视神经脊髓炎患者血清超敏C－反应蛋白的临床意义

齐媛 杨丽 孙丽莎 王静 高春丽 张璘洁

视神经脊髓炎（neuromyelitis optica，NMO）是一种主要累及视神经和脊髓的中枢神经系统炎性脱髓鞘性自身免疫性疾病［1］。目前认为水通道蛋白4抗体（aquaporin－4antibody，AQP4－Ab）与相应受体蛋白结合，激活补体，诱发一系列细胞毒性反应，是NMO的主要致病机制。AQP4－Ab并非在中枢神经系统内自主合成，目前认为其可能是通过炎性损伤的血－脑脊液屏障进入中枢神经系统，因此探寻NMO疾病早期的炎性机制具有重要意义，寻找一个能在早期监测病情的炎性标志物也显得尤为重要。超敏C－反应蛋白（high sensitivity C－reactive protein，hs－CRP）是一种急性时相反应蛋白之一，可以激活补体，释放炎性因子，引发血管内膜损伤，已成为心血管疾病的独立预测因子。目前少有关于NMO患者血清中hs－CRP水平的报道，本研究拟探讨NMO患者血清hs－CRP的水平与疾病临床特点的相关性，期望能为进一步研究提供思路。

1 对象和方法

1.1 观察对象 选取2011－01－2013－07在天津医科大学总医院住院的急性期NMO患者50例为NMO急性期组，其中男7例、女43例，年龄（49.6±13.7）岁，均符合2006年Wingerchuck等修订的诊断标准［2］。MG组为同期住院的因 MG无力症状需大剂量丙种球蛋白冲击治疗的患者30例，男6例、女24例，年龄（51.1±14.3）岁，作为疾病对照组，MG的诊断基于临床表现波动性的肌疲劳，且至少满足下面1个诊断标准：（1）新斯的明试验阳性；（2）低频神经重复电刺激运动波幅衰减＞15%；（3）单纤维肌电图检查出现异常的颤抖和阻滞［3］。健康对照组来自健康查体中心的同时期性别与年龄匹配的58名健康志愿者，男8名、女50名，年龄（49.6±12.5）岁。所有观察对象均除外合并心脑血管疾病、感染、内分泌及其他自身免疫性疾病，各组年龄、性别匹配。所有观察对象均知情同意。

1.2 方法 所有观察对象均于清晨空腹采集静脉血，离心后血清冻存于－80℃冰箱备用。50例NMO急性期患者的静脉血采集于接受大量糖皮质激素治疗前（急性发病7d以内），缓解期患者采集于病情稳定已停用糖皮质激素或泼尼松减量到每天20mg以下维持治疗超过1个月时。MG患者采集于接受大剂量丙种球蛋白治疗前。采用整细胞荧光染色法（cell－based assay，CBA）［4］测 定AQP4－Ab水平，所用质粒由英国牛津大学临床神经科惠赠。血清hs－CRP水平由作者医院检验科采用免疫比浊法全自动生化仪测定，所用试剂购于罗氏公司。

分别比较NMO急性期组、MG组、健康对照组三组之间及NMO急性期与缓解期间血清hs－CRP水平的差异，并分析50例NMO急性期患者血清hs－CRP水平与首发年龄、脊髓MRI受累节段数、扩展残疾状态量表（EDSS）评分、AQP4－Ab水平及复发间隔时间等临床特征之间的相关性。

1.3 统计学处理 采用SPSS17.0软件进行分析。计数资料采用率表示，符合正态分布的计量资料采用均数±标准差（）表示，非正态分布的计量资料以中位数（四分位数间距）表示。其中NMO急性期组、MG组及健康对照组血清hs－CRP水平比较采用单因素方差分析，其中两两比较采用两独立样本t检验，NMO急性期与缓解期血清hs－CRP水平比较采用配对t检验，NMO急性期血清hs－CRP水平与临床特征的相关性采用Spearman相关性分析。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 临床表现 NMO急性期组患者50例〔其中女43例（86%）〕，首发年龄15～80岁，中位数为43.5岁，四分位数间距为21岁；病程0～34年，中位数为2年，四分位数间距为4.25年；脊髓MRI受累节段数为2～18，中位数为6.5，四分位数间距为5；EDSS评分为1.5～8.5分，中位数为4.5分，四分位数间距为3分；AQP4－Ab阳性37例（74%）。NMO缓解期患者31例，其中男4例、女27例（87%），首发年龄15～80岁，中位数为43岁，四分位数间距为22岁；病程0～34年，中位数为2年，四分位数间距为3.75年；脊髓MRI受累节段数为2～18，中位数为7，四分位数间距为4；EDSS评分为1.5～8.5分，中位数为4分，四分位数间距为4分；AQP4－Ab阳性22例（71%）。22例患者在随访期间复发，复发间隔时间为3～33个月，中位数为10个月，四分位数间距为12.75个月。

2.2 各组血清hs－CRP水平比较 NMO急性期组血清hs－CRP水平为（2.2±2.7）mg／L，MG组为（0.8±0.9）mg／L，健康对照组为（0.8±0.9）mg／L，三组间差异有统计学意义（F＝8.834，P＜0.001），其中 NMO 急性期组高于 MG 组（t＝3.204，P＝0.002）及健康对照组（t＝3.508，P＝0.001），MG组、健康对照组间差异无统计学意义（P＝0.936）。

2.3 NMO急性期患者血清hs－CRP水平与临床特点的相关性分析 NMO急性期患者血清hs－CRP水平与患者首发年龄、EDSS评分、脊髓MRI受累节段数、AQP4－Ab水平无相关性（P＞0.05），而其中22例出现临床复发的患者，其急性期血清hs－CRP水平与复发的间隔时间呈负相关（r＝－0.445，P＝0.038），即血清hs－CRP水平越高，患者复发越快（表1）。

表1 NMO患者血清hs－CRP水平与临床特点的相关性

2.4 NMO患者急性期与缓解期血清hs－CRP水平比较 31例患者NMO急性期血清hs－CRP水平〔（2.7±3.2）mg／L〕与 NMO 缓解期〔（1.2±1.3）mg／L〕比较差异有统计学意义（t＝2.797，P＝0.009）。

3 讨论

CRP是五聚体蛋白家族成员之一，是天然免疫系统的重要成分，可以反映较低水平的炎性反应［5］。随着临床检测技术的提高，采用超敏感检测技术检测出更低水平的CRP，于是，将这种用更敏感技术检测的CRP称为hs－CRP。Hs－CRP主要在肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白细胞介素1（IL－1）及IL－6等细胞因子刺激下由肝脏细胞产生，通过与某些细菌或死细胞表面的磷酸胆碱结合，在钙离子存在下形成复合物作用于C1q，激活补体系统，释放炎性介质，促进细胞间黏附，增强吞噬作用［6］。既往研究发现，在血管粥样硬化损害的早期hs－CRP与细胞膜形成的复合体附着在血管内皮细胞，导致血管内皮细胞损伤；hs－CRP还可与脂蛋白结合，激活补体系统，产生大量炎性介质，释放氧自由基，造成血管内膜损伤［7］。另有研究显示，hs－CRP可以增强内皮细胞的通透性，进而破坏血－脑脊液屏障，引起星形胶质细胞的活化，使细胞肥大，增殖活性降低，甚至凋亡［8－9］。目前，少有对 NMO患者血清hs－CRP水平的研究报道，本研究显示NMO急性期患者血清hs－CRP水平显著高于正常对照组且疾病进入缓解期后血清hs－CRP水平显著下降，说明血清hs－CRP水平与其疾病活动性密切相关。

NMO与MG同为抗体介导补体参与的自身免疫性疾病，前者存在中枢神经系统血－脑脊液屏障破坏，而后者并不存在。目前认为，MG为抗体介导补体参与的神经肌肉接头病变，为周围神经系统疾病；NMO为中枢神经系统内抗体介导补体参与的疾病，但目前没有找到其致病性抗体AQP－4抗体产生于中枢神经系统的证据，推测可能产生于外周而通过破坏的血－脑脊液屏障进入中枢神经系统而发生病理损伤。迄今，NMO血－脑脊液屏障破坏的机制还不清楚，本研究结果显示NMO急性期血清hs－CRP水平较MG组及健康对照组均明显增高，而MG组与健康对照组差异无统计学意义，推测hs－CRP可能参与中枢神经系统血－脑脊液屏障破坏过程有关。

综上可见，本研究结果显示NMO患者急性期血清hs－CRP水平较高的患者至下一次复发间隔期较短，提示血清hs－CRP水平越高者其疾病可能越容易复发。本研究也有一些不足之处，受研究例数的限制，本研究结果还需进一步验证。而且目前研究尚不能肯定NMO患者hs－CRP的升高是始动因素还是继发于其他炎性反应，NMO中hs－CRP的作用仍需做进一步的深入研究。

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