 31（2）： 269～275.

5 张全云，丁月东，汪允珍.氯胺酮对兔全脑缺血-再灌注海马细胞凋亡及TNF-β和IL-10的影响.临床麻醉学杂，2012，28（12）：1226～1229.

6 Szolnoki.Lymrphotoxin-alpha gene 2526 allelie variant is a risk factor for large-vesel-associated ischemic.Stroke，2005，27（2）：205～211.

314100 浙江省嘉善县第一人民医院神经内科（廖庆红汪飞 陈诗莉）

200040 上海复旦大学附属华山医院神经内科（付建辉）