急性冠脉综合征患者循环miR 142 5p表达水平的临床意义

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(本文编辑郭怀印)

急性冠脉综合征患者循环miR142 5p表达水平的临床意义

徐测梁,林 彬,王齐国,安 娜

摘要:目的 探讨miRNA 142 5p在急性冠脉综合征(ACS)患者中的表达水平和临床意义。方法 收集2014年6月—2015 年2月就诊的ACS患者、冠心病平稳患者和正常对照组人群,检测miRNA 142 5p、超敏C反应蛋白(hs CRP)、肌钙蛋白I(cTnI)的表达量,分析各组miRNA 142 5p的表达量以及与cTnI、hs CRP的相关性。结果 ACS组miRNA 142 5p表达量最高,较对照组显著性升高(P<0.01),冠心病稳定组表达量正常对照组有明显升高(P<0.01),ACS组与冠心病稳定组之间差异无统计学意义(P>0.05)。ACS组患者中miR 142 5p与cTnI呈正相关(P<0.05),冠心病稳定组未发现两者有相关性(P>0.05);在ACS组中和冠心病稳定组中,miR 142 5p与hs CRP均呈正相关(P<0.05)。结论miR 142 5p在ACS患者中表达升高,且与心肌的炎症反应和心肌损伤相关,提示miR 142 5p可能对诊断ACS有一定的临床价值。

关键词:急性冠脉综合征;miR 142 5p;超敏C反应蛋白;肌钙蛋白I

收稿日期:(2015 04 24)

中图分类号:R541.4 R256.2

文献标识码:B

doi:10.3969/j.issn.1672-1349.2015.12.024

文章编号:1672-1349(2015)12-1421-03

作者单位:新疆医科大学附属中医医院(乌鲁木齐830000),E mail: 1874945265@qq.com

急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)是常见的心脏急症,虽然随着介入和药物的规范化治疗,其死亡率有所下降,但目前仍是心血管疾病的主要死因。ACS的病理基础为冠状动脉粥样硬化伴不稳定斑块破裂所导致的急性血栓形成,冠状动脉血流减少和心肌缺血、坏死。微小RNA(miRNA)是一种内源性单链小分子RNA,通过作用于mRNA的3’非编码区调节基因转录后水平的表达,在冠心病、心力衰竭等疾病的发生、发展中也扮演着重要的角色[1]。循环血液中,miRNA与其他蛋白质结合形成有膜包裹,如胞外体、微囊泡等,有效避免被快速降解,可作为心血管疾病或其他疾病的标志物[1,2]。miRNA 142 5p最早发现与免疫和肿瘤相关,国内外的相关研究也发现冠心病患者循环中miRNA 142 5p 的含量也明显升高,提示其可能在动脉硬化和斑块形成、破裂中起着重要作用[2 4]。本研究通过分析ACS患者循环miRNA 142 5p的表达水平及其与超敏C反应蛋白(hs CRP)、肌钙蛋白I(cTnI)的关系,探讨miRNA 142 5p在ACS中的临床意义。

1　资料与方法

1.1 研究对象 纳入对象为2014年6月—2015年2月在新疆医科大学附属中医医院就诊的ACS患者、冠心病平稳的患者和门诊健康体检者,所有入选对象均签署知情同意书。ACS诊断标准参照2011《ACC/ AHA不稳定型心绞痛/非ST段抬高心肌梗死指南》;冠心病稳定组患者既往有明确的冠心病病史,且近6个月内病情平稳,无胸痛或其他心血管事件发生;正常对照组入组标准为心电图、胸片、心脏超声无异常,血生化及肝肾功能无明显异常,无心脏病、高血压、糖尿病等慢性病史。排除标准:严重感染、严重肝肾功能不全、恶性肿瘤、自身免疫性疾病、中重度贫血、其他重大疾病和精神心理疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 实时荧光定量PCR检测miRNA 142 5p 按照试剂盒说明提取总RNA,紫外分光光度计法测定RNA浓度,-20℃保存备用。检测时取2μg总RNA逆转为cDNA,以合成的cDNA为模板链进行PCR扩增,同时扩增U6为内参。反应体系置入ABI 7500荧光定量PCR仪中进行qRT PCR ,内参使用U 6 , miRNA 142 5p扩增后Ct值以U6为标准进行标准化。扩增目的基因的引物Hsamir1425p–CAUAAAGUAGAAAGCACUACU。

1.2.2 血清cTnI、hs CRP的检测 cTnI采用电化学发光法,hs CRP采用免疫比油法检验,试剂盒由Roche公司提供。

1.3 统计学处理 采用统计学软件Graphpad Prism 5.0进行相关统计学分析,两个组间比较用t检验,相关性分析则用Pearson相关分析,P <0.05为差异有统计学意义。

2　结 果

2.1 两组一般情况 急性冠脉综合征组患者共18 例,男10例,女8例,年龄62.2岁±13.3岁;冠心病稳定组16例,男9例,女7例,年龄60.1岁±11.2岁;正常对照组16名,男9名,女7名,年龄59.9岁±10.7岁。各组患者年龄及性别差异无统计学意义(P> 0.05)。

2.2 各组间miRNA 142 5p相对表达量比较ACS 组miRNA 142 5p表达量最高,较对照组显著性升高(P<0.01);冠心病稳定组比较与正常对照组比较表达量差异有统计学意义(P <0.01),ACS组与冠心病稳定组差异无统计学意义(P>0.05)。详见图1。

图1　各组间miR　142 5p相对表达量的比较

2.3 ACS组和冠心病稳定组外周血miRNA 142 5P与cTnI、hs CRP相关性分析 ACS组患者cTnI、hs CRP较冠心病稳定组升高,将miRNA 142 5p与cTnI、hs CRP分别进行Pearson相关分析,在ACS组中,miRNA142 142 5p与cTnI呈正相关(P<0.05),在冠心病稳定组未发现两者有相关性(P>0.05);在ACS组和冠心病稳定组中,miRNA 142 5p与hs CRP均呈正相关(P<0.05)。详见图2、图3。

图2　外周血miR 142 5P与hs CRP相关性分析

图3　外周血miR 142 5P与cTnl相关性分析

3　讨 论

ACS主要病理是动脉粥样硬化基础上易损斑块的破裂、糜烂,血小板的激活、黏附和聚集,继而血栓形成,或伴有血管痉挛,导致心肌缺血缺氧;动脉粥样硬化同时又是一个慢性炎症的过程,动物和人类的实验研究表明,内皮功能紊乱、脂质及斑块形成和心肌缺血及坏死均有炎症反应的参与[5,6]。miRNA是机体新陈代谢等各种生物学活动过程中必不可少的重要物质,与疾病的发生、发展密切相关,参与了血管形成、细胞凋亡、癌症基因的表达;临床研究也发现microRNA与动脉粥样硬化、血栓形成、心力衰竭有关,同时也证实microRNA参与体内的炎症反应[7]。miRNA可以在循环血液中稳定存在,甚至可以在体外酸性或碱性环境及反复冻融的情况下仍然可以稳定而不被降解,可作为恶性肿瘤、炎症和心血管疾病等多种疾病的生物学标志物[8]。文献报道miRNA 142 5p在冠心病患者中表达水平上升,动物实验发现miRNA 142 5p在