老年人结直肠癌中EGFR、VEGF和P-gp表达及其相关性的分析

刘晓斌郑原印

（1 福建医科大学附属宁德市闽东医院病理科，福建 福安 355000；2 福建医科大学附属宁德市闽东医院老年医学科，福建 福安 355000）

老年人结直肠癌中EGFR、VEGF和P-gp表达及其相关性的分析

刘晓斌1，2郑原印1*

（1 福建医科大学附属宁德市闽东医院病理科，福建 福安 355000；2 福建医科大学附属宁德市闽东医院老年医学科，福建 福安 355000）

目的 探讨EGFR、VEGF和P-gp蛋白在老年人结直肠癌中的表达及其相关性分析。方法 应用免疫组织化学技术对79例老年人结直肠癌病理切片进行EGFR、VEGF和P-gp的联合检测，并结合检测结果进行统计学分析。结果 79例老年人结直肠腺癌组织中，VEGF、EGFR和P-gp蛋白的表达与结直肠腺癌组织的分化程度、浸润深度、是否有癌栓、淋巴结转移和Duck分期密切相关（P＜0.05）。EGFR表达与VEGF、P-gp阳性表达，及VEGF表达与P-gp阳性表达均无统计学意义（P＞0.05）。结论 VEGF、EGFR和P-gp的表达结果表明结直肠腺癌存在着多基因表达，这些基因可能参与了结直肠腺癌的发生和发展。三者的联合检测有助于判断结直肠腺癌的生物学行为和预后。

结直肠癌；老年人；EGFR；VEGF；P-gp

结直肠癌是人类最常见的肿瘤之一，以老年人最常见，预后常较不理想。结直肠癌的发生是多基因参与的过程，针对癌基因变异因子的靶点，选择突变基的有效分子靶向药物，已成为结直肠癌综合治疗的一种新方法［1］。EGFR是酪氨酸激酶I型受体蛋白，能抑制肿瘤细胞的凋亡［2］。血管内皮生长因子（VEGF）被认为是一种特异性极强的促血管生成因子，促进新生血管及淋巴管的形成［3］。P-gp蛋白利用ATP提供的能量转运特异性的底物，将药物转运出细胞外，与很多原发性肿瘤和获得性耐药相关［4］。本研究应用免疫组织化学方法检测老年人结直肠癌组织中EGFR、VEGF和P-gP蛋白的表达情况，并分析其与临床病理学的关系。

1　资料与方法

1.1病例资料：收集我院2012年1月至2015年5月手术切除的老年人（≥60岁）结直肠腺癌病例79例，找出原蜡块，切片3张，进行免疫组化染色。

1.2检测方法：79例结直肠癌标本，常规取材后组织块经固定、脱水、包埋、切片、染色，光镜观察。免疫组化染色采用SP二步法，实验步骤严格按照说明书进行。

1.3结果判定：EGFR、VEGF和P-gp蛋白表达阳性均为癌细胞质和细胞膜，呈棕黄色染色。阳性程度判断：整张切片无阳性细胞（-），阳性细胞＜10%（+），阳性细胞数10%～50%（++），阳性细胞＞50%（+++）。（-）视为阴性，（+）至（+++）视为阳性。

1.4统计学处理：应用SPSS19.0统计学软件处理，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结 果

2.1EGFR与VEGF、P-gp蛋白在老年人结直肠腺癌组织中的表达：79例腺癌组织中EGFR与VEGF、P-gp蛋白阳性表达率分别为64.6%、51.9%、63.3%。EGFR、VEGF和P-gp蛋白表达阳性均为癌细胞质和细胞膜，呈棕黄色（图1～3）。

2.2结直肠癌中EGFR与VEGF、P-gp蛋白表达的临床病理关系，见表1。

2.3结直肠癌中EGFR与VEGF、P-gp蛋白阳性表达的关系，见表2。

2.4结直肠癌中VEGF和P-gp蛋白阳性表达的关系，见表3。

表2　EGFR与VEGF、P-gp蛋白阳性表达之间的关系

表3　VEGF与P-gp阳性表达之间关系

3　讨 论

图1　EGFR癌细胞胞质及胞膜阳性表达

图2　VEGF癌细胞胞质及胞膜阳性表达

图3　P-gp癌细胞胞质及胞膜阳性表达

表1　EGFR、VEGF与P-gp蛋白的表达与结直肠癌病理参数之间的关系

EGFR属于酪氨酸激酶I型受体家族，能与EGF及TGF-α有效地结合或自身激活，进而参与激活重要的细胞信号通路，介导细胞分化、侵袭、黏附和细胞损伤的修复等［5-6］。本研究显示EGFR在老年人结直肠腺癌组织中阳性表达率为64.6%，其表达率与肿瘤分化程度的降低、浸润深度的加深、出现淋巴结转移及Duck分期有明显统计学意义（P＜0.05）。因此，采用有效的分子靶向药物可以抑制结直肠腺癌的增殖、侵袭和转移。临床资料表明EGFR抑制剂（如西妥昔）单抗抗肿瘤药物可以结合肿瘤细胞EGFR位点，抑制肿瘤细胞增殖旁路，抑制肿瘤生长并促使其凋亡。

VEGF是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子，是目前发现作用最强的一种促血管生成因子，广泛分布于体内各器官［7］。因此，VEGF是肿瘤研究的一个热点［8］，VEGF-C表达下调或VEGF/VEGFR2通路下调可减慢肿瘤生长，抑制肿瘤转移，并指出结肠癌中卡培他滨的抗瘤效应正是与其下调VEGF表达抑制血管生成作用密切相关［9-10］。本组结果显示，VEGF蛋白与与肿瘤分化程度的降低、浸润深度的加深、出现淋巴结转移及Duck分期有明显统计学意义（P＜0.05），说明VEGF与结直肠癌的发生有关。

P-gp是由多耐药基因MDR1编码的一种跨膜糖蛋白，利用ATP水解释放的能量主动将化疗药物转运至细胞外，导致细胞内药物浓度低于杀伤浓度，从而使肿瘤产生多药耐药［10］。P-gp蛋白的表达水平与细胞的膜通透性、细胞内药物的浓度以及细胞的耐药程度有关。本组结果显示，P-gp蛋白与肿瘤分化程度的降低、浸润深度的加深、出现淋巴结转移及Duck分期有明显统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，结直肠腺癌的发生发展是多基因共同参与的复杂过程。本研究表明，EGFR、VEGF和P-gp三者之间并无明显的内在关联（P＞0.05），联合检测在结直肠腺癌组织中的表达有助于分子靶向药物的选择，减少不良反应，提高患者的生活质量。为结直肠癌的治疗提供更科学、更合理、更个体化的治疗方案。

［1］Sawyers C.Targeted cancer therapy［J］.Nature，2004，432（7015）：294-297.

［2］Tamas P.Mechanism of epidermal growth factor regulation of Vav2，a guanine nucleotide exchange factor for Rac［J］.Biol chem，2003，278（7）：5163-5171.

［3］赵芳芳.VEGF-C FLt4和结核菌L型感染在前列腺癌中的表达及临床意义［J］.中国微生态学杂志，2010，22（3）：257-260.

［4］刘俊.HIF-la、P-gP在胰腺癌中的表达及其临床病理学的意义［J］.中华肝胆外科杂志，2011，（17）：36-38.

［5］Rocha-Lina CM.EGFR targeting of solid tumors［J］.Cancer Control，2007，14（3）：295-304.

［6］Ciardiello F，Tortora G. EGFR antagonists in cancer treatment［J］. N Engl J Med，2008，358（11）：1660-74.

［7］佟书娟.胃癌、胃黏膜不典型增生、胃炎组织中iNOS和VEGF的表达及其相关性研究［J］.宁夏医学院学报，2005，27（3）：179-181.

［8］Ahluwalia A.Aberrant，ectopic expression of VEGF and VEGF receptors 1 and 2 in malignant colonic epithelial cells.Implications for these cells growth via an autocrine mechanism［J］.Biochem Biophys Res Commun，2013，437（4）：515-520.

［9］Khromova N.Downregulation of VEGF-C expression in lung and colon cancer cells decelerates tumor growth and inhibits metastasis via multiple mechanisms［J］.Oncogene，2012，31（11）：1389-1397.

［10］Wang KL，Li LP，Jing CP.Research progress of multidrug resistance reversal in colorectal cancer［J］.Chin J Curr Adv Gen Surg，2010，13（4）：306-310.

The Expression and the Relationship of EGFR，VEGF and P-gp in Colorectal Carcinoma of Elder People

LIU Xiao-bin1，2， ZHENG Yuan-yin1*
（1 Department of Pathology， Affiliated Mindong Hospital of Fujian Medical University， Fu'an 355000， China；2 Department of Elderly Medicine，Affiliated Mindong Hospital of Fujian Medical University， Fu'an 355000， China）

Objective To explore EGFR ，VEGF and P-gp in colorectal carcinoma of elder people and their pathological relationship. Methods Immunohistochemical technique was used in VEGF， EGFR and P-gp joint detection for 79 cases of colorectal carcinoma biopsy. The result was statistically analyzed. Results Statistical analysis showed that VEGF， EGFR and P-gp protein expression was related to colorectal carcinoma tissue differentiation， depth of invasion， with or without tumor thrombus， lymph node metastasis， and Duck stage（P＜0.05）. EGFR expression wasn't related to VEGF or P-gp expression，and VEGF expression wasn't related to P-gp expression（P＞0.05）. Conclusions VEGF， EGFR and P-gp expression results in colorectal carcinoma show the existence of multi-gene expression， and these genes may be involved in the occurrence and development of colorectal carcinoma. The joint detection is helpful in determining the biological behavior and prognosis of colorectal carcinoma.

Colorectal carcinoma； Elder people； EGFR； VEGF； P-gp

R735.3

B

1671-8194（2015）28-0001-03

2014年宁德市科技计划项目（20140018）

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