糖尿病肾病患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平及其与eGFR的相关性

糖尿病肾病患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平及其与eGFR的相关性

刘文花刘海霞1胡文博

(青海省人民医院肾内科，青海西宁810007)

摘要〔〕目的探讨糖尿病肾病所致慢性肾脏病(CKD)患者不同时期血清胱抑素(Cys)C、β2-微球蛋白(β2-MG)的变化特点及临床意义。方法应用免疫比浊法分别检测各受试对象血清Cys C、β2-MG浓度，采用苦味酸法检测血清肌酐(Scr)。根据Scr水平推算肾小球滤过率(eGFR)，按NKF-K/DOQI分期分为5期。结果Ⅰ期患者血清Cys C、β2-MG及Scr水平与健康对照组相比均无统计学意义；Ⅱ期患者血清Cys C、β2-MG与健康对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)，Scr水平差异无统计学意义(P>0.05)，Cys C与CKDⅠ期相比差异有统计学意义(P<0.01)。自Ⅲ期开始，各检测指标与健康对照组及CKDⅠ期相比均有统计学意义(P<0.01)。患者血清Cys C、β2-MG与eGFR均呈负相关(r=-0.712、-0.692)。结论血清Cys C与β2-MG不仅可作为DN患者早期评价GFR的敏感指标，且血清Cys C与β2-MG的血液浓度水平对初步估计CKD患者肾损害的程度、指导临床分期有一定临床意义。

关键词〔〕胱抑素C(Cys C)；β2-微球蛋白(β2 -MG)；糖尿病肾病；估算肾小球滤过率

中图分类号〔〕R58〔文献标识码〕A〔

通讯作者：胡文博(1962-)，男，主任医师，硕士生导师，主要从事肾脏病学研究。

1青海大学医学院研究生

第一作者：刘文花(1977-)，女，副主任医师，主要从事肾脏疾病临床研究。

近年来，糖尿病引起的诸多并发症越来越受到人们的普遍关注，糖尿病的慢性并发症可引起全身重要脏器的损伤，主要危险靶器官是心、脑、肾。而糖尿病肾病(DN)则是糖尿病所致微血管病变中极其重要、危险的疾病。DN是糖尿病所致严重微血管病变，是以肾小球硬化为主要特征，主要表现为蛋白尿、高血糖、水肿、渐进性肾损害，晚期引起肾衰竭，其严重性仅次于心、脑血管病，是糖尿病患者的主要死因。研究已证明胱抑素(Cys)C、β2-微球蛋(β2-MG)是新的反映肾功能损害的内源性标志物，与其他内源性标志物相比具有显著优越性〔1，2〕。本实验测定DN患者不同时期的CysC、β2-MG水平，观察CysC、β2-MG在不同阶段变化特点、研究其与DN不同阶段估算肾小球滤过率(eGFR)的相关性。

1资料与方法

1.1研究对象纳入标准：选取2012年10月至2013年12月期间在我院肾内科住院明确诊断DN患者。排除标准：既往有肾脏病、高血压、高脂血症、甲状腺功能异常，肝脏疾病，恶性肿瘤，结缔组织疾病，获得性免疫缺陷综合征(AIDS) 的患者，应用大剂量糖皮质激素者及其他代谢性疾病的患者。入选对象：根据纳入标准和排除标准，共获取病例300例，男148例，女152例，年龄18～80〔平均(47.07±13.41)〕岁。另随机抽取我院体检中心健康体检者110例作为对照组，男62例，女48例，平均年龄(44.45±13.56)岁，既往无特殊病史，此次体检无明显异常者。分期依据：研究对象临床分期采用美国NKF-K/DOQI指南CKD分期〔3〕：Ⅰ期：肾损害伴GFR正常或升高，eGFR≥90 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅱ期：肾损害伴GFR轻度降低，eGFR为60～89 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅲ期：肾损害，GFR中度降低，eGFR为30～59 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅳ期：GFR重度降低，为15～29 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅴ期：终末期肾病(ESRD)，eGFR<15 ml·min-1·1.73 m-2。

1.2样本获取①测量记录临床资料。②血清标本采集：被检者禁食8～10 h，晨起抽取肘静脉血5 ml立即加入预冷的EDTA促凝管，静置2 h，以3 000 r/min离心10 min后分离血清，-70℃恒温保存待测。

1.3相关指标检测

1.3.1血清CysC的测定采用北京豪迈生物工程有限公司提供的CysC测定试剂盒，操作方法：将3 μl样本和250 μl R1混合，37℃孵育5 min，再加入R2 50 μl混匀后，立即在570 nm波长下读第一次吸光度值(A1)，37℃孵育5 min，570 nm波长下读第二次吸光度值(A2)，计算ΔA=A2-A1。与同样处理的标准进行比较，求出样本中CysC含量。

1.3.2血清β2-MG测定采用北京豪迈生物工程有限公司提供的β2-MG测定试剂盒，操作方法：将3 μl样本和240 μl R1混合，37℃孵育5 min，再加入R2 60 μl混匀后，立即在570 nm波长下读第一次吸光度值(A1)，37℃孵育5 min，540 nm波长下读第二次吸光度值(A2)，计算ΔA=A2-A1。与同样处理的标准进行比较，求出样本中β2-MG含量。

1.3.3血清肌酐检测采用德国罗氏诊断有限公司生产的肌酐诊断试剂盒，由我院检验科应用罗氏Cobas C8000全自动生化分析仪采用苦味酸法检测。

1.4统计学方法采用SPSS17.0统计软件进行one-wayANOVA分析和LSD-t检验，相关性分析采用Pearson相关性分析法。

2结果

2.1各指标检测结果Ⅰ期患者各检测指标与对照组比较差异无统计学意义(P>0.01)；Ⅱ期患者血清CysC和β2-MG与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)，肌酐无统计学意义(P>0.01)，CysC与CKDⅠ期比较差异有统计学意义(P<0.01)；自CKDⅢ期开始，患者各检测指标与对照组及CKDⅠ期比较差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2CysC、β2-MG与eGFR的相关性分析300例DN患者血清CysC(r=-0.712,P<0.01)、β2-MG(r=-0.092,P<0.01)与eGFR呈中度负相关。

表1　各组检测指标结果比较( ± s)

与对照组比较：1)P<0.01；与CKDⅠ期比较：2)P<0.01；与CKDⅡ期比较：3)P<0.01；与CKDⅢ期比较：4)P<0.01；与CKDⅣ期比较：5)P<0.01

3讨论

近年来随着糖尿病发病率的不断升高，DN也随之逐渐攀升，不仅严重威胁到患者的生命和生存质量，也给整个社会的发展带来了沉重的经济负担。因此，能够早期发现、早期诊断DN，做到早预防、早干预、早治疗显得尤为重要。

一直以来eGFR是评价肾功能损害的金标准，但是目前临床尚不能直接测定eGFR〔1〕，且DN在Ⅲ期以前GFR基本正常，这给临床上早期发现糖尿病肾病带来了困难。而CysC和β2-MG是新的能够反映eGFR的内源性标志物，与其他内源性标志物相比有显著优越性，对肾损害的诊断有重要价值〔2，3〕。李莉等〔4〕研究证实，在肾小球滤过功能轻度受损的患者中，血清CysC水平比尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)更能早期反映肾小球滤过功能的损害，是更为敏感的指标。血β2-MG 是一种小分子球蛋白，不易于血浆蛋白结合，合成稳定，不受性别、年龄、肌肉量影响〔5〕，因其可自由通过肾小球，然后在近曲小管内几乎全部被重吸收，故当肾小球滤过功能受损时其血中浓度即可升高，成为目前测定肾小球滤过功能最灵敏的指标之一〔6〕。

本研究结果显示，CKDⅠ期患者血清CysC、β2-MG及Scr水平与对照组相比均无明显差异。CKDⅡ期患者血清CysC与健康对照组及CKDⅠ期相比，差异有统计学意义(P<0.01)，β2-MG与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)，Scr水平差异则无统计学意义(P>0.05)。即CKD患者肾功能轻度损伤(eGFR>60 ml·min-1·1.73 m-2)时，患者血清CysC与β2-MG水平即可升高，而Scr水平与肾功能正常者无显著差异，提示Scr水平无法有效的反映早期糖尿病肾病患者肾损害，而CysC与β2-MG更为有效。结果中显示，自CKDⅢ期开始，患者血清CysC、β2-MG和Scr水平均升高，与报道一致〔7～12〕。 相关性分析显示，患者血清CysC和β2-MG水平均为反映肾小球滤过功能的良好指标，与肾功能损害程度密切相关，提示患者CysC和β2-MG水平越高，肾功能越差。而且，本研究结果显示，血清CysC与eGFR的相关系数较β2-MG高，提示患者血清CysC比β2-MG更能敏感准确地反映患者肾脏损伤的程度。

综上所述，CysC和β2-MG是反映DN患者肾损害的敏感指标，在DN患者中，CysC和β2-MG比Scr更能早期、准确地反映出肾功能损害程度。尤其是CKD2期Scr尚处于代偿状态或肌肉量少等不宜应用Scr评价肾损害的患者，弥补了Scr的不足。但据报道，甲状腺功能异常患者及应用大量糖皮质激素的患者可影响机体CysC的水平〔13〕，而恶性肿瘤、肝炎、类风湿性关节炎等可影响β2-MG水平，故排除上述因素的影响后，检测CysC和β2-MG对于早期发现肾功能损害和准确评价糖尿病引起肾功能不全各期肾损害程度有一定的指导意义。

4参考文献

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〔2014-06-17修回〕

(编辑曹梦园)