反复性自然流产不孕的封闭抗体检验与治疗分析

反复性自然流产不孕的封闭抗体检验与治疗分析

王娜

目的 探究反复性自然流产不孕患者的封闭抗体水平，并对其进行淋巴细胞免疫治疗。方法 选取反复性自然流产不孕患者50例为研究对象，对所有患者进行封闭抗体水平测定，随后给予淋巴细胞免疫治疗，并对治疗后的患者再次进行封闭抗体水平测定，记录患者成功妊娠的情况。结果 50例患者在未进行淋巴细胞免疫治疗前封闭抗体阳性率占比0.0%，均无法正常妊娠，而50例患者经过淋巴细胞免疫治疗后，封闭抗体转为阳性例数37例，封闭抗体阳性率占74.0%，妊娠几率较之前大幅度提高；患者经淋巴细胞免疫治疗后的封闭抗体阳性率相比治疗前显著增多，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 反复性自然流产不孕患者的封闭抗体水平大多为阴性，流产次数较多的患者其抗体阴性率更高，采用淋巴细胞免疫治疗对部分患者的效果较好，能有效促进患者产生封闭抗体，同时提高患者成功妊娠的几率，具有一定的临床借鉴价值。

反复性自然流产；不孕；封闭抗体；淋巴细胞免疫治疗

反复流产是妊娠期妇女常见的一种并发症，在整个已婚妇女中的发病率占到10%[1]，该病受遗传因素、生殖道畸形、内分泌紊乱及感染等因素的影响，目前为止原因不明的因素约有

40%～80%。近年来，随着免疫学研究的深入，临床证实大部分原因不明的反复自然流产与患者的免疫机能相关[2]。本研究对50例反复性自然流产不孕的患者进行封闭抗体测试，同时对其采取淋巴细胞免疫治疗，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年1月～2013年1月山东省淄博市桓台县妇幼保健医院收治的反复性自然流产不孕患者50例为研究对象，对所有患者进行封闭抗体水平测定。患者年龄23～41岁，平均年龄（28.5±4.1）岁；流产次数3～8次，平均（3.5±2.1）次。所有患者均行妇科常规检查，结果提示未见明显异常。本次研究均告知患者及家属，并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 补体依赖细胞毒试验 采用补体依赖细胞毒试验对患者的封闭抗体进行检测，抽取丈夫4mL静脉血，并加入适量肝素抗凝。取等体积抗凝血的淋巴细胞分离液加入试管内，随后将4mL抗凝血沿着试管壁缓慢的加入分离液内，离心0.5h，将淋巴细胞液层轻轻的吸出，使用20倍的生理盐水将淋巴细胞液洗涤3次，并将其浓度调节20×106～40×106/mL。抽取患者的2mL静脉血进行血清分离。

取丈夫的淋巴细胞悬液20μL，并将其加入妻子的20μL血清中，混合均匀后放置于37℃的温水浴中保温0.5h，最后再加入40μL兔补体进行混合，37℃的温水浴中保温1h。加入10μL浓度为2%的台盼蓝，染色10min后进行制片，在光镜下对细胞进行观察，并记录死亡细胞的数量，若死亡细胞超过10%为阳性，反之则为阴性[3]。

1.2.2 淋巴细胞免疫治疗方法 将配偶的外周全血抽取20mL，经过淋巴细胞分离液将其中的淋巴细胞分离出来，并将细胞数调节到20×106～40×106/mL。每过3周给予患者进行免疫注射一次，每次在患者双侧前臂处的多个点进行0.3～0.5mL的注射，持续治疗4次为1个疗程。于最后1次治疗结束后的7～10d进行抗体封闭复查，若复查结果提示升高，则告知患者进行妊娠，若仍未受孕，则以后的每3周加强1次治疗，直达妊娠后的每3周进行1次治疗，一直持续到妊娠的16周。治疗次数为3～14次。

1.3 观察指标 观察患者经免疫治疗后机体封闭抗体水平的变化，并随访患者的妊娠情况[4]。

1.4 统计学方法 本次研究使用SPSS18.0统计学软件对数据进行处理，其中计数资料以“n（%）”表示，采用χ2检验；计量资料用“±s”表示，采用t检验；P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 患者经淋巴细胞免疫治疗后的封闭抗体水平变化治疗前阴性例数为50例，占100.0%，阳性例数为0例，占0.0%；治疗后阴性例数13，占26.0%，阳性例数为37例，占74.0%，与治疗前比较差异有统计学意义（χ2=116.87，P＜0.05）。见表1。

表1 患者经淋巴细胞免疫治疗后的封闭抗体水平变化（n）

2.2 患者经淋巴细胞免疫治疗后的妊娠结局 50例患者经过淋巴细胞免疫治疗后，最终达到妊娠目的的患者33例，妊娠几率高达66.0%。

3 讨论

随着现阶段临床医学对生殖免疫学的深入研究，对于妊娠期孕妇发反复性自然流产的关注度越来越高。原发性习惯性自然流产或与患者对半同种抗原以及胚胎的反应性较低相关[5]，同时机体无法适应妊娠产生的封闭抗体造成胚胎受到排斥，引发流产。妊娠早期就可进行封闭抗体检出，而孕中期时封闭抗体将达到最大值。封闭抗体在体内具有以下特性：（1）妊娠初期时即可对产妇进行检测，其含量会随着妊娠时间的增加而升高，分娩结束数周即可消失[6]；（2）血清中IgG会直接反映封闭抗体的活性[7]；（3）胎盘内IgG活性与血清内的封闭抗体相同；（4）丈夫的B淋巴细胞会将孕妇体内的封闭抗体活性[8]。

采用配偶的淋巴细胞对缺乏封闭抗体的患者进行免疫治疗，其目的在于淋巴细胞可对母体进行刺激并诱导母体产生同种免疫反应，使其产生封闭抗体保护母体，防止胚胎或是胎儿因父系的抗原引发母系免疫系统对其进行识别与杀伤，最终起到产生免疫的作用，提高患者再次妊娠的成功率[9]。本研究对50例患者进行封闭抗体检验，结果显示，患者在治疗前抗体均呈（-），而经过淋巴细胞免疫治疗后其抗体转化为（+）的共37例，相比治疗前差异具有统计学意义（P＜0.05），而最终妊娠成功的患者共有33例。

综上所述，采用配偶的淋巴细胞进行免疫治疗不仅能有效提高患者的免疫功能，增加体内的封闭抗体含量，同时方法简单，技术要求相对简便，发生交叉感染的危险系数低，患者再次成功妊娠的几率高，是一种值得临床借鉴的治疗方法。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.28.026

山东 256400 山东省淄博市桓台县妇幼保健医院检验科 （王娜）