丁溴东莨菪碱注射液有关物质的研究

丁溴东莨菪碱注射液有关物质的研究

陈青1，钱利民2，陈真1

(1.山东省食品药品检验研究院，山东 济南 250101；2.山东省千佛山医院，山东 济南250012)

摘要：目的建立高效液相色谱法测定丁溴东莨菪碱注射液的特定杂质托品酸。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，以0.004%磷酸溶液-乙腈(50∶50)配制的0.008 mol·L-1 十二烷基硫酸钠溶液为流动相，柱温为40 ℃，流速为1.2 mL·min-1,检测波长为210 nm。结果高效液相色谱各杂质峰与主峰均分离良好；方法的精密度良好；杂质托品酸在2.38～14.31 μg·mL-1(r=0.999 9)内线性关系良好；杂质托品酸的检出限为0.48 ng。结论该方法简便，专属性强，适用于有关物质的测定。

关键词：高效液相色谱法；丁溴东莨菪碱注射液；有关物质；托品酸

作者简介：陈青，女，副主任药师，研究方向：药物分析，E-mail:chenchenchenqing@sina.com

中图分类号：R927.11文献标识码：A

Study on the related substances in Scopolamine Butylbromide Injection

CHENQing1,QIANLi-min2,CHENZhen1

(1.ShandongInstituteforFoodandDrugControl,Jinan250101,China；2.Shandong

QianfoshanHospital,Jinan250012,China)

Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of specified impurity in Scopolamine Butylbromide Injection.MethodsThe separation was carried out on a Kromasil C18 column(4.6 mm×250 mm,5 μm)，the mobile phase was 0.004% phosphoric acid solution-acetonitrile (50∶50),including 0.008 mol·L-1 sodium lauryl sulfate,the flow rate was 1.2 mL·min-1,the column temperature was 40 ℃ and the detection wavelength was 210 nm.Results Any impurity peak in the HPLC chromatogram was separated well from the main peak,the reproducibility and precision of the method were good,the linear range of tropic acid was 2.38～14.31 μg·mL-1(r=0.999 9),detection limit of tropic acid was 0.48 ng.ConclusionThe method was accurate,convenient and suitable for the quality control of related substance in Scopolamine Butylbromine Injection.

Key words:HPLC;Scopolamine Butylbromine Injection;Related substance;Tropic acid

丁溴东莨菪碱注射液属抗胆碱药,主要用于胃、十二指肠、结肠内窥镜检查的术前准备，内镜逆行胰胆管造影[1～3]，和胃、十二指肠、结肠的气钡低张造影或腹部CT扫描的术前准备，可减少或抑制胃肠道蠕动； 用于各种病因引起的胃肠道痉挛、胆绞痛、肾绞痛或胃肠道蠕动亢进等[4～7]。该品种收载于《中国药典》2010年版(二部)[8]，采用高效液相色谱法测定有关物质,国外药典除《英国药典》2015版外，其他药典均未收载。检验过程中发现丁溴东莨菪碱注射液有2个比较明显的杂质峰，现行标准中只对其中的一个峰，即氢溴酸东莨菪碱峰进行控制，经分析，另一杂质峰为丁溴东莨菪碱的降解产物托品酸，故有必要对另一杂质建立专属性强的检测方法。

1仪器与试药

Agilent 1200高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；丁溴东莨菪碱注射液(潍坊制药厂,批号:20130101、20130102、20130103)；氢溴酸东莨菪碱对照品(中国食品药品检定研究院,批号:100049-201009)；托品酸(百灵威公司)；乙腈为色谱纯，磷酸与十二烷基硫酸钠为分析纯,水为重蒸馏水。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：0.004%磷酸溶液-乙腈(50∶50)配制的0.008 mol·L-1十二烷基硫酸钠溶液；柱温：40 ℃；流速：1.2 mL·min-1；检测波长：210 nm；进样量：20 μL。

2.2溶液制备

2.2.1贮备溶液精密称取托品酸9.54 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为贮备溶液。

2.2.2供试品溶液精密量取本品适量，用水定量稀释制成每1 mL中约含丁溴东莨菪碱2 mg的溶液，色谱图见图1。

2.2.3对照溶液取氢溴酸东莨菪碱对照品与托品酸适量，加水溶解并稀释制成每1 mL中含氢溴酸东莨菪碱2 mg与托品酸1 mg的溶液，作为对照品溶液，精密量取供试品溶液2 mL和对照品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

2.3检出限取“2.2.1”项下贮备溶液适量，梯度稀释，制备不同浓度的溶液，按“2.1”项下的色谱条件，注入液相色谱仪，按S/N=3计算检出限，为0.48 ng。

2.4专属性考察照生产企业处方配制空白阴性溶液，按“2.1”项下的色谱条件,注入液相色谱仪测定，结果显示，辅料对样品测定无干扰。色谱图见图1。

图1　样品HPLC图 1.丁溴东莨菪碱；2.溴离子；3.托品酸；4.氢溴酸东莨菪碱

2.5线性关系精密量取“2.2.1”项下贮备液，用水定量稀释成2.38、4.77、7.16、9.54、14.31 μg·mL-1的溶液，按“2.1”项下的色谱条件,注入液相色谱仪测定,记录峰面积，以峰面积为纵坐标，溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程：Y=21.07X+0.368(r=1.000)，线性范围2.38～14.31 μg·mL-1。结果表明，托品酸在2.38～14.31 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好。

2.6精密度试验取“2.2.1”项下贮备溶液，按“2.1”项下的色谱条件，注入液相色谱仪，连续进样6次，RSD为0.2%。结果表明，仪器精密度良好。

2.7稳定性考察取“2.2.1”项下贮备溶液，分别于0、1、2、4、8 h，按“2.1”项下的色谱条件，注入液相色谱仪，峰面积的RSD为0.2%。结果表明，托品酸在8 h内稳定。

2.8耐用性试验取“2.2.2”项下供试品溶液，分别考察流速、柱温、流动相pH值有微小变化的条件下及不同液相色谱仪、不同型号色谱柱对方法的耐用性，结果表明，方法的耐用性良好。

2.9样品测定取丁溴东莨菪碱注射液，按“2.2.2”和“2.2.3”配制供试品溶液和对照溶液，依法测定，结果见表1。

表1　杂质托品酸测定结果

3讨论

3.1《中国药典》2010年版仅将氢溴酸东莨菪碱进行了控制，其余杂质均按未知杂质处理，未能真实反映样品中已知杂质的含量，新建立的方法使有关物质测定结果更接近于真实值。

3.2我们采用不同的色谱柱，测定托品酸的校正因子，不同色谱柱的校正因子在0.34～0.38之间，且不同色谱柱有一定的差异，因此有必要采用外标法对托品酸进行测定。

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