血清心型脂肪酸在急性缺血性脑血管病鉴别诊断中的应用

论著

血清心型脂肪酸在急性缺血性脑血管病鉴别诊断中的应用

朱晓娟张月娥赵炎李玉兰张会娣张国华

作者单位： 071000河北省保定市第一中心医院(朱晓娟、张月娥、赵炎、李玉兰、张会娣)；河北医科大学第二医院(张国华)

E-mail:whxzlxw@163.com

【摘要】目的通过观察H-FABP在急性脑梗死患者、短暂性脑缺血发作(TIA)患者和健康人群血清中血清心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein，H-FABP)含量及区别表达，为临床短暂性脑缺血发作和急性脑梗死的早期鉴别诊断做指导。方法随机选取门诊脑血管病住院患者130例，其中急性脑梗死(ACI)组80例，短暂脑缺血(TIA)组30例，正常对照组20例，所有实验对象于发病3、12及24 h抽取静脉血，健康组于门诊3、12及24 h抽取静脉血，使用ELISE法检测血清中H-FADP的含量。结果在脑梗死后3 h血浆H-FABP浓度开始升高，急性脑梗死后12 h血浆H-FABP浓度达高峰，急性脑梗死后24 h血浆H-FABP浓度显著降低，在3个时间点ACI组与TIA组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)，正常对照组与ACI比较差异有统计学意义(P<0.05)，正常对照组与TIA组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。梗死面积越大，其血清H-ABP浓度越高，且持续时间长。ACI组H-FABP的敏感性为66.2%(53/80),TIA组H-FABP的敏感性为6.7%,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清H-FABP可能成为早期评估TIA及急性脑梗死诊断及鉴别诊断的有效血清学标记物。

【关键词】心型脂肪酸结合蛋白；急性脑梗死；短暂性脑缺血发作

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2015.20.021

通讯作者:张月娥，071000河北省保定市第一中心医院;

【中图分类号】R 743

收稿日期：(2015-04-07)

短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)与急性脑梗死是临床常见的急性缺血性脑血管病变。当脑组织缺乏充足的血液灌注,发生循环障碍，脑组织出现缺血、缺氧、坏死,血脑屏障被破坏，导致脑细胞内的一些生物化学因子及小分子蛋白外渗到体液及血液中，从而启动一系列病理生理学机制加剧了疾病的发生发展过程。脂肪酸结合蛋白(FABP)存在于人体不同的组织和器官中,近年来,人们越来越多的关注和研究心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死诊断中的应用[1,2]。许多研究发现在脑组织中H-FABP有一定数量的表达。细胞缺血缺氧损伤后能引起H-FABP的渗漏,使其血清的浓度显著高于正常。本研究拟通过采用ELISA法对缺血性脑血管患者的血清中H-FABP的表达及含量进行检测。使用统计学软件对其在TIA和急性脑梗死患者血清中的浓度进行比较，从而在临床上指导短暂性脑缺血发作和急性脑梗死的早期诊断。

1资料与方法

1.1一般资料选取2010年12月至2011年11月河北医科大学第二医院神经内科住院治疗及门诊就诊的急性脑梗死、TIA患者以及健康查体者共130例，其中急性脑梗死为80例，TIA为30例,20例健康人作为正常对照组。40岁≤年龄<85岁。见表 1。

表1　一般资料

1.2纳入标准(1)男性或女性，40岁≤年龄<85岁的急性缺血性脑卒中(发病≤3 h)及短暂性脑缺血发作(发病≤3 h)患者。(2)与1995年第四届全国脑血管病学术会议制定的《脑血管病诊断标准》中的脑梗死诊断要点相符合，并且被头颅CT、MRI检查证实为脑梗死。(3)符合美国心脏学会(AHA)/美国脑卒中协会(ASA)2009年在新的指南中，对TIA的临床定义。(4)正常对照组为同期来我院门诊的健康体检者20例。40岁≤年龄<85岁。

1.3排除标准(1)不符合以上入组标准组。(2)脑栓塞及血液系统、自身免疫性疾病导致的脑梗死患者。(3)重度炎性反应性疾病继发感染，伴有其他主要器官功能衰竭的患者，接受类固醇激素、免疫抑制剂或其他抗炎症性药物治疗的患者。(4)所有患者均排除肿瘤、肝脏病变，近期无重大外伤、手术史。

1.4方法所有试验对象均进行头颅CT及血管彩超，或头MRI、MRA、DWI、血糖、血脂、CRP、心电图等相关检查。

1.4.1标本采集与处理：急性脑梗死组、TIA组分别于发病3、12、24 h采集肘静脉血5 ml(正常对照组在门诊同样时间抽血)，分别留置于EDTA抗凝管中，混合10～20 min，于标本采集完成后30 min内在2～8℃的条件下离心15 min(2 500 r/min)，离心结束后抽取上清液，置于Ep管中。

1.4.2检测方法:Elecsys2010全自动电化学发光分析仪(Roche公司)，人H-FABP检测试剂盒(上海朗顿生物制剂有限公司)，采用双抗体夹心酶联免疫法，检测时间90 min。具体操作步骤详见说明。

2结果

2.13组血清中H-FABP浓度比较在脑梗死后3 h血浆H-FABP浓度开始升高，12 h达高峰，24 h有所降低：急性脑梗死组与TIA组之间比较，差异有统计学意义(P<0.05)；正常对照组与急性脑梗死组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而与TIA组比较差异无统计学意义(P>0.05)；本结果所选择病例均排除了患者再次发生脑梗死。见表2。

表23组血清中H-FABP浓度比较

组别3h12h24hTIA组(n=30)3.25±1.194.88±1.241.35±0.79正常对照组(n=20)1.68±0.551.43±0.242.16±1.19急性脑梗死组(n=80)12.60±4.77*#14.47±4.34*#11.14±3.86*#

注：与TIA组比较，*P<0.05；与正常对照组比较，#P<0.05

2.2不同梗死灶大小、时间与H-FABP浓度在发病3 h、12 h、24 h时,梗死面积越大，其血清H-ABP浓度越高，且持续时间长；12 h时各梗死组血清H-FABP浓度显著高于对照组(P<0.01)。见表3。

表3　不同梗死灶大小、时间与H-FABP浓度关系　 ±s

注：与正常对照组比较，*P<0.01

2.3TIA组与急性脑梗死组发病12小时H-FABP敏感性的检测以正常对照组均值的95%可信区间确定为正常,高于其上限即为增高。H-FABP的浓度上限为2.5296 ng/ml,据此TIA组H-FABP的敏感性为6.7%，急性脑梗死组H-FABP的敏感性为66.2%(53/80)，2组H-FABP的敏感性比较差异有统计学意义(P<0.01)。

3讨论

目前，缺血性脑血管病的诊断依赖于病史、体检、头颅CT、核磁共振成像。尤其是急性脑梗死治疗有明显的治疗时间窗,故早期诊断(尤指发病后 6～8 h内)非常之重要。目前急性脑梗死的诊断主要依据神经系统查体及影像学检查,但大多数患者的影像学改变出现较晚，甚至于病后10～ 24 h才能显示病灶。因此，多年来许多学者一直致力于寻找高敏感性及强特异性的新型血清生化标志物。H-FABP作为可简单快速测定的血清学指标，最初是由Ockner等学者在研究脂肪酸肠吸收时发现的，在体内的主要作用是通过与脂肪酸的结合，进而来调节脂肪酸在细胞内的代谢。H-FABP主要存在于心肌细胞的胞质中，为心肌的收缩来提供能量[3]。William等[4]研究，H-FABP在脑细胞受损后2～3 h内开始释放入血,6～8 h 达高峰,24 h 降为正常。国外Wunderlich等[5]研究发现H-FABP的浓度在脑梗死早期也相应升高,并指出血浆H-FABP含量在脑缺血的早期评估,揭示其严重程度等方面具有重要的临床实用价值,可作为急性脑梗死早期诊断生物学指标。在本实验中，我们对TIA及脑梗死患者发病的3、12、24 h 3个时间段的血清H-FABP进行测定，发现它在发病后3 h内开始释放入血,12 h达高峰,24 h 开始下降，与上述研究的实验结果基本一致。因此，我们可以认为，H-FABP对于缺血性脑血管病早期诊断有特异性。

H-FABP在不同程度的脑梗死患者中，其浓度不同，梗死程度越重，其值越高[6]。孙杨等[7]选择 65例 ACI患者,急性脑梗死组入院24 h、第 7天的血清 H-FABP均明显高于对照组 (P<0.01);此时间点大梗死灶、中梗死灶、小梗死灶3组间的血清 H-FABP差异有统计学意义(P均<0.01)。结果显示脑梗死病灶大小与血清 H -FABP水平有密切关系,且与CI程度和预后有关。出血早期血清H-ABP水平越低其神经功能恢复越好，临床预后越好。本试验中，我们发现，在发病3 h、12 h、24 h时,梗死面积越大，其血清H-ABP浓度越高，在发病12 h的大梗死灶，其血浆H-FABP浓度为(18.45±4.41)，且持续时间长；且12 h时各梗死组血清H-FABP浓度显著高于对照组(P<0.01)，与上述研究结果近似，可能与大面积梗死时的细胞损伤数量有关，故我们推测其可以作为脑梗死早期判断脑损伤面积较为合适的、且价值的检测指标。

目前，血清S-100β蛋白用来作为判断急梗死神经功能缺损程度的有效血清学指标[8]，而Pelsers等[9]在研究微小的脑损伤时，通过实验得出H-FABP和B-FABP比目前使用的脑损伤标志物S100蛋白B(S100B) 具有更高的敏感性。国内张黎军等[10]研究对100例急性脑梗死患者在发病后1 d、7 d、14 d，进行血清B-FABP动态检测,发现在病程早期均有不同程度增高,尤以发病后24 h内增高最明显(P<0.01)，其中早期异常灵敏性达68%。在本试验中，我们对80例脑梗死患者血清H-FABP浓度检测，其24 h时的敏感性达到了66.2%，结果与之前试验研究近似，微差别可能是由于取样时间差异所致。本结果推测血浆H-FABP含量在脑缺血的早期评估,在脑梗死早期诊断中有重要意义，可作为急性脑梗死早期诊断的生物学指标，同时，还可用来鉴别诊断脑梗死与TIA。

虽然，在本试验中，我们检测到H-FABP是灵敏性较高的缺血测定指标，在脑梗死早期即可测定，可作为脑梗死的早期诊断，并推测其可有效改善患者预后、减少病死率和致残率，其敏感性、特异性均明显优于影像学。但由于H-FABP其在人体组织中分布较为广泛，如当脑梗死患者同时合并心脏疾病时，其敏感性及特异性均较差，所以，在作为评价H-FABP的临床应用价值时，我们不仅考虑它的来源和释放时间，还要考虑患者在合并心脏及肾脏等其他疾病时，综合考虑患者的一般情况后，对疾病作出诊断及鉴别诊断。

参考文献

1Seino Y,Ogata K,Takano T,et al.Use of a whole blood rap id panel test for heart-type fatty acid-binding protein in patients with acute chest pain:comparison with rapid troponinT and myoglobin tests.Am J Med,2003,115:185-190.

2Chan CP,Sander son JE,Glatz JF,et al.A superior early myocardial- infarction marker-human heart-type fatty acid-binding protein.Z Kardlol,2004,93:388-397.

3董瑨堃,孟舒.血清H-FABP浓度心肌型脂肪酸结合蛋白——组织损伤的新型标志物.医学综述,2012,18:659-662.

4William W,Mei-Chiun T.PhD Blood Biomarkers in the Diagnosis of Ischemic Stroke.Stroke,2008,39:2902-2909.

5Wunderlich MT,Hanhoff T,Goertler M,et al.Releaseof brain-type andheart-typefattyacid-bindingproteins inserumafteracuteis-chaemic stroke.J Neurol,2005,252:718-724.

6邱谷,戴世荣,王兴山.无症状脑梗死患者血清心型脂肪酸结合蛋白及高半胱氨酸水平的调查.临床检验杂志,2011,29:632.

7孙杨,孔岳南.心型脂肪酸结合蛋白在急性脑梗死早期诊断中的临床价值.山东医药,2010,50:63-64.

8胡仁琳，李鸣,张弦.参芎葡萄糖注射液联合依达拉奉对脑梗死患者血清HMGB1、ENA-78和S100β蛋白水平的影响.河北医药,2014,36:828-831.

9Pelsers MM,Hanhoff T,Vander Voort D,et al.Brain-and heart-type fatty acid-binding proteins inthebrain:tissue distributionand clinical utility.Clin Chem,2004,50:1568-1575.

10张黎军,邱晨红,王锋,等.脑型脂肪酸结合蛋白在急性脑梗死检测方面的临床意义.卒中与神经疾病,2011,18:215-218.