VEGF/Flk-1与新生儿窒息的相关性研究

张 美　姜 红*

（1 山东省菏泽牡丹人民医院，山东 菏泽 274000；2 山东省青岛大学附属医院，山东 青岛 266003）

VEGF/Flk-1与新生儿窒息的相关性研究

张 美1姜 红2*

（1 山东省菏泽牡丹人民医院，山东 菏泽 274000；2 山东省青岛大学附属医院，山东 青岛 266003）

目的 探讨VEGF及其受体Flk-1与新生儿窒息的相关性，以为其临床诊治提供新靶点。方法 选取2012年6月至2013年6月于本院生产的窒息新生儿60例，根据Apgar评分分为轻度窒息（Apgar=4～7）31例和重度窒息（Apgar=0～3）29例；同时，选取同期接生的30例健康新生儿为对照组。于生产过程中取新生儿脐动脉血，采用酶联免疫（ELISA）试剂盒测定血清VEGF水平，并采用免疫蛋白印迹实验（WB）测定其主要受体Flk-1的蛋白表达水平。结果 各组新生儿的脐动脉血VEGF水平和Flk-1蛋白表达量存在差异，表现为重度窒息组、轻度窒息组、对照组依次降低，且各组之间的差异均有统计学意义。经进一步的线性分析，VEGF水平和Flk-1蛋白表达量与新生儿Apgar评分呈直线负相关（R2=0.606、0.677）。结论 VEGF的含量与功能变更与新生儿窒息的发生和发展具有密切联系，其脐动脉血的含量测定可为新生儿窒息的临床诊断和预防提供新指标。

VEGF；Flk-1；新生儿窒息；Apgar评分

新生儿窒息是临床常见新生儿缺氧性疾病，也是世界新生儿死亡的主要因素之一［1］。不仅仅可启动脑细胞缺氧性凋亡，还能造成继发性神经损伤，产生脑瘫、智力低等严重并发症，影响患儿的长期生存质量。近年，与血管生成密切相关的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在新生儿缺血缺氧性疾病的研究中日益受到重视［2］。VEGF主要通过受体作用于靶组织，目前已知的VEGF受体包括VEGFR-1和VEGF-2（Flt-1）两种。其中Flt-1主要表达于胎盘、胚胎血管、机体主要器官及外周血，对中枢神经病变和胚胎病变的影响最大，可能是新生儿缺血缺氧性病变的重要影响因子。本研究对不同发病程度的新生儿窒息患者脐动脉血VEGF含量变化及其主要受体Flk-1蛋白表达进行对比性分析。

1　资料与方法

1.1一般资料：选取2012年6月至2013年6月于本院生产的窒息新生儿60例。其中男31例，女29例；自然分娩43例，剖宫产17例；孕周38～44周，平均（39.8±2.1）周；出生体质量1900～4800 g，平均（3621±432）g。选取同期接生的30例健康新生儿为对照组；其中男16例，女14例；自然分娩21例，剖宫产9例。孕周39～43周，平均（40.2±2.4）周；出生体质量2200～4800 g，平均（3644±421）g；两组患者的年龄、性别、孕周及出生体质量无统计学差异（P＞0.05）。

1.2诊断和分组：参照3版《实用新生儿学》［3］判断有无新生儿窒息。根据生后1分钟Apgar评分情况分为轻度窒息（Apgar=4～7）31例和重度窒息（Apgar=0～3）29例。

1.3研究方法：所有研究对象均于生产过程中取新生儿脐动脉血，分装于两管。管A常温静置40 min，4000 r/min离心取血清，采用全自动生化仪和ELISA试剂盒测定血清VEGF的水平。管B以总蛋白抽提试剂盒提取蛋白质，并以10 µg为单孔上样量进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，分离蛋白条带，以常规WB实验测定Flt-1的蛋白表达水平。

1.4统计学方法：选用统计学软件SPSS16.0分析数据，VEGF水平及Flt-1蛋白表达量均以均数±标准差（）表示，行t检验；P＜0.05为差异有统计学意义，P＜0.01为差异有显著统计学意义。

2　结　果

2.1各观察指标的组间对比：各组新生儿的Apgar评分存在显著差异，重度窒息组、轻度窒息组、对照组依次升高（P＜0.05）。各组新生儿的脐动脉血VEGF水平和Flk-1蛋白表达量存在差异，表现为重度窒息组、轻度窒息组、对照组依次降低，且各组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）；见表1。

表1　各组患者Apgar评分、VEGF水平和Flk-1蛋白表达量的组间对比

2.2相关性分析：经进一步的线性分析，VEGF水平和Flk-1蛋白表达量与新生儿Apgar评分呈直线负相关（R2=0.606、0.677）；见图1。

图1　新生儿脐动脉血的VEGF血清含量和Flk-1表达水平与新生儿Apgar评分的相关直线（A1 新生儿脐动脉血VEGF含量与新生儿Apgar评分.y=-0.273x+0.968，R2=0.606；A2新生儿脐动脉血Flk-1蛋白表达水平与新生儿Apgar评分.Y=-0.278+0.97，R2=0.677）

3　讨　论

新生儿窒息是指新生儿出生后无自主呼吸或呼吸抑制而导致的低氧血症、高碳酸血症和代谢性酸中毒。据不完全统计［4］，发展中国家的儿童病死率占世界平均水平的90%以上，其中30%以上为新生儿。从发病机制来看，导致新生儿窒息的本质因素为缺氧，因此产前任何阻碍母体与胎儿血液循环和气体交换的因素均可能导致新生儿窒息。窒息缺氧时为了保证心脑等重要器管的血供，非重要器官可发生血管收缩性反射，这是导致多器官功能损伤的病理基础。此外，在缺氧条件下，糖类营养物质可发生无氧酵解，以供给能量需要；在这个过程中，乳酸大量堆积，可诱发酸中毒，加重器官损伤。因此，新生儿窒息存在原发性损伤和继发性损伤两种情况，且多项研究结果显示其继发性损伤是患儿致残或致死的主要因素。

VEGF是胱氨酸结生长因子超家族一员，因其能引起小静脉对血液中大分子物质通透性的增高，最初命名于血管通透素。现代病理研究发现［5］，多种应激性反应可诱导VEGF的表达变迁，包括胚胎发育异常、肿瘤、心血管疾病及机体外创等生理性因素，亦包括失眠、抑郁症、抑躁症等心理因素。VEGF在新生儿窒息中的研究始于近几十年，其具体的生理病理机制尚未完全明确。本研究选取不同发病程度的窒息新生儿脐动脉血为样本，对VEGF及Flk-1进行分析。结果显示，各组新生儿的脐动脉血VEGF血清含量和Flk-l蛋白水平存在差异，均表现为重度窒息组＞轻度窒息组＞对照组，窘迫组＞非窘迫组＞对照组。且线性分析结果显示，VEGF的血清含量及其主要受体Flk-1的表达水平均与Apgar评分呈负相关。说明VEGF的含量与活性与新生儿窒息的发病过程密切相关，且其含量及受体表达均随着窒息程度的加重而升高，可为新生儿窒息的临床诊断和预防提供依据。

综上所述，VEGF的含量与功能变更与新生儿窒息的发生和发展具有密切联系，其脐动脉血的含量测定可为新生儿窒息的临床诊断和预防提供新指标。

［1］孔双，马生秀.新生儿窒息的原因及治疗［J］.医学综述，2009， 15（6）: 870-872.

［2］刘红梅，李芳君.新生儿窒息与血管内皮生长因子和胰岛素样生长因子-1的关系［J］.现代生物医学进展，2010，10（7）:1334-1335.

［3］金汉珍.实用儿科学［M］.北京:人民卫生出版社，2003.

［4］吴春华.新生儿窒息的抢救与护理分析［J］.中国实用医药，2013，11（28）:219-220.

［5］张瑞鹏，郭平凡.血管内皮生长因子最新研究进展［J］.医学综述，2008，14（15）:2258-2260.

R722.12

B

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