醇提浓缩法提取蒺藜皂苷的实验研究

曹珍艳，魏冰，李彬（北京康比特运动营养研究所，北京 100020）

醇提浓缩法提取蒺藜皂苷的实验研究

曹珍艳，魏冰，李彬
（北京康比特运动营养研究所，北京 100020）

分别采用醇提浓缩法和水提醇沉法提取蒺藜皂苷，选择紫外分光光度法进行定性定量测定。结果表明醇提浓缩法比水提醇沉法所得产品的皂苷含量高，更有利于工业化生产。

蒺藜皂苷；醇提浓缩法；水提醇沉法

近年来，随着我国体育事业迅速发展，运动员肩负着不断提高体能、增强体力、创造优异运动成绩、挑战人类自身极限的重任。因此，除需要给运动员提供平衡膳食外，还需给运动员增加特殊的运动补剂来平衡运动过程中的物质能量代谢［1］。这些补剂与兴奋剂不同，它们合理的使用对运动员的身体健康和运动能力提高有极大的好处［2］。因此，研究和开发类似的运动补剂成为国内外体育科学研究的热点。

蒺藜是近年来新开发的运动补剂，它对运动能力的提高有显著作用［3］。蒺藜皂苷作为蒺藜的主要有效成分，已有研究表明蒺藜皂苷有助于人体中性激素含量的提升，特别是雄性激素 的含量。雄性激素，特别是睾酮在增强合成代谢，促进运动员恢复，预防运动性疲劳的发生具有重要作用。蒺藜皂苷是一种有效的运动营养品，故将其作为一种良好的运动营养品予以开发和利用很有意义［4］。

本文分别研究醇提浓缩法［5］和水提醇沉法提取蒺藜皂苷工艺［6］，并用紫外分光光度法测定所得产品的皂苷含量，通过对比两种不同的生产方法，优化蒺藜皂苷工业化生产工艺。

1 实验部分

1.1 仪器与试药

仪器：Mettler Toledo电子天平，UV-754紫外-可见分光光度计，提取罐，粉碎机，喷雾干燥塔，HWS-26型电热恒温水浴锅（上海合恒仪器设备有限公司），Millipore 超纯水系统（美国Millipore公司）等。

试药：蒺藜（原药材），六水氯化钴，乙醇，改良对氨基苯甲醛等。

1.2 分析方法

采用紫外分光光度法测定皂苷含量［7］。

标准品溶液：精密称取干燥对照品CoCl2·6H2O 0.600 0g，加水溶解定容至25mL，摇匀，制成对照品溶液。在检测波长（515±2）nm下测得其吸光值A1。

样品溶液：精密称取样品2份，每份500.000 0mg左右，置50mL量瓶中，加40mL甲醇，超声处理30min，放至室温，定容，摇匀，过滤，滤液即为供试品溶液。

表1 提取方法实验结果

样品测定：精密移取样品溶液5mL于10mL具塞刻度试管中，加改良对氨基苯甲醛5mL，密塞摇匀，60℃水浴中2h。冷却至室温，以试剂为空白，在检测波长（515±2）nm下测定吸光度A2。

含量计算方法：

式中：A1为标准品溶液的吸光值；A2为样品溶液的吸光值；V1为标准品溶液的总体积（mL）；V2为样品溶液的总体积（mL）；M1为标准品的称样量（mg）；M2为样品的称样量（mg）。

1.3 实验方法

1.3.1 水提醇沉法

取蒺藜粗粉50g左右，加蒸馏水（固液比1∶10）回流提取3h，趁热过滤，真空浓缩，以蒸馏水定容至50mL，搅拌下缓慢加入95%乙醇500mL，低温沉淀24h后滤去沉淀，真空浓缩至近干，将浓缩浸膏喷雾干燥，将干燥品进行粉碎，过筛。

1.3.2 醇提浓缩法

称取蒺藜粗粉50g左右，投入1L圆底烧瓶中，加入75%乙醇400mL，磁力搅拌下，油浴加热至外温70～75℃，回流1.5h，趁热过滤，将滤饼投入1L圆底烧瓶中，加新的75%的乙醇400mL，重复上述操作两次。将三次的滤液合并，用旋转蒸发仪减压浓缩（真空-0.09～0.1MPa，水温50～55℃，至无溶剂蒸出，得棕色膏状半固体产品。浓缩浸膏喷雾干燥，将干燥品进行粉碎，过筛。

1.4 工业化生产验证

工艺流程：粉粹（粗粉）、提取、浓缩、喷雾干燥。

2 结果与讨论

2.1 提取方法比较

将水提醇沉法所得实验结果与醇提浓缩法所得实验结果进行比较，如表1所示。

从表1可以看出，醇提浓缩法所得产品总皂苷含量高，操作简单易行，适合工业大生产。

2.2 工业化大生产验证

2.2.1 粉粹过筛工艺

采用粉粹过筛工艺进行工业化放大生产试验验证，结果如表2所示。

表2 粉粹工艺

从表2可以看出，粉粹过筛工艺的收率较高，为99.91%，适用于工业化放大生产。

2.2.2 提取工艺

将粗粉各800kg，投入6个提取罐中。每个提取罐分三次提取，每次1.5h，每次用体积分数75%的乙醇4 000L回流提取，温度控制在70～75℃，合并提取液。实验结果如表3所示。

表3 提取工艺

从表3可以看出，用体积分数75%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取效果较好，适用于工业化放大生产。

2.2.3 浓缩工艺

控制浓缩温度为72～78℃，真空度为-（0.06～0.07）MPa，浓缩达到比重为1.10，实验结果如表4所示。

从表4可以看出，真空浓缩工艺适用于工业化放大生产，控制浓缩温度以72～78℃为宜。

表4 浓缩工艺

2.2.4 喷雾干燥工艺

采用喷雾干燥工艺，进行工业化放大生产试验验证，结果如表5所示。

表5 喷雾干燥工艺

从表5可以看出，采用喷雾干燥工艺，最终的总皂苷含量较高，为52.12%，适用于工业化放大生产。

3 结论

综合分析使用醇提浓缩法和水提醇沉法提取蒺藜皂苷所得干浸膏、总皂苷的含量，发现醇提浓缩法比水提醇沉法所得总皂苷含量高。而且通过工业化大生产验证，发现醇提浓缩法更适合于工业化提取蒺藜皂苷，其核心提取工艺为蒺藜粗粉用体积分数75%的乙醇回流提取3次，每次1.5h。蒺藜皂苷是蒺藜中重要的有效成分，因此醇提浓缩法为工业化提取蒺藜皂苷提供了参考数据。

[1] 闫守扶,韩雨梅.运动营养补充品发展现状[J].中国体育科技,2003,39(6):23-24, 27.

[2] 熊正英,李娟,王效良,等.某些运动补剂影响运动能力的研究进展[J].商洛师范专科学校学报,2004,18(2):1-4.

[3] 杨楠.部分运动补剂开发研究进展[J].牡丹江师范学院学报（自然科学版),2009,66(1):25-27.

[4] 于文兵，梁红秀，许衍菊.蒺藜皂苷对大强度训练大鼠血清ALT，AST，CK，LDH，BUN及睾酮的影响[J].南京体育学院学报（自然科学版）,2007,6(2):38-40.

[5] 李瑞海,李君玲,杨松松.蒺藜总皂苷提取工艺研究[J].中国实验方剂学杂志,2006,12(8):1-2.

[6] 宋彦显,闵玉涛.蒺藜皂甙的提取及部分纯化研究[J].中山大学学报,31（2）:170-120.

[7] 殷翔,刘维,严伟民.刺蒺藜皂苷水提工艺研究[J].上海医药,2004,(25)5:231-232.

Experimental Study on Alcohol Extraction Method for Extraction of Saponins from Tribulus Terrestris

CAO Zhen-yan, WEI Bing, LI Bin
(Beijing Kangbite Sports Nutrition Research Institute, Beijing 100020)

Alcohol extraction concentration and water extraction alcohol precipitation method was used to extract saponin from Tribulus terrestris, qualitative and quantitative analysis were carried out by ultraviolet spectrophotometry. The results shows that the saponin content of the product in alcohol extract method is higher than that in concentrated water extraction and alcohol precipitation method, more conducive to industrial production, alcohol extraction method is more suitable for industrial production.

Tribulus Terrestris; Alcohol Extraction Method; Water Extraction and Alcohol Precipitation Method

TQ461

A

2096-0387（2015）01-0026-03

曹珍艳（1982-），女，湖北武汉人，硕士，研发工程师，研究方向：保健食品研发。