香蕉皮多酚与辛伐他汀对高脂血症大鼠血脂水平的影响

香蕉皮多酚与辛伐他汀对高脂血症大鼠血脂水平的影响

朱开梅赵文鹏赵磊骆彩珍顾生玖

(桂林医学院药学院，广西桂林541004)

摘要〔〕目的以高脂血症大鼠为模型比较香蕉皮多酚、辛伐他汀降血脂及抗氧化作用。方法雄性SD大鼠灌胃给予高脂饲料制备高脂血症大鼠模型。造模的同时,给予香蕉皮多酚、辛伐他汀,连续给药40 d后测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果当香蕉皮多酚浓度低于60 mg/kg，辛伐他汀降低血清中的TC、TG的能力、抗氧化能力显著优于香蕉皮多酚组(P<0.05)，当香蕉皮多酚浓度达到120 mg/kg，香蕉皮多酚降低血清中的TC的能力显著优于辛伐他汀组，抗氧化能力显著优于辛伐他汀(P< 0.05)。结论香蕉皮多酚对高脂血症模型大鼠具有降低血脂及抗氧化的双重作用。

关键词〔〕香蕉皮多酚；辛伐他汀；高脂血症；抗氧化

中图分类号〔〕R969〔文献标识码〕A〔

基金项目：广西科技特派员专项(129825-21)；广西教育厅项目(201202ZD065)；桂林市科技攻关项目(20110106-5；20120105-5;20120105-16;20120105-8)

通讯作者：顾生玖(1965-), 男，博士，教授，硕士生导师，主要从事心血管病理学及药物防治研究。

第一作者：朱开梅(1967-)，女，硕士，教授，硕士生导师，主要从事天然药物分析的研究。

高脂血症可导致动脉粥样硬化(AS)，继而引发冠心病、脑卒中、心肌梗死等病症，是危害人类健康的头号杀手。从植物中寻找具有降血脂作用的天然化合物，并研究其作用机制对于防治高脂血症具有重要意义〔1～3〕。目前公认的最有效降血脂药物为辛伐他汀，因具有对肝脏和肌肉的毒副作用限制了它的应用。研究表明，植物多酚具有抗肿瘤、抗氧化、抗AS、防治冠心病与脑卒中等心脑血管疾病以及抗菌等多种生理功能〔4，5〕，可提高机体内红细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性，降低血清中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的水平，并可降低总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量，促进高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的生成，减少脂质在血管内膜的沉积，增加自由基清除及机体抗氧化能力，继而抑制血管内膜的增生及斑块的形成，发挥抗AS的作用。香蕉皮多酚作为一种植物多酚，可能在调节血脂方面具有重要作用，但香蕉皮多酚是否能降低心血管病发病风险国内外研究较少。本研究通过采用高脂饲料法建立大鼠高脂血症模型,探讨香蕉皮多酚对高脂血症的影响及其机制。

1材料与方法

1.1实验动物选用桂林医学院实验动物中心提供的健康SPF级雄性SD大鼠60只，体重(190±20)g，实验动物生产许可证号：SCXK桂2007-0001。实验环境温度(22±2)℃，相对湿度(50±10)%。

1.2高脂饲料配方3%胆固醇，10%猪油，0.2%丙基硫氧嘧，0.5%胆酸钠，3.3%白糖，83%基础饲料。由桂林医学院实验动物中心制备。

1.3药品与试剂香蕉皮多酚由本实验室从香蕉皮中提取〔6〕。TG试剂盒(批号650340-01)，TC试剂盒(批号645487-01)，HDL-C试剂盒(批号648783-01)，均由上海罗氏诊断产品有限公司提供； LDL-C试剂盒(批号11-09089)，由北京九强生物技术股份有限公司提供，辛伐他汀片(批号20120319)，由广东彼迪药业有限公司提供， SOD测试盒(批号200011916)、T-AOC(批号200011420)、MDA测试盒(批号20011703),均为南京建成生物工程研究所提供；丙硫氧嘧啶(批号100901)，由南通精华制药股份有限公司生产。

1.4仪器Cobas501全自动生化分析仪(上海罗氏诊断产品有限公司)；BT423S型电子天平(Sartorius AG,德国赛多利斯股份公司)；LegendRT-Plus型台式离心机(美国Thermo Fisher Sorvall)。

1.5方法

1.5.1动物分组与给药SD大鼠先适应性饲养1 w，随机分为6组,每组10只，正常对照组、模型组、辛伐他汀组、香蕉皮多酚低剂量组，香蕉皮多酚中剂量组、香蕉皮多酚高剂量组。正常对照组喂食普通饲料，其余5组每天给予高脂饲料造模，造模的同时给药干预。给药剂量分别为辛伐他汀组10 mg/kg，低、中高剂量香蕉皮多酚组给予高脂饲料，并灌胃给予香蕉皮多酚(30,60,120 mg/kg)，每天给药1次，灌胃前后1 h禁食禁水，连续给药40 d。

1.5.2血液和组织样本的采集末次给药和给予高脂饲料后，所有大鼠禁食不禁水过夜，然后眼眶静脉取血立即离心分离10 min(3 000 r/min)，取血清，用酶比色法测定相关指标。将麻醉后的大鼠仰卧固定于固定板上，沿大鼠腹部中部剖开，小心分离主动脉弓、胸、腹主动脉，冷生理盐水冲洗，然后将与心脏连接的升主动脉、主动脉弓(包括主动脉弓三大主要分支近段)及降主动脉段、腹主动脉段立即放入10%的中性甲醛溶液中固定。

1.5.3血清TC、TG 、HDL-C的测定TG检测：GPO-PAP法；TC检测：COD-CE-PAP法；HDL-C检测：PTA-Mg2+沉淀法，按试剂盒操作说明测定，试剂盒为中生北控生物科技股份有限公司生产。

1.5.4动脉血管组织病理学观察将动脉血管组织取出，流水冲洗24 h。然后按常规方法进行70%～100%梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、切片(切片厚度5 μm)、贴片、烤片后，用二甲苯脱蜡、100%～70% 梯度酒精复水、苏木精染色、70%盐酸酒精分色、伊红复染后，70%～100%梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片，最后镜检动脉血管组织结构病变。

1.6统计学方法采用SPSS18.0软件进行单因素方差分析。

2结果

2.1香蕉皮多酚、辛伐他汀对大鼠血脂影响与正常对照组比较,模型组大鼠血清中T G、TC 及LDL-C含量显著升高(P< 0.05),而HDL-C 含量显著降低(P< 0.05),说明大鼠高脂血症模型造模成功。与模型组比较,香蕉皮多酚组、辛伐他汀组TG、TC 及LDL-C 含量显著降低(P<0.05),而HDL-C含量显著升高(P<0.05)。香蕉皮多酚组与辛伐他汀组比,香蕉皮多酚组能显著降低血清中TG 、TC、LDL-C 含量(P<0.05);而HDL-C含量显著升高(P<0.05)。见表1。

组别TG(mmol/L)TC(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)SOD(U/ml)T-AOC(U/ml)MDA(mmol/ml)正常对照组0.56±0.132.09±0.201.16±0.221.74±0.18188.94±7.8711.29±0.6822.89±0.76模型组1.14±0.211)3.06±0.241)0.89±0.111)2.97±0.121)150.09±11.521)7.40±0.711)31.61±2.251)辛伐他汀组0.79±0.101)2)2.56±0.231)2)1.06±0.131.97±0.171)2)180.36±6.821)2)8.80±0.801)2)24.96±0.501)2)香蕉皮多酚低剂量组0.98±0.151)2)2.90±0.251)0.92±0.141)2.45±0.361)2)168.87±6.781)2)7.93±0.651)27.58±0.771)2)香蕉皮多酚中剂量组0.81±0.131)2)2.62±0.261)2)1.07±0.172)1.95±0.201)2)169.44±3.511)2)9.47±0.871)2)24.88±0.471)2)香蕉皮多酚高剂量组0.61±0.172)2.15±0.222)1.37±0.331)2)1.44±0.241)2)196.98±11.161)2)12.11±0.861)2)20.00±0.881)2)

与正常对照组比较：1)P<0.05；与模型组比较：2)P<0.05

2.2大鼠动脉血管壁HE染色光镜观察结果见图1，正常对照组大鼠动脉血管壁结构清晰，内壁光滑，厚度适中，内皮细胞及平滑肌细胞排列规则，轮廓清晰，未见病理改变；模型组大鼠动脉血管内膜局部增厚不连续，有皱褶，部分可见脱落，中层平滑肌细胞增生，排列紊乱，形态多样，并可见泡沫细胞形成；与模型组相比，低、中剂量香蕉皮多酚组大鼠动脉血管壁病变较轻，可见脂质沉积，内膜稍增厚，平滑肌增生，高剂量香蕉皮多酚组大鼠动脉血管壁已基本正常，平滑肌细胞轻度增生，排列较为整齐，未见泡沫细胞形成与内皮损伤。

2.3香蕉皮多酚、辛伐他汀对大鼠抗氧化能力的影响与正常对照组比较，模型组大鼠血清中MDA 含量显著升高(P< 0.05)，血清SOD 、T-AOC活性显著降低(P< 0.05);与模型组比较，香蕉皮多酚各剂量组的SOD 与模型组呈显著差异(P<0.05)；香蕉皮多酚各剂量组与正常对照组之间也存在显著差异(P<0.05)，说明香蕉皮多酚可以有效提高SOD的活性，并且随着香蕉皮多酚剂量的增加SOD 酶活力、T-AOC活性呈上升趋势，并且剂量越高，效果越好。香蕉皮多酚各剂量组与模型组之间也存在显著差异(P<0.05)，随着香蕉皮多酚剂量的增加，MDA含量呈下降趋势，说明香蕉皮多酚各剂量组可以有效降低大鼠血清中MDA 的含量，并且剂量越高，效果越好。与模型组相比，辛伐他汀组亦能显著地降低大鼠血清中MDA含量，升高血清中SOD 、T-AOC活性。各香蕉皮多酚组两两比较，除外低、中剂量组SOD值无差异(P>0.05)，余者差异均显著(P<0.05)。见表1。

正常对照组(×400)

模型组(×200)

辛伐他汀组(×200)

香蕉皮多酚低剂量组(×200)

香蕉皮多酚中剂量组(×400)

香蕉皮多酚高剂量组(×200)

图1香蕉皮多酚对大鼠动脉血管壁组织病变的影响(HE)3讨论

植物多酚是多羟基酚类化合物的总称，主要存在于植物体的皮、根、叶、壳和果肉中。大量的流行病学研究表明，植物多酚具有多种生理功能，如抗氧化以、抗菌消炎、抗肿瘤、调节血脂、抗AS等方面的作用〔7〕，其中石榴皮多酚〔8〕、葡萄籽多酚〔9〕、茶多酚〔10〕等均可改善脂质代谢紊乱，提高机体内SOD的活性，降低血清中TC、TG、LDL-C含量，促进HDL-C的生成。王振宇等〔11〕从苹果多酚调节脂肪代谢的角度研究其减肥降脂预防AS发生的功能及可能的机制。结果表明：苹果多酚可以降低血清TC、TG 和LDL-C含量，提高HDL-C的含量，具有降血脂预防AS发生的功能，苹果多酚还可以提高机体SOD 活性，降低MDA 的含量。

高脂血症是AS发生的主要危险因素，也是诱发心脑血管疾病的重要因素，血清中TC、TG 和LDL-C 含量升高，HDL-C 含量降低，可导致动脉内膜损伤，通透性增高，加速脂质在血管内皮下沉积，而血脂升高时，氧自由基大量产生，脂质过氧化作用增强，产生大量的MDA，使SOD 活性降低，促进AS的发生和发展〔1〕。辛伐他汀为新型调血脂药，目前在临床上广泛用于高脂血症、冠心病等的治疗〔12〕，香蕉皮的降血脂只见本实验室前期报道〔6〕，但辛伐他汀与香蕉皮多酚降血脂及抗氧化能力的比较研究鲜见报道。说明当香蕉皮多酚的浓度达到一定剂量时，香蕉皮多酚具有良好的降血脂和抗氧化的能力。

综上所述，香蕉皮多酚可能通过提高机体内抗氧化酶SOD的活性，来降低血清TC、TG、LDL-C 的含量，促进HDL-C的生成，减少脂质在血管内膜的沉积，增加自由基清除及增加机体抗氧化能力，通过调节脂肪代谢，在防治高脂血症及动脉硬化的发生，具有良好的应用前景。香蕉皮多酚是从常见可食水果香蕉皮中提取出来的，安全、无毒，所以其有望成为一种新型广泛使用的调血脂，预防AS的保健食品。

4参考文献

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〔2013-06-15修回〕

(编辑赵慧玲)