人参皂苷抗小鼠皮肤衰老的实验研究与分析

吴纪凯

(苏州卫生职业技术学院，江苏 苏州　215009)

人参皂苷抗小鼠皮肤衰老的实验研究与分析

吴纪凯

(苏州卫生职业技术学院，江苏 苏州215009)

摘要：目的研究人参皂苷对小鼠皮肤衰老的抑制作用。方法选择60只雌性医学实验用小鼠，随机分为正常组、衰老组和人参皂苷组(n=20)，以对比实验的方法，收集相关的数据，比较人参皂苷在抑制小鼠皮肤衰老中的效果。结果人参皂苷组小鼠较衰老组而言，SOD、皮肤羟脯氨酸、CAT和GSH-Px含量显著上升，MDA含量显著降低，差异具有显著性(P<0.05)。结论人参皂苷对小鼠皮肤衰老有显著的抑制作用。

关键词：人参皂苷；小鼠皮肤衰老；抑制作用

人参皂苷含有RH2、RG、RB、RC等多种化学成分，其中，内含的RG1物质具有延缓衰老的作用，被认为是延缓皮肤衰老，抗氧化的天然极品。本文以医用小鼠为对象，采用对比实验法，观察人参皂苷在抑制小鼠皮肤衰老中所起到的作用。现将相关的实验过程和结果报道如下。

1材料和方法

1.1实验动物、仪器与试剂雌性医学小鼠60只，平均年龄为3月，平均体重为25g。主要实验仪器为：FA1004型电子分析天平、HH-420型三用恒温数显控温水浴箱(、DHG-9075A型电热恒温鼓风干燥箱、内切式组织匀浆机。主要实验试剂为：人参皂甙、D-半乳糖、硫代巴比妥酸、L-羟脯氨酸、盐酸苄胺、四乙二氧基丙烷、5,5-二硫二硝基苯甲酸、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)(上海基免实业有限公司)试剂盒、考马斯亮蓝G250、超氧化物歧化酶试剂盒(上海博升生物科技有限公司)。

1.2实验方法

1.2.1动物分组及样本培植将60只小鼠随机分为3组：正常组、衰老组和人参皂苷组(n=20)。正常组小鼠每日颈背部皮下注射等容积灭菌生理盐水，衰老组小鼠注射12.5%D-半乳糖(1000 mg/kg-1)并每日灌胃等容积灭菌生理盐水，人参皂苷组小鼠在注射12.5%D-半乳糖(1000 mg/kg-1)的基础上，每日增加灌胃人参皂苷(100 mg/kg·d-1)。上述实验过程持续45天，以实现样本培植。

1.2.2样本取材方案45天后，采用颈椎猝死法处理所有小鼠，并对小鼠血液中的CAT、SOD等指标进行测定。此外，取每只小鼠背部脱毛后皮肤组织0.6 g左右，利用内切式组织匀浆机制作成10%皮肤组织匀浆，用于测定小鼠的皮肤羟脯氨酸含量。

1.3数据测定

1.3.1全血GSH-Px、CAT活力数据测定参照上海基免实业有限公司CAT、GSH-Px试剂盒说明书方法测定CAT、GSH-Px活力。

1.3.2皮肤匀浆MDA、SOD及CAT活力数据测定参照上海博升生物科技有限公司试剂盒使用说明方法测定SOD数据，硫代巴比妥酸[TBA]法测定MDA数据，CAT活力数据则参照上海基免实业有限公司试剂盒使用方法测定。

1.3.3皮肤羟脯氨酸含量数据测定首先，取小鼠背部皮肤脱毛并除去结缔组织后，进行脱脂，采用DHG-9075A型电热恒温鼓风干燥箱进行80度烘干，精密称重50 mg，滴入6 mol/L HCl 2 ml，放入烤箱中进行水解(24 h)。其次，取水解液0.5 ml将其PH值调节至6~8之间，定容15ml。再次，取0.2ml水解液，依次加入缓冲液1 ml,氯胺T 1ml,高氯酸1 ml,显色剂1 ml,混匀,以60度恒温进行水浴。最后，15-20min后，以550nm波长1cm光径比色，空白调零，并配置标准曲线管。

1.4数据处理采用SPSS软件对测定数据进行处理，P<0.05，差异具有统计学意义。

2结果

小鼠全血中GSH-Px、CAT活力数据、皮肤匀浆MDA、SOD及CAT活力数据以及皮肤羟脯氨酸含量数据如下表所示：

表1　实验数据统计表(P<0.05)

由表1可知，衰老组小鼠的GSH-Px、CAT、SOD和羟脯氨酸含量较正常组小鼠而言，呈现显著降低态势。以GSH-Px为例，从17.1±5.7 U/(mg.Hb)降低为9.2±5.7 U/(mg.Hb)。此外，人参皂苷组小鼠的GSH-Px、CAT、SOD和羟脯氨酸含量较衰老组小鼠而言，明显上升，以GSH-Px为例，从9.2±5.7 U/(mg.Hb)上升为14.5±2.7 U/(mg.Hb)、而羟脯氨酸含量则由0.56±0.12 mg/g上升为0.78±0.13 mg/g，而MDA含量则显著降低。

3讨论

羟脯氨酸是皮肤胶原蛋白中的重要组成成分，GSH-PX是衡量集体抗过氧化能力的指标之一，其含量下降对抑制衰老有着重要意义。CAT是过氧化物酶体的标志酶，约占过氧化物酶体总量的40%，其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机理，其含量上升对抑制皮肤衰老有积极效果。其含量下降对抑制皮肤细胞衰老有着重要价值。SOD能够消除生物体在新陈代谢中产生的有害物质，医学研究已证实，其含量上升对延缓衰老有着重要作用。上述指标可作为本实验中验证小鼠衰老程度的参照指标。

D-半乳糖能够使小鼠皮肤呈现快速衰老的趋势，本实验中，通过对注射D-半乳糖小鼠GSH-Px、CAT等指标的检验，证实了这一结论。而通过对比衰老组和人参皂苷组小鼠的检验指标发现，注射人参皂苷小鼠的GSH-Px、羟脯氨酸、CAT和SOD呈现明显上升态势，而MDA则出现了显著下降，因此，可以判定：人参皂苷对于延缓和改善小鼠皮肤衰老有着积极的作用。

参考文献：

[1]石楸鸣. 人参皂苷的药理作用研究进展[J]. 中国药房. 2010，31：124-126.

[2]崔巍,赵洪艳,王燕嬉. 人参皂甙抗衰老的研究进展[J]. 中国老年学杂志. 2006，11：1042-1044.

中图分类号：R927.1

文献标识码：B

文章编号：1004-7115(2015)04-0424-02

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2015.04.022

(收稿日期2015-1-19)