高密度脂蛋白胆固醇两种直接测定法试剂性能的评价

蔡惠萍

（上海市杨浦区中心医院检验科，上海 200090）

高密度脂蛋白胆固醇两种直接测定法试剂性能的评价

蔡惠萍

（上海市杨浦区中心医院检验科，上海 200090）

目的对比评价高密度脂蛋白胆固醇免疫分离法和化学修饰法试剂性能。方法对两种方法进行精密度、线性、干扰评价，并对二者进行相关性分析。结果两种方法精密度，线性，抗干扰都符合要求，且具有较好的相关性，免疫分离法抗干扰优于化学修饰法。结论两种测定方法皆适用于临床自动化检测。

高密度脂蛋白胆固醇；性能评价

高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是常规血脂测定的重要项目之一，是解释胆固醇测定结果的基础。HDL-C对冠心病具有很高的预见性，可用于动脉粥样硬化危险的检测，还可用于降脂药物治疗的监测。目前，临床生化已基本实现在全自动化分析仪上直接测定HDL-C。现对直接测定法中的免疫分离法（immuno-separation，IS）[1]和PEG修饰酶/硫酸α2环糊精法（ployethyleneglycolmodifiedenzyme/ α-cyclodextrin2sulfate，PEGME）[2]进行试剂性能评价。

1 材料与方法

1.1 仪器：美国BECKMAN COULTER AU5821全自动生化分析仪。

1.2 试剂：免疫分离法试剂为美国BECKMAN COULTER高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒。化学修饰法为日本协和高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒。校准品与质控品皆为相应公司配套产品。

1.3 方法

1.3.1 精密度测定：取混合新鲜血清，2个浓度水平。样本在一批内连续检测20次，计算批内精密度。两种浓度的混合血清每天分别用两种方法测定1次，连续测定20 d，计算批间精密度。

1.3.2 线性分析：取高、低值患者标本各一份，按不同比例混合，每个混合浓度重复测定2次，记录结果，统计数据，剔除离群值。采用线性回归分析，以预期值为X，实测均值为Y，得线性方程Y=aX+b。

1.3.3 干扰试验：取乳糜血清（三酰甘油＞10 mmol/L），黄疸血清（总胆红素＞100 μmol/L），溶血血清（血红蛋白浓度＞3 g/L），分别用两种方法测回收率。

1.3.4 相关性分析：相关性分析采用Pearson相关分析。

1.4 统计学方法：采用SPSS10.0统计软件，计量资料以（）表示，均数比较用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 精密度评价：免疫分离法和化学修饰法低、高两种浓度的混合血清批内精密度CV分别为1.88和2.01，均＜1/4 CLIA'88（HDL-C CLIA'88质量要求CV为10%）要求，结果见表1。批间精密度CV分别为2.21和

2.45 ，均＜1/3 CLIA'88要求，结果见表2。

2.2 线性评价：免疫分离法回归方程为Y=1.01X+0.85，r2=0.98(P＜0.05)；化学修饰法回归方程为Y=1.02+1.2，r2=0.97(P＜0.05)。a值在(1±0.03)范围内，相关系数r≥0.975，两种测定方法在实验所涉及的浓度范围内成线性。

2.3 干扰试验评价：加入乳糜血清，免疫分离法和化学修饰法回收率分别为97.22%、90.56%。加入黄疸血清，两种方法回收率分别为98.15%、98.83%。加入溶血血清，两种方法回收率分别为96.91%、97.05%。两种测定方法都有一定的抗干扰能力，免疫分离法抗血脂干扰优于化学修饰法。

2.4 相关性分析：两种方法回归方程为：Y=1.21X+0.08，r2=0.96（P＜0.05），两种方法显著正相关。

表1 两种方法批内精密度（）

表1 两种方法批内精密度（）

方法 低浓度(mmol/L) 高浓度(mmol/L)免疫分离法 0.84±0.06 1.90±0.07化学修饰法 0.80±0.06 1.85±0.10

表2 两种方法批间精密度（）

表2 两种方法批间精密度（）

方法 低浓度(mmol/L) 高浓度(mmol/L)免疫分离法 0.80±0.05 1.8±0.09化学修饰法 0.81±0.06 1.75±0.12

3 讨 论

研究表明高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是冠状心血管疾病“阴性”危险因素。HDL-C被认为是人体内具有抗动脉粥样硬化的脂蛋白，不仅参与胆固醇的逆转运过程，还可能具有抗炎、抗氧化和保护血管内皮功能[3]。由于所有脂蛋白都含有胆固醇（Chol），因此必须从其他脂蛋白中分离出高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）后再行测定。HDL-C直接测定法方法简便、快速，能进行自动化分析，已在临床实验室广泛应用。

随着检验医学的发展，检测系统逐渐多样化、规模化，对检测质量的标准化的要求应运而生，所以不同检测方法间分析结果的比对是当今检验工作者讨论和关注的热点[4]，免疫分离法利用抗脂蛋白抗体与乳糜微粒（CM）、低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）的特异性结合，胆固醇酶系与不被抗体结合的HDL发生反应，从而达到测定目的。化学修饰法首先使试剂中聚阴离子吸附到LDL与VLDL上形成稳定的复合物，然后用表面活性剂将游离HDL颗粒弥散、溶解，同时胆固醇酶系与之发生酶促反应来实现HDL-C测定的目的。目前临床生化相对应用广泛的是化学修饰法，国内研究亦大多局限于此法[5]。

本研究通过免疫分离法和化学修饰法两种直接测定法的试剂性能评价，结果发现两种方法精密度、线性、抗干扰能力都符合要求，且两种方法显著相关，两种方法皆适于临床实验室检测。相比较而言，免疫分离法比化学修饰法抗高三酰甘油干扰能力更强一些，更适合于检测高血脂患者。

[1]Kakuyama T,Kimura S,Hashiguc H.HDL cholesterol from human serum with Hitachi911[J].Clin Chem,1994,40:1104.

[2]HarrisN,GalpchianV,ThomasJ,et al.Three generation sofhighdensity lipoprotein Cholesterol assays compared with ultracentrifugation/dextran sulfate Mg2+ method[J].Clin Chem,1997,43 (5):817.

[3]刘景惺,刘景程.两种高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒的分析性能研究[J].中国中医药资讯,2011,3(18):15.

[4]秦先兵,黄盖鹏.4种试剂检测高密度脂蛋白胆固醇的方法比对[J].国际检验医学杂志,2013,34(16):2165-2166.

[5]唐吉斌,赵铁军.高密度脂蛋白胆固醇直接测定法的研究进展[J].医学综述,2009,15(4):610-612.

Two High-density Lipoprotein Cholesterol Directly Performance Evaluation of Assay Reagents

CAI Hui-ping
(Department of Clinical Laboratory, Yangpu District Central Hospital, Shanghai 200090, China)

ObjectiveTo determine the comparative evaluation of high-density lipoprotein cholesterol, immune separation and chemical modification.MethodsThe evaluation of the precision of the two methods, linear evaluation, the evaluation of interference, and to analyze the correlation between the two.ResultsBoth methods precision, linearity, interference meet the requirements, and has a good correlation, interference immunity separation method is superior to chemical modification.ConclusionBoth measuring methods are suitable for clinical testing.

High-density lipoprotein cholesterol; Performance Evaluation

R446.11

B

1671-8194（2015）02-0047-02