中药抗皮肤光老化实验研究十年进展*

2015-11-17上海中医药大学上海003陈高敏李中平沈红艺

中医文献杂志 2015年2期

上海中医药大学（上海，003）王璐杜沛陈高敏李中平沈红艺

·文献综述·

中药抗皮肤光老化实验研究十年进展*

上海中医药大学（上海，201203）王璐杜沛陈高敏李中平1沈红艺2

皮肤光老化是指长期日光紫外线照射导致皮肤干燥松弛、皱纹增多、色素沉着异常等皮肤衰老症状。近年来，国内外对中医药防治皮肤光老化的研究日益增多，并从分子机制上肯定了其作用，显示出中医药在光老化预防及治疗方面的巨大潜力。本文对近十年来国内外相关研究进行综述，以期为中医药防治皮肤光老化的深入研究提供文献参考。

皮肤光老化中医中药综述

紫外线导致皮肤外源性老化，简称光老化。紫外线透过皮肤作用于胶原纤维和弹力纤维，使胶原纤维硬化、弹力纤维变性和断裂，加重皮肤角化，减少皮下脂肪［1］。光老化最为显著的临床特征是皮肤粗细皱纹的形成和皮肤弹性的下降。导致其发生的原因主要为活性氧簇的过度蓄积及真皮细胞外基质成分的改变［2-6］。现代医学对光老化发病机制的研究已深达基因水平。

中医认为皮肤光老化的发病主要是由于五脏虚损、气血不足、津液不布及痰浊瘀阻肌肤，复感光毒所致［7-9］。其发病与脾肺肾的关系最为密切。有学者提出日光中的紫外线，即光毒是人们日常接触最多的一种邪气，性质属阳，阳邪伤阴，故光毒伤人，灼伤阴津，阴津亏损，无以制火，则邪热更盛，“津液被火灼竭，则血行愈滞”，从而引发津亏热盛血疲的病理变化，损伤机体的皮肤组织而导致光老化［10］。

依据中医理论的指导，近年来对抗光老化天然药物的开发研究多围绕着具有清热解毒、活血化瘀、生津润燥、益气生血及补肾填精功效的药物开展［11］，并已从分子机制上肯定了中药防治皮肤光老化的作用。有学者不拘泥于传统的药物功效分类，探索性地发现具有收敛固涩功效的五倍子、五味子、肉豆蔻亦具有抗光老化活性，为中医药抗光老化的预防及治疗提供了更为广阔的视角。

收敛固涩类中药

1.五倍子

药理学研究发现，五倍子对变形链球菌和放线菌有抑制和杀灭作用［12］。Hwang，E.等研究发现在皮肤成纤维细胞和角质形成细胞光老化模型中，五倍子提取物可抑制UVB光照引起的ROS、MMP-1及IL-6增多，同时促进TGF-β1表达及弹性蛋白、I型胶原生成；同时，在无毛小鼠（SKH：HR-1）光老化模型中，五倍子提取物亦能抑制MMP-1的分泌，促进弹性蛋白的生成，抑制皮肤增厚及皱纹的形成［13］。

2.五味子

五味子中最主要的药理活性成分是木脂素类化合物［14］，其中的五味子乙素（SchB）可抑制由30m J/cm2UVB辐射引起的人表皮角质永生化细胞（HaCat）凋亡，并降低UVB诱导的p53、p21、Caspase-3等与凋亡相关基因的表达，从而拮抗UVB对皮肤细胞的损伤［15］。

3.肉豆蔻

肉豆蔻具有抗炎、抗肿瘤、抑菌止痢等药理作用。Hwang，J.K.［16］发现，肉豆蔻中的主要成分肉豆蔻木酚素可通过对MAPK和TGFβ/Smad两个信号通路的调节抑制UVB引起的ROS增多及MMP-1高表达并促进前胶原蛋白的形成。

清热解毒类中药

1.黄芩

Zhang，J.A.［17］等建立体内与体外光老化模型，发现外用黄芩苷可抑制UVB引起的小鼠皮肤增厚和MMP-1、MMP-3异常表达，抑制胶原蛋白的降解；体外实验中经流式细胞仪检测，发现黄芩甲苷给药组细胞G1期比例下降，并下调衰老相关蛋白γ-H2AX的表达。

2.金银花

金银花的平均紫外吸收率高达20.9（UVA）、51.1 （UVB）、70.4（UVC）。冯承恩［18］通过UVA+UVB紫外线联合光照建立KM小鼠光老化模型，观察金银花60％乙醇提取物外用对皮肤光老化的保护作用。HE染色结果显示，金银花高、低剂量组小鼠皮肤真皮层弹性纤维呈波浪状，少见断裂、破碎，与模型组比较有所改善，并发现外用金银花小鼠皮肤内抗氧化酶活性均高于模型组。

活血通络化瘀类中药

1.平卧菊三七

平卧菊三七（Gynura procumbens（Lour.）Merr.）为菊科菊三七属植物，具有通经活络、消肿止痛、消炎止咳、降血糖等功效［19］。Kim，J.发现在30mJ/cm2UVB照射人表皮角质形成细胞（HaCaT）光老化模型中，20μg/mL的平卧菊三七醇提物能够显著抑制光老化引起细胞内ROS增多。MMP-1抑制率达70％，MMP-9抑制率达73％，高于模型组。并抑制炎症因子IL-6和IL-8的释放［20］。

2.郁金

郁金95％乙醇提物在体外细胞氧化应激模型中，可显著提高SOD活性，下调MDA、LDH含量，降低ROS产物，具有抗氧化应激活性［21］。郁金主要成分姜黄素［22］可通过MAPK-p38/JNK通路调控UVB引起的MMP-1/3高表达，对成纤维细胞具有保护作用。

3.雷公藤

研究者发现雷公藤红素对紫外线老化模型中的真皮成纤维细胞的代谢和功能有显著调节作用，调控作用通过调节成纤维细胞MMP-1和MMP-3的表达完成，在10mg/L-40mg/L质量浓度范围内，雷公藤红素对成纤维细胞的一般功能可能没有毒副作用或者毒副作用极小［23］。

4.乳香

1％乳香提取物外用可提高8-甲氧沙林溶液（8-MOP）联合长波紫外线光老化模型小鼠血清中SOD活力并降低MDA含量。模型组小鼠的真皮层弹性纤维发生变性，纤维出现断裂、破碎甚至消失；1％乳香提取物组小鼠真皮层可见波浪状弹性纤维，纤维少见断裂、破碎［24］。

5.益母草

现代药理学研究发现益母草可通过清除自由基，提高机体抗氧化酶活力，减轻小鼠皮肤组织的氧化损伤，促进胶原蛋白合成，减缓细胞凋亡等途径，预防皮肤光老化，并对光老化皮肤具有修复作用；其机理可能与TGF-β1上调促进胶原蛋白合成有关［25］。

生津润燥类中药

1.麦冬

麦冬水煎剂能显著提高模型大鼠的红细胞SOD活性，血清TAA及红细胞免疫功能，显著降低血清MDA含量，表明其具有一定的抗衰老活性［26］。麦冬的主要活性成分麦冬皂苷D可通过调节NF-κB和ERK信号通路抑制过氧化氢引起的人脐静脉内皮细胞过氧化损伤［27］。15μM和10μM的麦冬皂苷D可促进衰老细胞的增殖，下调凋亡因子caspase-3的蛋白表达，调控细胞的周期和凋亡，使G1期细胞比例下调，促进细胞进入S期，降低细胞凋亡率［28］。

2.玉竹

玉竹“久服，去黑面，好颜色润泽，轻身不老”。玉竹提取物可提高细胞活力并抑制UVA造成的抗氧化酶活性下降［29］，进一步研究表明在UVB照射人皮肤角质形成细胞光老化模型中100μg/m l及200μg/m l玉竹水提液剂量组能显著提高SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌，在一定程度上减轻UVB对角质形成细胞的损伤［30］。

3.地黄

研究者发现生地黄的石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇提取物均具有抗老化功效［31］。体外人角质形成细胞光照实验研究表明［32］，毛地黄黄酮可调节MAPKs通路AP-1的活化，从而抑制MMP-1表达，对光老化有抑制作用。

4.葛根

用葛根的主要成分葛根素预处理HaCaT细胞，然后进行30mJ/cm2UVB照射，24h后彗星电泳实验检测发现模型组细胞DNA损伤、细胞内游钙离子、磷酸化p38蛋白和神经酰胺显著增加；与UVB模型组相比，葛根素处理组可减轻UVB造成的DNA损伤并抑制细胞内游钙离子、磷酸化p38蛋白和神经酰胺的增加，提示其具有抗光老化活性［33］。

5.沙参麦冬汤

体内实验研究发现［34］，2g生药/m l沙参麦冬汤灌胃可提高烟熏大鼠肺脏的抗氧化功能，减少氧化应激损伤，并可通过增加衰老时机体的胸腺指数和脾指数，增强衰老时体内下降的免疫功能，还可以抑制衰老机体内caspase-3蛋白表达同时增加抑凋亡基因bcl-2的表达，从而抑制内源性衰老［28］。另有研究发现沙参麦冬汤可提高光老化ICR小鼠自身抗氧化酶活性，降低皮肤中MDA含量，从而抑制皮肤中重要保湿物质透明质酸的降解［35］。

益气生血类中药

1.人参

人参皂苷Rb及人参皂苷Rd可抑制8-甲氧补骨脂素诱导的真皮成纤维细胞光老化模型MMP-1和MMP-3表达［23，36-37］。Hwang，Y.P.［38］发现，在UVB诱导的成纤维细胞光老化模型中，人参提取物可同时调节MAPKs及NF-kB信号通路，抑制MMP-1与MMP-13的异常分泌，达到抗光老化作用。

2.绞股蓝

体内研究发现，绞股蓝提取液灌胃光老化模型小鼠，可提高其SOD，降低MDA，中高浓度给药还可以提高HYP含量［39］，体外研究显示，绞股蓝总皂苷提取物含药血清可调节光老化成纤维细胞模型中相关细胞因子（IL-1α、IL-6以及TNF-α）的分泌及NF-κB蛋白的表达，其抗光老化机制可能与抑制NF-κB信号通路蛋白的表达相关［40-41］。

3.黄芪

黄芪总黄酮具有清除自由基抗氧化的药理作用。研究表明在UVA+UVB照射昆明种无毛小鼠光老化模型中黄芪8g生药/Kg及16g生药/Kg灌胃组，可减轻UV照射造成的SOD活性降低及MDA含量增加［42］。0.08％黄芪甲苷外用亦显示出抗光老化活性［43］。另有研究表明黄芪甲苷可提高成纤维细胞的活性，且浓度为40μg/m l时最显著，并可同时上调TGFβRIImRNA、蛋白水平，下调Smad 7mRNA、蛋白水平的表达以对抗紫外线所造成的损伤［44］。此外，有研究者发现浓度为20mg/L的黄芪甲苷可以明显缓解成纤维细胞光老化进程，包括下调MMP-1增强TIMP-1的表达［45］，并抑制UVA引起的细胞周期阻滞，调控p53、p16和c-myc等老化基因表达［46］。

4.玉屏风散

研究者采用血清药理学方法制备玉屏风散含药血清并以不同浓度含药血清培养光老化角质形成细胞。发现紫外线显著损伤细胞形态，造成角质形成细胞皱缩、碎片增多，悬浮细胞增多，MTT检测显示UVA和UVB对体外培养的角质形成细胞生长均有显著的抑制作用，细胞克隆形成率结果表明UVA和UVB的照射显著抑制了角质形成细胞的增殖能力，而玉屏风散8g生药/kg和16g生药/kg剂量组均可促进皮肤角质形成细胞的生长与增殖，同时发现照射24h后给药组效果最为明显［47-48］。

补肾填精类中药

1.杜仲

研究者对杜仲醇提物分别进行抗UVA、UVB致HaCaT细胞和UVB致ESF细胞光老化作用的研究，结果表明给药组可提高光老化模型中细胞活性和SOD活力、降低培养液中LDH活力和MDA含量［49-51］。同时，在体实验亦显示杜仲醇提物对小鼠皮肤光老化具有保护作用［52］。深入研究发现，杜仲醇提物能抑制UVA引起的MMP-1及MMP-3的异常分泌，并拮抗I型胶原蛋白的降解［53］。

2.冬虫夏草

虫草多糖可使8-甲氧补骨脂素联合UVA（8-MOP/UVA）诱导皮肤成纤维细胞致光老化模型中羟脯氨酸含量上升，MDA含量降低，SOD活力升高［54-55］。Lee Young-Rae发现在人皮肤成纤维细胞光老化模型中，虫草多糖可通过调节NF-kB信号通路以调控MMP1、MMP3的表达而发挥抗光老化作用［56］。

3.红景天

红景天苷可有效抑制H2O2诱导的人胚肺成纤维细胞衰老模型中p53、p21和p16蛋白的表达，表明其具有较强的抗氧化及抗衰老活性［57］，并能够促进光老化角质形成细胞的增殖，提高SOD、GSH、CAT等抗氧化酶的活性，对UVB辐射所造成的皮肤光老化具有保护作用［58］。

4.十精丸

十精丸出自《普济方》，由枸杞、熟地、肉桂、菊花、山茱萸等10味中药组成。研究发现，十精丸水提取物100μg/ml及200μg/ml均能显著提高UVA光照后ESF-1培养液中SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，增强细胞活力，有效地对抗UVA对成纤维细胞的氧化损伤［59］。

小结

随着人们对皮肤抗衰老的关注持续增强，国内外对防晒剂的研究不再停留于遮光剂的开发，而是更关注具有抗氧化、促进胶原合成等抗光老化药理活性的药物。随着中药抗皮肤光老化的深入研究，很多中药的有效成分可以通过清除自由基、提高抗氧化酶活性来抑制UV诱导的胶原蛋白降解，从分子水平肯定了中药抗皮肤光老化的效果，显示出中医药在皮肤光老化的预防及治疗方面尚有巨大的潜力。中药具有天然、毒副作用小的优势，今后的研究中，在中医理论的指导下，结合现代生物医学的实验方法，进一步探索中药复方防治光老化的作用机制，明确量效关系，将具有重要的临床价值及广阔的应用前景。

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Decade Progress o f Experimen tal Researches：An ti Sk in photoaging w ith Chinese Medical Herbs

WANG Lu，DU Pei，CHEN Gao-m in，LIZhong-ping，SHEN Hong-yi （ShanghaiUniversity of TraditionalChinese Medicine，Shanghai201203，China）

Skin photoaging refers to symptoms including dryness，w rinklesand pigmentation，caused by long- time exposure to UB rays of natural sunlight.Relating to anti skin photoaging w ith Chinese medical herbs，increasing researches have agreed on molecular mechanism of herbs in recent years.Thisphenomenon demonstratesgreat potential of Chinesemedicalherbson prevention and treatment in skin photoaging.Thus，the article is to give a comprehensive summary on relevant researches for decadesallover theworld for profound studiesby literature reference.

skin photoaging；TraditionalChineseMedicine；Chinesemedicalherbs；summary

R275.9

1006-4737（2015）02-0064-05

2014-12-30）