COPD患者血清NE的测定及临床意义

贵州省铜仁职业技术学院(554300)肖友阳

湖北省三峡大学第一附属医院检验科 刘 敏

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一组气流受限为特征的肺部疾病，其病因及发病机制至今尚未明确。现有研究表明［1-2］，中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)与体内多种炎症的发展关系密切，而气道、肺实质及肺血管的慢性炎症是COPD的特征性改变。为了研究NE在COPD发病中的作用，我们采用酶联免疫吸附试验(ELASA)检测46例COPD患者和40例对照组血清NE表达水平并进行分析比较。

1 资料与方法

1.1 临床资料 按照中华医学会《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》(2013修订版)和人卫第七版《内科学》COPD的诊断标准，选取COPD患者46例，男26例，女20例。平均年龄65岁，其中急性加重期35例，稳定期11例，依据第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)临床分级，Ⅰ级21例，Ⅱ级13例，Ⅲ级7例，Ⅳ级5例。同时设对照组40例为门诊健康体检者，男22例，女18例。平均年龄59岁。来源于三峡大学第一附属医院2013年8月～2014年8月经呼吸内科诊治、临床资料完整患者。

1.2 检测方法 分别取COPD组和对照组空腹外周静脉血5mL，室温下静置30分钟后，2000转/分离心20分钟，取上层血清置-80℃冰箱备用。采用酶联免疫吸附实验测定血清NE水平。严格按试剂盒说明书要求操作，应用全自动酶标仪于450nm处读板测定。

1.3 统计学分析 采用SPSS13.0软件处理，计量资料采用()表示，进行方差分析或t检验，P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 两组不同临床分期NE水平比较 结果显示，COPD组患者血清NE水平(26.7±5.9)高于正常对照组水平(2.8±5.1)，差异有显著性(P＜0.05)。急性加重期NE水平(30.6±4.3)高于稳定期(5.7±4.9)，差异有显著性(P＜0.05)。稳定期与对照组差异无显著性(P＞0.05)。

2.2 两组不同临床分级NE水平比较 结果显示，COPD组患者血清NE水平Ⅰ级～Ⅳ级均高于正常对照组，且Ⅳ级高于Ⅲ级，Ⅲ级高于Ⅱ级，Ⅱ级高于Ⅰ级，Ⅰ级高于正常对照组，差异均有显著性(P＜0.05)，见表1。

表1 COPD不同临床分级NE水平及与正常对照组水平比较()

表1 COPD不同临床分级NE水平及与正常对照组水平比较()

注:与对照组比较，*P＜0.05。

3 讨论

NE是由中性粒细胞、单核细胞、T淋巴细胞和肥大细胞等释放的一种蛋白酶，在外周血成熟中性粒细胞、单核细胞、T淋巴细胞及肥大细胞中检测不到NE，但在体内多种炎症发生中高水平表达［3-4］。现有研究表明［5-6］，NE在炎症反应过程中起双重作用，一方面可诱导上皮细胞释放多种促炎细胞因子，如IL-8及NE分解纤维蛋白和层黏蛋白形成的片段，对中性粒细胞具有趋化和激活作用，活化的中性粒细胞释放的NE可降解细胞外基质(ECM)成分，如弹性蛋白、胶原蛋白、纤维连结蛋白及肺泡表面活性物质等放大炎症反应强度;另一方面，NE可作为一种炎症的负性调节剂，影响多形核白细胞(PMN)的黏附和迁移并降解多种前炎症细胞因子如IL-1、TNF，抑制炎症反应进程。

本研究采用酶联免疫吸附试验观察了46例COPD组患者和40例正常对照组患者血清NE表达水平，并分别观察了不同临床分期和分级COPD患者血清NE的表达水平，发现COPD患者血清NE水平高于正常对照组水平，差异有显著性(P＜0.05);NE的表达与COPD的临床分期有关，急性加重期水平高于稳定期，差异有显著性(P＜0.05);稳定期与对照组差异无显著性(P＞0.05);NE的表达与COPD的临床分级有关，COPD患者血清NE水平Ⅳ级高于Ⅲ级，Ⅲ级高于Ⅱ级，Ⅱ级高于Ⅰ级，Ⅰ级高于对照组，差异均有显著性(P＜0.05)。这些结果提示，NE在COPD的发生发展过程中扮演了重要的角色，急性加重期中性粒细胞大量释放NE，诱导上皮细胞释放IL-6及IL-8，进一步激活单核巨噬细胞、淋巴细胞，形成细胞因子复杂网络，并相互作用，产生细胞因子的级联瀑布效应，加重肺气肿，而稳定期随着炎症的消退，NE大部分被相应抗蛋白酶拮抗，表达水平明显下降，与对照组无明显差异。随着病情的进展，FEV1%逐渐下降，NE的表达水平逐步上升，进一步肯定了NE的表达在COPD发生发展过程中起重要的作用，可能与NE破坏蛋白质、促进感染、炎症迁延、延迟炎症细胞凋亡等有关，但具体的机制需要进一步深入的研究。

综上所述，NE表达与COPD的发生发展有一定的关系，动态测定COPD患者血清NE水平具有重要的临床意义。

［1］徐晓艳，周向东.中性粒细胞弹性蛋白酶与粘蛋白［J］.中国药物与临床杂志，2004，4(10):741

［2］王嘉，孙武装，王朋羽，等.慢性阻塞性肺气肿患者血清蛋白酶与抗蛋白酶的表达及意义［J］.山东医药，2012，52(21):54

［3］汪春，乔世严，陈宏伟，等.吸烟者血清中性粒细胞弹性蛋白酶和抗胰蛋白酶检测的意义［J］.中国现代医生，2013，51(3):150

［4］赵华，赵瑾.蛋白酶/抗蛋白酶系统与慢性阻塞性肺疾病［J］.临床肺科杂志，2010，15(8):1149

［5］高冬娜.中性粒细胞弹性蛋白酶与急性肺损伤［J］.中国急救医学，2006，26(3):210

［6］张伟.中性粒细胞弹性蛋白酶与炎症性肺部疾病［J］.国外医学呼吸系统分册，2002，22(4):171