姜黄素对大鼠缺血再灌注损伤脊髓的抗氧化作用

任宗凯河南永城市人民医院骨科 永城 476600

姜黄素对大鼠缺血再灌注损伤脊髓的抗氧化作用

任宗凯
河南永城市人民医院骨科 永城 476600

目的 探讨姜黄素对缺血再灌注损伤脊髓组织的抗氧化作用。方法 40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、姜黄素高剂量组和姜黄素低剂量组，根据分组不同进行相应处理后，采用腹主动脉缺血法制备大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型，测定各组大鼠脊髓组织中SOD、MDA表达水平。结果 姜黄素高剂量和姜黄素低剂量组大鼠脊髓组织中SOD均高于模型组，而MDA均低于模型组（P＜0.05）。姜黄素高剂量组脊髓组织中SOD高于姜黄素低剂量组，而MDA低于姜黄素低剂量组（P＜0.05）。结论 姜黄素对缺血再灌注损伤后脊髓组织具有抗氧化作用。

姜黄素；脊髓；缺血再灌注损伤；抗氧化作用；超氧化物歧化酶；丙二醛

脊髓缺血再灌注损伤的发生可能与机体自由基过剩、细胞凋亡加剧、炎症反应发生等有关［1］。姜黄素已被证实在心、脑、肝、肾等器官或组织中具有对缺血再灌注损伤的保护作用［2］。为探讨姜黄素在脊髓缺血再灌注损伤这一病理生理过程中的作用，本文利用大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型观察姜黄素对抗氧化相关指标的影响。

1 材料与方法

1.1 研究对象 健康雄性Wistar大鼠40只，体质量260～330g，动物许可证号为SCXK（豫）2014-0001，购自河南省实验动物中心。

1.2 药品与试剂 姜黄素购自美国Sigma公司；考马斯亮蓝蛋白检测试剂盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）检测试剂盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 动物分组及给药方法 40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、姜黄素高剂量组和姜黄素低剂量组，各组分别给予相应处理：姜黄素高、低剂量组大鼠于造模前15min分别给予50mg/kg姜黄素+0.9％NaCl溶液和25mg/kg姜黄素+0.9％NaCl溶液，每只大鼠注射药液量按10mL/kg计算；假手术组和模型组大鼠于术前均给予同体积0.9％NaCl溶液。

1.4 模型制备及指标检测 大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型制备采用改良后的腹主动脉缺血法［3］，缺血时间45min，再灌注时间8h，其中假手术组仅进行腹主动脉分离术，实验结束后麻醉处死大鼠，取第3～5腰椎处的脊髓组织，用0.9％ NaCl溶液制成组织匀浆，低温（4℃）离心10min，离心速度4 000r·min-1，取上清液，SOD采用嘌呤氧化酶法测定，MDA采用硫代戊巴比妥法测定，蛋白测定用考马斯亮蓝法。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0进行数据处理，计量资料以均数±标准差表示，采用单因素方差分析和LSD-t检验，检验水准α=0.05。

2 结果

姜黄素高、低剂量组大鼠脊髓组织中SOD均高于模型组，而MDA均低于模型组（P＜0.05）。姜黄素高剂量组脊髓组织中SOD高于姜黄素低剂量组，而MDA低于姜黄素低剂量组（P＜0.05）。见表1。

表1 各组大鼠脊髓组织中SOD、MDA水平比较 （±s）

表1 各组大鼠脊髓组织中SOD、MDA水平比较 （±s）

3 讨论

脊髓缺血多发于脊柱骨折、脊髓内微创手术、主动脉瘤手术等过程中，可能导致机体一过性或永久性损伤。因此，临床上将恢复血流作为首要目标，但在进一步的基础或临床观察中发现，血流刚开始恢复时，机体的损伤反而加重，这种现象称为脊髓的缺血再灌注损伤，可能是建立在细胞凋亡加剧、自由基过剩、炎症反应发生、钙超载的病理生理学过程的基础上［1］。姜黄素提取自姜科姜黄属植物姜黄根茎，属于酚类色素，在心、脑、肝、肾等器官或组织中具有对缺血再灌注损伤的保护作用［2］。付健等［4］发现，姜黄素预处理后能够影响大鼠缺血再灌注损伤脊髓组织中NF-κB和Hsp70的表达，进而抑制损伤早期出现的炎症反应。本课题选择了SOD和MDA作为姜黄素抗氧化作用评估的观察指标。

SOD是一种氧自由基清除剂，正常情况下，一定水平的SOD能够维持机体的平衡，在清除过剩自由基的同时又不至于对机体造成损伤。一旦SOD水平急剧下降，体内过剩的自由基就会对机体造成伤害［5］。因此，可通过提高体内SOD水平发挥抗氧化作用。MDA是机体脂质过氧化的产物之一，体内丙二醛水平上升提示过氧化程度的加重，而且过量的MDA同时会进一步加剧体内蛋白质、核酸等的交联聚合，具有一定的细胞毒性［5］。本研究结果显示，姜黄素高、低剂量组大鼠脊髓组织中SOD均高于模型组，而MDA均低于模型组，提示姜黄素具有一定的抗氧化作用；姜黄素高剂量组脊髓组织中SOD高于姜黄素低剂量组，而MDA低于姜黄素低剂量组，提示在一定剂量范围内，姜黄素的用药量越大，其抗氧化作用可能越强。总之，姜黄素在大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中具有一定的抗氧化作用，且这种作用具有一定的剂量依赖性，姜黄素可能通过这种抗氧化作用发挥减轻脊髓缺血再灌注损伤的作用，但尚需进一步研究证实。

［1］袁元杏，刘尚礼，黄彦清，等.脊髓损伤后不同免疫条件下血清IL-6、IL-8、TNF-α含量的变化与意义［J］.临床骨科杂志，2008，11（3）：195-198.

［2］李冠，夏振.姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应和血脑屏障通透性的作用研究［J］.现代中西医结合杂志，2015，24（8）：814-816；877.

［3］刘辉.白藜芦醇对大鼠脊髓缺血再灌注损伤组织的保护作用［J］.中国实用神经疾病杂志，2014，17（19）：99-100.

［4］付健，韦波，范洪伟，等.姜黄素对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB和Hsp70的表达研究［J］.时珍国医国药，2011，22（7）：1 629-1 631.

［5］徐净.脊髓组织缺血再灌注早期MDA和SOD的动态变化［J］.西南军医，2008，10（5）：12-13.

（收稿2014-09-26）

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1673-5110（2015）11-0059-02