骆驼蓬子总生物碱改善小鼠学习记忆能力

何丹丹， 张 磊， 刘 力， 吴晓俊， 程雪梅， 王长虹，*

（1.上海中医药大学中药研究所，中药标准化教育部重点实验室，上海市复方中药重点实验室，上海　201203；2.上海中药标准化研究中心，上海　201203）

骆驼蓬子总生物碱改善小鼠学习记忆能力

何丹丹1， 张 磊1， 刘 力1， 吴晓俊1， 程雪梅2， 王长虹1，2*

（1.上海中医药大学中药研究所，中药标准化教育部重点实验室，上海市复方中药重点实验室，上海201203；2.上海中药标准化研究中心，上海201203）

目的 采用多种小鼠记忆障碍模型筛选骆驼蓬子抗老年痴呆的有效部位（总生物碱和非生物碱部位）。方法采用避暗实验法分别对骆驼蓬子总生物碱和非生物碱部位对东莨菪碱和30%乙醇所致的记忆获得性障碍和记忆再现障碍性小鼠学习记忆能力的影响进行考察。通过小鼠跳台实验法进一步验证有效部位对东莨菪碱、30%乙醇和亚硝酸钠所致小鼠记忆获得性障碍、记忆再现障碍及记忆巩固障碍模型的改善作用。结果 避暗实验结果表明总生物碱在较高剂量下对东莨菪碱和30%乙醇所致记忆获得性障碍和记忆再生性障碍有一定的改善作用（与模型组比较，可显著延长小鼠潜伏期，P＜0.01）。小鼠跳台实验法进一步证明高剂量骆驼蓬子总生物碱对东莨菪碱和30%乙醇诱导的学习记忆障碍具有改善作用，但对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍无明显改善作用。结论 总生物碱是骆驼蓬子改善小鼠学习记忆的有效部位。

骆驼蓬；总生物碱；学习记忆障碍；避暗法；跳台法；阿尔茨海默病

阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）又称老年痴呆，属于慢性神经退行性疾病，是一种常见老年病，不可逆转，无法彻底治愈。主要表现为记忆丧失和意识模糊，大脑机能下降，认知行为和运动行为发生障碍。因此寻找防治老年痴呆症安全有效的药物成为药物研究的热点。骆驼蓬Peganum harmala Linn为蒺藜科Zygophyllaceae骆驼蓬属Peganum多年生草本植物，是我国维吾尔族、哈萨克族和蒙古族等民族沿用已久的民族药，主治筋脉软弱、骨关节痛、咳嗽痰多、偏瘫健忘、神昏头痛、月经不调等症［1］。骆驼蓬种子中的总生物碱含有量可达7%［2］，具有广泛的药理作用。Moura等［3-4］报道β-咔啉类生物碱能够改善物体识别模型小鼠的记忆，并且具有较好的抗氧化活性。课题组前期采用薄层色谱生物自显影技术发现了骆驼属植物中一系列具有与加兰他敏相近的乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）抑制活性的β-咔啉生物碱和喹啉生物碱，并进一步证明骆驼蓬子中的活性生物碱对AChE和丁酰胆碱酯酶（butyrycholineesterase，BChE）分别表现出不同的选择性抑制作用［5-7］。胆碱酯酶（cholinesterase，ChE）活性相对增高是认知能力下降的原因之一，因此骆驼蓬子有望对阿尔茨海默病防治具有积极作用。本实验进一步采用小鼠避暗实验对骆驼蓬种子抗阿尔茨海默病的有效部位进行筛选，并通过小鼠跳台实验法进一步确认骆驼蓬子有效部位对乙醇致记忆再现障碍、东莨菪碱致小鼠记忆形成障碍和亚硝酸钠致记忆巩固障碍的影响。

1　材料

1.1实验动物 昆明种小鼠420只，（20±2）g，雌雄兼用，清洁级，由上海中医药大学动物实验中心提供，合格证编号：SCXK（沪）2012-0002。

1.2药品与试剂 骆驼蓬子总提物（上海中医药大学中药研究所制备，批号20130110-ZT，总生物碱含有量30.5%）；骆驼蓬子总生物碱提取物（上海中医药大学中药研究所制备，批号20130110-ZJ，总生物碱为65.4%）；骆驼蓬子非生物碱提取物（上海中医药大学中药研究所制备，批号20130110-FJ，残留总生物碱为8.2%）；盐酸多奈哌齐片（Donepezil）（卫材（中国）药业有限公司，生产批号110917A）；氢溴酸东莨菪碱注射液（上海禾丰制药有限公司，生产批号120803）；95%乙醇、亚硝酸钠等均为分析纯试剂（国药集团化学试剂有限公司）。

1.3实验仪器 小鼠跳台测试仪（成都泰盟科技有限公司）；RD1105-PA小鼠避暗测试仪/鼠博士-动物行为学分析系统（上海移数信息科技有限公司）；SENCO恒温水浴锅（上海申生科技有限公司）；RE-5210旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。

2　方法与结果

2.1骆驼蓬子不同部位提取物的制备 取骆驼蓬种子2.0 kg分两次提取，每次1.0 kg药材中加入10倍量85%的乙醇浸泡12 h后，加热回流提取2 h，按上述方法重复提取3次，将提取液合并后取1/3浓缩至流浸膏，烘干得总提取物；另取剩余上述提取液浓缩至流浸膏，采用1倍量4%的盐酸溶液溶解浸膏，离心，得酸不溶性沉淀，烘干，得非生物碱部位；离心后酸水提取液，加适量饱和氢氧化钠溶液调至pH 11，静置24 h后，过滤，干燥沉淀，即得总生物碱提取物［2，8］。

2.2小鼠避暗法筛选骆驼蓬子改善小鼠学习记忆能力的有效部位

2.2.1分组及给药 将昆明种小鼠按体质量随机分为12组，分别为空白组、模型组、阳性药多奈哌齐组（3 mg/kg）、骆驼蓬子总生物碱高、中、低剂量组（28、14、7 mg/kg），按照总生物碱给药剂量，同一水平下设骆驼蓬子总提物和非生物碱部位高、中、低剂量组。除空白组和模型组给予等体积生理盐水外，其余各组每天固定时间灌胃给药一次，连续给药7 d，给药剂量按照小鼠体质量0.2 mL/10 g灌胃。

2.2.2对30%乙醇所致小鼠记忆再生性障碍的影响 取昆明种小鼠120只，动物按照“2.2.1”项分组及给药方案给药7 d，第8天给药结束后30 min，进行避暗实验训练，避暗仪暗室底部铜栅通36 V、50 Hz交流电，先将小鼠放入避暗仪反应箱中训练3 min，小鼠受到电击逃往明室。正式测试开始时将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室则受到电击，避暗仪自动记录5 min内小鼠进入暗室的次数（即为错误次数）和首次进入暗室的时间（即为避暗潜伏期）。第9天给药10 min后，除空白组给予等体积生理盐水外，其余各组灌服30%乙醇0.1 mL/10 g，20min后进行测试，记录5min内小鼠进入暗室的次数和首次进入暗室的时间［9-10］。以首次进入暗室的时间（逃避潜伏期，escape latency）和5 min内小鼠进入暗室的次数（fault times）为指标进行统计分析。实验数据用均数±标准差（±s）表示，采用单因素方差分析比较组间差异。

结果如表1所示，与空白组比较，模型组小鼠的潜伏期明显减小，具有显著差异（P＜0.01），错误次数虽然有增加趋势，但是并无统计学意义。

与模型组比较，骆驼蓬子总生物碱高、中剂量给药后小鼠潜伏期显著增加（P＜0.01），而其他组别对潜伏期无明显影响；多奈哌齐组也无明显影响。所有组别的小鼠错误次数与模型组比较均无明显差异。

表1　骆驼蓬子提取物对30%乙醇致小鼠记忆再生性障碍模型的影响（±s）Tab.1 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on 30%ethanol-induced memory retrieval im pairment in m ice（±s）

表1　骆驼蓬子提取物对30%乙醇致小鼠记忆再生性障碍模型的影响（±s）Tab.1 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on 30%ethanol-induced memory retrieval im pairment in m ice（±s）

注：与空白组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01

组别动物数剂量/（mg·kg-1）潜伏期/ s错误次数/次空白组10—135±94 1.0±0.0模型组10—31±43**1.6±2.0多奈哌齐组10 3 52±39 1.8±1.1骆驼蓬子总生物碱组10 7 29±36 2.6±2.0 10 14 121±84△△1.5±1.6 10 28 115±68△△1.0±0.8骆驼蓬子总提物组10 7 24±34 1.7±1.0 10 14 76±67 1.6±1.4 10 28 68±47 1.4±2.0骆驼蓬子非生物碱组10 7 18±20 3.1±2.7 10 14 35±69 1.9±1.5 10 28 41±51 1.8±1.0

2.2.3对东莨菪碱所致小鼠记忆获得性障碍的影响 另取昆明种小鼠120只，动物按照“2.2.1”项分组及给药方案给药7 d，第8天给药结束20 min后，除空白组腹腔注射等体积生理盐水外，其余各组腹腔注射东莨菪碱5 mg/kg（0.25 mg/mL），10 min后进行避暗实验训练。第9天给药20 min后进行测试，记录5 min内小鼠进入暗室的次数和首次进入暗室的时间。以首次进入暗室的时间（逃避潜伏期，escape latency）和5 min内小鼠进入暗室的次数（fault times）为指标进行统计分析。实验数据用均数±标准差（±s）表示，采用单因素方差分析比较组间差异。

结果如表2所示，与空白组比较，模型组小鼠的潜伏期明显减小，具有显著差异（P＜0.01），同时，错误次数虽然有增加的趋势，但是并无统计学意义。

与模型组比较，骆驼蓬子总生物碱高剂量组小鼠潜伏期显著增加（P＜0.01），而其他组别对潜伏期无明显影响；多奈哌齐组也无明显影响。所有组别的小鼠错误次数与模型组比较均无明显差异。

表2　骆驼蓬子提取物对东莨菪碱所致记忆获得性障碍模型的影响（±s）Tab.2 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on scopolam ine-induced m emory acquisition im pairment in m ice（±s）

表2　骆驼蓬子提取物对东莨菪碱所致记忆获得性障碍模型的影响（±s）Tab.2 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on scopolam ine-induced m emory acquisition im pairment in m ice（±s）

注：与空白组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01

组别动物数剂量/（mg·kg-1）潜伏期/ s错误次数/次空白组10—101±96 1.1±0.9模型组10—28±21**1.7±1.0多奈哌齐组10 3 23±37 1.5±1.0骆驼蓬子总生物碱组10 7 11±7.9 1.3±0.7 10 14 61±96 1.7±1.4 10 28 96±85△△1.1±0.9骆驼蓬子总提物组10 7 24±33 1.8±1.4 10 14 42±88 1.2±0.9 10 28 25±38 2.4±1.2骆驼蓬子非生物碱组10 7 12±13 2.2±0.6 10 14 60±63 1.7±0.7 10 28 29±29 1.5±0.9

2.3小鼠跳台法考察骆驼蓬子总生物碱对小鼠记忆障碍行为学的影响

2.3.1分组及给药 将昆明种小鼠按体质量随机分为6组，分别为空白组、模型组、阳性药多奈哌齐组（3 mg/kg）、骆驼蓬子总生物碱高、中、低剂量组（28、14、7 mg/kg）。动物按照“2.2.1”项给药方式给药。

2.3.2骆驼蓬子总生物碱对30%乙醇所致小鼠记忆再生性障碍的影响 取昆明种小鼠60只，动物按照“2.3.1”项分组及“2.2.1”项给药方案。第8天给药结束后30 min进行跳台训练。进行跳台训练时，先将小鼠轻轻放在跳台上，使其熟悉箱内环境3 min，然后给予36 V电压训练5 min，以小鼠双足同时按触铜栅为触电，视为错误反应。第9天给药10min后，除空白组给予等体积生理盐水外，其余各组灌服给30%乙醇0.1mL/10g，20 min后进行测试，记录5min内小鼠第一次跳下站台的时间和5min跳下站台的次数。以跳下站台时间（逃避潜伏期，escapelatency）和跳下站台次数（faulttimes）为指标进行统计分析。实验数据用均数±标准差（±s）表示，采用单因素方差分析比较组间差异。

结果如表3所示，与空白组比较，模型组小鼠潜伏期和错误次数均明显减少，具有极显著性意义（P＜0.01）。

与模型组比较，骆驼蓬子总生物碱低、中剂量对潜伏期无明显影响。而高剂量时小鼠潜伏期明显增加（P＜0.05），多奈哌齐对小鼠潜伏期均无明显影响。

与模型组比较，骆驼蓬子总生物碱所用剂量组均明显降低小鼠犯错次数（P＜0.01）。多奈哌齐亦可明显减少小鼠犯错次数（P＜0.01）。

表3　骆驼蓬子总生物碱对30%乙醇致小鼠记忆再生性障碍模型的影响（±s）Tab.3 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaon30%ethanol-inducedmemoryretrievalimpairmentinmice（±s）

表3　骆驼蓬子总生物碱对30%乙醇致小鼠记忆再生性障碍模型的影响（±s）Tab.3 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaon30%ethanol-inducedmemoryretrievalimpairmentinmice（±s）

注：与空白组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01

组别动物数剂量/（mg·kg-1）潜伏期/ s错误次数/次空白组10-130±1031.1±0.7模型组10-27±35**5.3±2.4**多奈哌齐组10344±511.4±1.7△△骆驼蓬子总生物碱组10763±712.1±1.4△△91475±1221.2±1.3△△1028221±86△△0.9±1.1△△

2.3.3骆驼蓬子总生物碱对东莨菪碱所致小鼠记忆获得性障碍的影响 另取昆明种小鼠60只，动物按照“2.3.1”项分组及“2.2.1”项给药方案。第8天给药结束20min后，除空白组腹腔注射等体积生理盐水外，其余各组腹腔注射东莨菪碱5 mg/kg（0.25mg/mL），10min后进行跳台实验训练。第9天给药20min后进行测试，记录5min内小鼠第一次跳下站台的时间和5min跳下站台的次数。以跳下站台时间（逃避潜伏期，escapelatency）和跳下站台次数（faulttimes）为指标进行统计分析。实验数据用均数±标准差（±s）表示，采用单因素方差分析比较组间差异。

结果如表4所示，与空白组比较，模型组小鼠潜伏期明显减少，具有显著性意义（P＜0.01），同时错误次数明显增加（P＜0.05）。

与模型组比较，骆驼蓬子总生物碱低、中剂量对潜伏期无明显影响。而高剂量时小鼠潜伏期明显增加（P＜0.05）。多奈哌齐组亦无明显差异。所有组别犯错次数均无明显差异。

表4　骆驼蓬子总生物碱对东莨菪碱所致记忆获得性障碍模型的影响（±s）Tab.4 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaonscopolamine-inducedmemoryacquisitionimpairmentinmice（±s）

表4　骆驼蓬子总生物碱对东莨菪碱所致记忆获得性障碍模型的影响（±s）Tab.4 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaonscopolamine-inducedmemoryacquisitionimpairmentinmice（±s）

注：与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05

组别动物数剂量/（mg·kg-1）潜伏期/ s错误次数/次空白组10—230±1100.6±0.8模型组10—22±36**2.1±1.4*多奈哌齐组10310±131.8±1.3骆驼蓬子总生物碱组107107±1141.6±1.4 101462±961.0±0.8 928120±132△1.5±1.5

2.3.4骆驼蓬子总生物碱对亚硝酸钠所致记忆巩固性障碍小鼠的影响 另取昆明种小鼠60只，动物按照“2.3.1”项分组及“2.2.1”项给药方案。第8天给药结束后30min进行跳台训练，训练结束10min后，除空白组腹腔注射生理盐水外，其余各组均注射亚硝酸钠125mg/kg。24h后进行巩固试验，记录5min内小鼠第一次跳下站台的时间和5min跳下站台的次数。以跳下站台时间（逃避潜伏期，escapelatency）和跳下站台次数（fault times）为指标进行统计分析。实验数据用均数±标准差（±s）表示，采用单因素方差分析比较组间差异。

结果如表5所示，与空白组比较，模型组小鼠潜伏期和错误次数均无明显变化（P＞0.05），但潜伏期有减少的趋势。与模型组比较，骆驼蓬子总生物碱对小鼠潜伏期和错误次数无明显影响。多奈哌齐组亦未见明显差异。

3　讨论

学习和认知记忆功能体现了脑的高级整合功能，其功能的减退甚至丧失是脑衰老的一个重要标志，也是阿尔茨海默病的核心症状。目前测定动物学习记忆功能的常用方法主要包括空间学习记忆的测定、主动回避条件反射法和被动回避条件反射法（避暗实验、跳台法）。后者因其方法简单，指标便于观察，实验周期短，所以常被用于药物的筛选［9，11］。

表5　骆驼蓬子总生物碱对亚硝酸钠所致记忆巩固性障碍模型的影响（±s）Tab.5 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on sodium nitrite-induced memory consolidation impairment in m ice（±s）

表5　骆驼蓬子总生物碱对亚硝酸钠所致记忆巩固性障碍模型的影响（±s）Tab.5 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on sodium nitrite-induced memory consolidation impairment in m ice（±s）

组别动物数剂量/（mg·kg-1）潜伏期/ s错误次数/次空白组10—207±107 0.3±0.5模型组10—148±109 1.1±1.1多奈哌齐组10 3 179±97 1.1±1.2骆驼蓬子总生物碱组10 7 181±127 0.7±1.1 9 14 153±128 0.6±0.7 10 28 141±137 0.6±0.5

在学习记忆的过程中，分为记忆的获得、巩固和再现三个阶段，因此可在记忆的不同阶段给予不同的干扰，造成不同的记忆损伤模型。化学性药物导致的记忆障碍大多是某单一神经系统功能障碍所致，比较有利于初步探讨药物的作用机制［12］。因此，本实验采用东茛菪碱、亚硝酸钠以及30%乙醇造成的记忆损伤模型，从多方面评价骆驼蓬对记忆的影响。

东莨菪碱为M-胆碱受体阻断剂，干扰动物学习和记忆的获得，用它来造成记忆获得性障碍模型较为理想。在避暗实验和跳台实验中，骆驼蓬子总生物碱高剂量组均能显著增加东莨菪碱致记忆获得障碍小鼠潜伏期，改善东莨菪碱引起的学习记忆障碍。因此，推测骆驼蓬子总生物碱促进学习记忆的作用可能与增强中枢胆碱能神经系统功能有关。

亚硝酸钠为致缺血缺氧剂，大量的亚硝酸钠进入机体后，可使正常的血红蛋白变为高铁血红蛋白，失去携氧功能，引起组织缺氧［13-14］。因此，一次性腹腔注射亚硝酸钠125 mg/kg是造成小鼠记忆巩固障碍模型的常用方法［15］。实验结果未发现骆驼蓬子总生物碱具有明显的抗脑缺氧能力作用。

中枢神经系统对乙醇敏感，随着进入人体内的乙醇体积分数的增加，皮层下中枢和小脑活动受到抑制，判断力受损，可干扰记忆的再现，故在测试前给予30%乙醇会造成记忆再现障碍［16］。本实验证明骆驼蓬总生物碱高剂量组在避暗实验和跳台实验中均能显著增加30%乙醇致小鼠记忆再生性障碍小鼠潜伏期，不同剂量均明显降低小鼠犯错次数（P＜0.01），明显改善30%乙醇引起的小鼠记忆再生性障碍。但记忆再现是一个复杂的生理过程，乙醇干扰记忆再现的机制也较为复杂［17］，骆驼蓬子总生物碱改善乙醇记忆再现障碍的作用机制还有待于进一步研究。

［1］ 赵 婷，王长虹，王峥涛.骆驼蓬属植物中生物碱类化学成分及其药理活性研究进展［J］.国际药学研究杂志，2010，37（5）：333-339.

［2］ 刘 力，程雪梅，王长虹，等.骆驼蓬总生物碱提取物的质量标准研究［J］.中国医药工业杂志，2010，41（6）：420-423.

［3］ Moura D J，Rorig C，Vieira D L，et al.Effects ofβ-carboline alkaloids on the object recognition task in mice［J］.Life Sci，2006，79（22）：2099-2104.

［4］ Moura D J，RichterM F，Boeira JM，etal.Antioxidant properties of beta carboline alkaloids are related to their antimutagenic and antigenotoxic activities［J］.Mutagenesis，2007，22（4）：293-302.

［5］ Zheng Xiyuan，Zhang Zijia，Chou Guixin，etal.Alkaloids from seeds of Peganum nigellastrum Bunge by an inυitro TLC-bioautographic assay［J］.Arch Pharm Res，2009，32（9）：1245-1251.

［6］ Zhao Ting，Ding Kemin，Zhang Lei，etal.Acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase in hibitory activitiesofβ-carboline and quinoline alkaloids derivatives from the plants of genus Peganum［J］.J Chem，2013，http：//dx.doi.org/10.1155/ 2013/717232.

［7］ Liu Wei，Yang Yadi，Cheng Xuemei，et al.Rapid and sensitive detection of the inhibitive activities of acetyl-and butyrylcholinesterases inhibitors by UPLC-ESI-MS/MS［J］.J Pharm Biomed Anal，2014，94（2014）：215-220.

［8］ 张 磊.骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片的研究［D］.上海：上海中医药大学，2013.

［9］ 王 莹，杨文微，罗菊花.避暗实验测定小鼠学习记忆功能方法的研究［J］.大理学院学报：综合版，2011，10（6）：25-27.

［10］ 赵施施，张科学，包素红，等.丙泊酚对幼小鼠自主活动和学习记忆行为的影响［J］.中国药理学通报，2013，29（2）：198-201.

［11］ 廖伟坚.用跳台法和避暗法观察药物对学习和记忆获得的影响［J］.福建医药杂志，1998，20（4）：117-118.

［12］ 陈秀兰，周艳香，盖晓丹.珠黄镇惊片改善认知功能障碍与促进学习记忆的药效学研究［J］.中医药学学刊，2005，23（9）：1684-1687.

［13］ 刘新霞，赵燕燕，陈春生，等.高良姜不同提取物对小鼠记忆获得，巩固及再现障碍影响的比较［J］.现代预防医学，2010，37（22）：4299-4301.

［14］ Slater T F.Free radicalmechanisms in tissue injury［J］.Biochem J，1984，222（1）：1-15.

［15］ 侯 悦，吴春福，何 祥，等.氟哌啶醇对小鼠在避暗实验中学习记忆获得，巩固和再现过程的影响［J］.中国临床康复，2006，10（34）：99-102.

［16］ 胡 浩，杜克莘，王兴会，等.不同浓度乙醇对小鼠学习记忆功能的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2009，7（3）：316-317.

［17］ Freund G.Chronic central nervous system toxicity of alcohol［J］.Annu ReυPharmacol，1973，13（1）：217-227.

Total alkaloids from the seeds of Peganum harmala ameliorating m ice learning ability and memory

HE Dan-dan1， ZHANG Lei1， LIU Li1， WU Xiao-jun1， CHENG Xue-mei2，WANG Chang-hong1，2*
（1.Institute of Chinese Materia Medica，Shanghai Uniυersity of Traditional Chinese Medicine；The MOE Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicinesand Shanghai Key Laboratory of TCM Complex Prescription，Shanghai201203，China；2.ShanghaiR&DCentre for Standardization of Chinese Medicines，Shanghai201203，China）

AIM To screen the effective fractions（total alkaloids and non-alkaloids）from the seeds of Peganum harmala L.on memory behavior in mice with memory impairment.METHODS The passive avoidance test was used to examine the amelioration on learning andmemory of these total alkaloids and non-alkaloids fractions on micemodels ofmemory acquisition impairment and memory retrieval impairment induced by scopolamine and 30% ethanol.The step-down testwas further used to validate the effects of effective fraction on amelioration of learning and memory ofmicemodels ofmemory acquisition impairment，memory retrieval impairmentandmemory consolidation impairment induced by scopolamine，30%ethanol and sodium nitrite.RESULTS The results of passive avoidance test showed that the total alkaloids showed some amelioration effect on disorders of learning and memory induced by scopolamine and the 30%ethanol（significantly prolong the latent period compared with the model group，P＜0.01）.The results of step-down test also proved that high-dose of total alkaloids was effective on the scopolamine-induced micememory acquisition impairment and the 30%ethanol-induced micememory retrieval im-pairment，but no significant effect on the sodium nitrite-induced mice memory consolidation impairment.CONCLUSION The total alkaloids extract is the effective fractions of the seeds of P.harmala on improvementofmice learning and memory.

Peganum harmala L.；total alkaloids；learning and memory impairment；passive avoidance test；step-down test；Alzheimer's disease

R285.5

A

1001-1528（2015）03-0478-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.03.003

2014-10-25

国家自然基金-新疆联合基金重点项目（U1130303）；国家自然基金项目（81173119）；国家“重大新药创制”科技重大专项（2012ZX0910320-051）；上海市优秀学术带头人计划（13XD1403500）资助

何丹丹，女，硕士生，从事药物制剂与体内过程研究。

王长虹，男，研究员，博士生导师，从事中药新制剂与体内过程研究。Tel：（021）51322511，E-mail：wchcxm@163.com