无偿献血前梅毒抗体胶体金法快速筛查的探讨

2015-12-19胡贵宾释艳华

实验与检验医学 2015年6期

关键词：螺旋体胶体金初筛

胡贵宾，释艳华

(襄阳市中心血站，湖北襄阳441021)

·输血与检验·

无偿献血前梅毒抗体胶体金法快速筛查的探讨

胡贵宾，释艳华

(襄阳市中心血站，湖北襄阳441021)

目的对胶体金法快速检测献血者梅毒螺旋体抗体进行适用性评价。方法使用ELISA-TP检测襄阳市中心血站2015年1月-5月的无偿献血者23666例血液标本，阳性标本再分组进行梅毒螺旋体胶体金法快速检测。结果ELISA-TP阳性率为0.418%，其中单试剂阳性标本40例，胶体金法无一例检出；ELISA-TP双试剂阳性且S/CO 0.8～5.0的弱阳性标本14例，胶体金法的检出率为14.29%；ELISA-TP双试剂阳性且S/CO＞5.0的标本45例，胶体金法的检出率为95.56%；平均检出率为45.45%。结论胶体金法用于采血前初筛，对降低梅毒实验室淘汰率有显著意义；但梅毒初筛结果的告知没有适当的场所，因此，献血前梅毒初筛应谨慎开展。

胶体金法；无偿献血；梅毒抗体

胶体金快速诊断试纸法具有简便快捷、不需要特殊仪器等优点[1]，目前被很多血站应用于采血现场献血前对献血者的初筛[2，3]，初筛项目主要是HBsAg。本文拟通过TP胶体金试纸对TP阳性样本的检出情况及现场操作情况，初步评价其在襄阳地区献血者初筛的意义。

1 材料与方法

1．1标本来源所有血液标本均来自襄阳市中心血站2015年1月-5月的无偿献血者所献血液。

1．2试剂梅毒螺旋体抗体胶体金诊断试剂(英科新创（厦门）科技有限公司，批号2014023304)；梅毒螺旋体抗体酶联免疫诊断试剂盒(北京万泰生物药业股份有限公司，批号N20130712、N20131219；英科新创（厦门）科技有限公司，批号2013097523、2013127531)。

1．3仪器Xantus全自动加样系统，Fame全自动酶免后处理分析仪，Uranus全自动加样及酶免处理系统，DD-5M低温高速离心机，移液器(法国吉尔森公司)等。

1．4方法

1.4.1 采用ELISA-TP诊断试剂盒检测2015年1月-5月的无偿献血者23666例血液标本中的抗-TP，初试OD≥0.8×Cutoff的标本视为可疑标本，万泰和新创试剂盒检测均可疑的标本采用两种试剂分别单孔复试，任一孔阳性视为阳性标本；万泰或新创试剂盒检测可疑的标本采用单种试剂双孔复试，任一孔阳性视为阳性标本。

1.4.2 实验分组将样本用ELISA试剂检测后的阳性标本依据其阳性类型和S/CO值分为A、B、C三组。A组为ELISA单试剂阳性，S/CO≥0.8；B组为ELISA双试剂阳性，S/CO 0.8～5.0；C组为ELISA双试剂阳性，S/CO＞5.0。

1.4.3 采用TP胶体金试剂，检测本实验室酶联免疫法抗-TP结果为阳性的血浆标本。按说明书要求，加样量为60～80μl，反应温度为22℃。结果判定：测试卡在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带判定为阳性；测试卡只在对照区位置出现一条紫红色条带判定为阴性；对照区未出现紫红色条带判定为失效，结果判定时间为15min。

2 结果

2.1 2015年1月-5月23666例无偿献血者血液标本中的抗-TP阳性标本为99例，阳性率为0.418%。

2.2 A组胶体金法和酶联免疫法阳性符合率为0，B组阳性符合率为14.29%，C组阳性符合率为95.56%，三组平均符合率为45.45%。详见表1。

表1 胶体金法与ELISA法检测99例血清TP抗体结果比较

3 讨论

从表1可知，对99例ELISA-TP检测阳性标本分组进行胶体金法检测，ELISA单试剂阳性的40份标本，胶体金法无一例检出。ELISA双试剂阳性且S/CO 0.8～5.0的弱阳性标本，胶体金法的检出率仅为14.29%，且其中一部分标本在15min判读时，阳性条带相对较弱。ELISA双试剂阳性且S/ CO＞5.0的强阳性标本，胶体金法的检出率为95.56%。

ELISA法是目前血站系统最常用的梅毒血清学检测方法，它采用双抗原夹心酶联免疫吸咐实验原理，用基因工程方法生产的TP抗原TP47和TmpA包被微孔板，检测血清中的梅毒螺旋体特异性抗体，具有灵敏度高，特异性强，准确度高的特点[4-6]。胶体金法采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血浆样本中的梅毒螺旋体抗体，不需要特殊设备，方便单人份检测，具有快速，简便的特点[7，8]，已被很多血站用于街头采血初筛。但是胶体金法灵敏度差，弱阳性多，容易出现漏检；溶血及脂血的影响也会出现假阴性[9]。且本实验是在有相对稳定环境的实验室进行，可以提供良好的反应条件，准确判读弱阳性结果，但是如果在室外采血车或采血屋操作，由于温度、湿度、光线、反应时间等各方面的条件都不可控，就会出现极弱阳性的标本显不出条带，较弱的阳性条带就会误判为阴性而漏检。

实验结果显示，胶体金法检测抗-TP阳性标本的平均符合率仅为45.45%，襄阳地区梅毒实验室检测淘汰率为0.418%，远远低于成都、广西沿海萍乡地区[10]。如果用于街头采血初筛，将无法明显降低梅毒实验室淘汰率，反而增加了血液检测成本和工作量。

由于受街头献血环境的限制，对献血者结果解释没有专门场所，给梅毒这个敏感结果的告知带来麻烦。因此，无偿献血前进行梅毒抗体胶体金法快速筛查，应谨慎开展。

[1]徐树良，赵源源，蒋理，等．金标法检测梅毒螺旋体特异性抗体的适用性分析[J]．中国输血杂志，2004，17(3)：l59．

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[4]梁庆华．3种方法联合检测在老年梅毒诊断中的应用价值[J]．检验医学与临床，2009，6(7)：498-499．

[5]秦红群，马顺高．梅毒螺旋体抗体筛查实验的选择[J]．中国现代医生，2008，46(28)：146-147．

[6]张波．几种梅毒血清学检测方法的比较与分析[J]．实验与检验医学，2013，31（2）：173-175．

[7]程玉根，唐郁．胶体金试剂检测梅毒抗体在献血者筛查中的应用[J]．中国输血杂志，2009，22(6)：473-474．

[8]张波.几种梅毒血清学检测方法的比较与分析[J].实验与检验医学，2013，31(2)：173-175.

[9]靳达芳．梅毒抗体的胶体金法检测及弱阳性影响因素分析[J]．白求恩军医学院学报2013，11(1)：84-85．

[10]邓日富，彭继红.萍乡地区无偿献血人群中梅毒抗体阳性反应情况调查[J].实验与检验医学，2012，30(3)：297-298.