接头蛋白Gab2在胃腺癌中的表达及临床意义

李艳东，刘 冰，郭发钢，吴文换(西安医学院第一附属医院病理科，西安 70077;西安医学院临床医学系)

Gab2是一个脚手架/接头蛋白，是接头蛋白Gab(growth factor receptor-bound protein2(Grb2)-associated binder)家族中的重要成员。研究发现，Gab2的表达及活化异常可能导致疾病的发生，尤其是恶性肿瘤。Gab2具有潜在的原癌基因特性，与肿瘤的发生有关，在人类乳腺癌［1－3］、卵巢癌［4］、和急性髓细胞性白血病(acute myeloid leukemia，AML)/骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)［5］等肿瘤中过表达。胃癌中Gab2的研究报道甚少，我们对Gab2在胃腺癌中的表达及其与临床病理因素的关系进行了研究。

1 材料与方法

1．1 材料

收集本院2010－06～2012－06经手术病理检查的存蜡块标本，其中正常胃黏膜组织标本20例，胃腺癌组织标本65例。羊抗人Gab2抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1．2 免疫组织化学染色

取常规固定、包埋的组织块标本，作连续切片，进行免疫组织化学检测。免疫组化采用PV6000两步法，DAB显色，苏木素复染，操作严格按照说明书进行。用已知阳性切片做阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照。

1．3 结果判断

Gab2阳性染色为细胞浆出现棕黄色颗粒，观察10个高倍视野，计算阳性细胞数:阴性为0分，阳性细胞数＜10%为1分，阳性细胞数10%－50%之间为2分，阳性细胞数50%－80%为3分，阳性细胞数＞80%为4分;染色强度按着色程度分为:无着色为0分，黄色为弱阳性为1分，浅棕色为2分，棕褐色为3分，总分为两项评分之和，取总分≥4分为阳性表达。

1．4 统计学方法

使用SPSS 13．0统计软件对数据进行统计学处理，采用χ2检验及Fisher确切概率法，以 P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 Gab2在胃腺癌中的表达

免疫组化结果显示，在正常胃黏膜中除了胃底腺细胞少量表达，其余腺体均不表达Gab2(见图1)，表达率为10．0%;Gab2表达在腺癌细胞胞质，65例胃腺癌中Gab2表达阳性为45例，阳性率为69．2%(见表1)。免疫组织化学染色显示Gab2在胃腺癌和正常胃黏膜中的表达有显著的差异(P ＜0．05)。

表1 胃腺癌和正常胃黏膜组织中Gab2的表达情况 例(%)Table 1 Expression of Gab2 in gastric adenocarcinoma and normal gastric epithelium cases(%)

图1 Gab2在胃腺癌组织及正常胃黏膜中免疫组织化学的表达Figure 1 Immunohistochemical expression of Gab2 in gastric adenocarcinoma and human normal gastric epithelium

2．2 胃腺癌中Gab2的表达与临床病理特征的关系

在胃腺癌中Gab2表达在不同性别、不同年龄、不同临床分期及是否淋巴结转移的患者中差异无统计学意义(均P＞0．05)，但在不同病理分化程度间差异有统计学意义(P＜0．05，见表2)。

表2 Gab2的表达与临床病理因素的关系Table 2 Relationship between Gab2 expression and clinico-pathologic characteristics in 65 patients with gastric adenocarcinoma

3 讨论

作为支架蛋白，Gab2在人体内广泛表达，Gab2蛋白在多种受体(如上皮细胞生长因子受体，血管内皮生长因子受体及B细胞/T细胞抗原受体等)下游的信号通讯网络中发挥重要作用。Gab2可被酪氨酸激酶磷酸化激活，接受胞外多种因子刺激，招募富含SH2结构域的信号转运分子，活化下游SHP2/Ras/ERK和PI3K/AKT等一系列信号转导途径，在细胞增殖、分化、凋亡及迁移等生理过程中发挥重要作用［6］。

Gab2作为被认识较晚的与肿瘤密切相关的基因，在乳腺癌中的研究最多，乳腺癌中，Gab2阴性的肿瘤细胞系呈现迁移能力的下降和Erk活化的减弱，提示它在促进乳腺癌转移的过程中发挥了重要作用［7］。临床研究显示，Gab2与乳腺肿瘤的恶性程度呈正相关性［3］。Gab2也过表达在转移性黑色素瘤中，而在黑色素痣和原发性黑色素瘤中低表达［8］。研究结果显示，Gab2在肺癌组织中的蛋白和基因表达与癌旁正常组织相比，明显过表达［9］。Gab2在乳腺癌、肺癌、结肠癌［10］等多种肿瘤中过表达，提示它可能是一个有潜在价值的肿瘤标志物和肿瘤治疗的新靶点。

本研究显示Gab2在胃癌中过表达，表达率为69．2%，而在除胃底腺以外的正常胃黏膜均不表达。Gab2的表达在胃腺癌不同病理分化程度间差异有统计学意义，研究显示Gab2可能在胃腺癌的发生发展中起着重要作用。

胃正常黏膜除胃底腺细胞均不表达Gab2，提示Gab2可能只在正常胃黏膜的胃底腺细胞发挥功能，而这个功能目前仍不清楚。依据本实验结果，提出这样的假设:过表达Gab2的胃腺癌细胞可能来源于表达Gab2的胃底腺细胞。当然，这需要进一步实验证明是否正确。

胃癌是严重危害人类生命健康的恶性肿瘤之一，尽管手术、放疗及化疗技术在不断更新，但5年生存率一直徘徊在50%－60%［11］。肿瘤细胞的侵袭及转移是胃癌患者高死亡率的重要原因。本研究显示在不同性别、不同年龄、不同临床分期及淋巴结是否转移的患者中Gab2表达的差异无统计学意义，因此Gab2过表达可能在胃癌的发生及早期发展中起到重要作用。关于Gab2在胃癌发生发展中的作用及其机制，需要进一步深入研究。

［1］Bocanegra M，Bergamaschi A，Kim YH，et al．Focal amplification and oncogene dependency of GAB2 in breast cancer［J］．Oncogene，2010，29:774－779．

［2］Bentires-Alj M，Gil SG，Chan R，et al．A role for the scaffolding adapter GAB2 in breast cancer［J］．Nat Med，2006，12:114－121．

［3］Fleuren ED，O’Toole S，Millar EK，et al．Overexpression of the oncogenic signal transducer Gab2 occurs early in breast cancer development［J］．Int J Cancer，2010，127:1486－1492．

［4］Brown LA，Kalloger SE，Miller MA，et al．Amplification of 11q13 in ovarian carcinoma［J］．Genes Chromosomes Cancer，2008，47:481－489．

［5］Zatkova A，Schoch C，Speleman F，et al．GAB2 is a novel target of 11q amplification in AML/MDS［J］．Genes Chromosomes Cancer，2006，45:798－807．

［6］Wohrle FU，Daly RJ，Brummer T．Function，regulation and pathological roles of the Gab/DOS docking proteins［J］．Cell Commun Signal，2009，7(22):1－28．

［7］Ke Y，Wu D，Princen F，et al．Role of Gab2 in mammary tumorigenesis and metastasis［J］．Oncogene，2007，26:4951－4960．

［8］Horst B，Gruvberger-Saal SK，Hopkins BD，et al．Gab2-mediated signaling promotes melanoma metastasis［J］．Am J Pathol，2009，174:1524－1533．

［9］Xu Xiu-Li，Wang Xia，Chen Zhao-Li，et al．Overexpression of Grb2-associated binder 2 in human lung cancer［J］．Int J Biol Sci，2011，7(5):496－504．

［10］Ding Chenbo，Luo Junmin，Yu Weina，et al．Gab2 is a novel prognostic factor for colorectal cancer patients［J］．Int J Clin Exp Pathol，2015，8(3):2779－2786．

［11］Karam SM．Cellular origin of gastric cancer［J］．Ann N Y Acad Sci，2008，1138(9):162－168．