表型相同不同基因型耳聋夫妇的遗传咨询

段玲 韩锐 湃孜莱提·哈斯木

（新疆医科大学第一附属医院 产前诊断室，新疆维吾尔自治区 乌鲁木齐市 830054）

耳聋是影响人类健康和致残的常见病，据各国统计平均每1000个新生儿中就有1个耳聋儿[1］。经过全国耳聋分子流行病学调查研究显示[2，3］，GJB2、SLC26A4、线粒体DNA 12SrRNA的1555和1494这3个基因的致病突变是造成遗传性耳聋的主要病因。由于耳聋发病率较高，这让很多耳聋患者家庭陷入两难：一方面聋哑夫妻双方生育聋儿风险较正常人群高；另一方面聋哑夫妻比正常人更希望有一个健康的孩子。对于环境因素导致的耳聋，可以通过预防感染和加强孕期围产期的保健，避免应用耳聋性药物等措施有效地预防。对于遗传性耳聋的预防，明确耳聋致病基因是关键，同时对耳聋患者家庭的遗传咨询是十分重要的，关系到我国优生优育的人口政策执行，关系到我国社会长远发展的战略需求。

1 研究对象和方法

1.1 研究对象 2014年1月至2014年12月共有3个耳聋家庭来遗传咨询门诊就诊，3个家庭的夫妇均为聋哑人。测听显示受检查均为重度到极重度耳聋个体，3个家庭均为首次生育需求，3个家庭的父母均听力正常。

1.2 研究方法

1.2.1 DNA提取方法 采集受检者外周血2～3ml，应用试剂盒（北京天根生化科技有限公司）提取全血DNA，提取步骤参照试剂盒提供的使用说明进行。取2μl基因组DNA经紫外分光光度计进行浓度和纯度检测，其余保存于－20℃备用。

1.2.2 耳聋基因芯片检测 应用遗传性耳聋基因芯片检测试剂盒（博奥生物有限公司的芯片（Microarray）技术对GJB2、SLC26A4、线粒体12SrRNA和GJB3四个耳聋相关基因的9个致聋突变位点进行检测。检测的遗传性耳聋基因突变热点包括GJB2基因的35、176、235及299位点，SLC26A4基因的2168和IVS7－2位点，线粒体12SrRNA基因的1494和1555位点，以及GJB3基因的538位点。该试剂盒以基因组DNA为模板，采用带有Tag标签序列的基因位点特异性引物对相关突变位点所在的基因片段进行扩增和荧光标记，然后将扩增产物与能够识别相应标签序列的基因芯片进行杂交，通过微阵列芯片扫描仪对芯片进行扫描，最后将扫描结果进行判定和数据分析得到9个突变位点的检测结果。

2 结 果

3个家庭耳聋基因检测结果见表1。

表1 3个家庭耳聋基因检测结果

3 讨 论

通过我们耳聋家系的基因检测及大量的研究表明，耳聋致病基因虽然具有较高的基因和位点异质性，但大部分非综合征性聋多由少数几个热点基因突变引起，包括 GJB2基因、GJB3基因、SLC26A4基因、线粒体12Sr RNA基因等，这使遗传性聋的筛查成为可能，加上基因芯片技术的日益成熟，耳聋基因筛查在世界范围内得到关注[4－7］。以往多用限制性酶切、测序、斑点杂交或基因扫描技术进行分子诊断，近年来耳聋芯片检测作为新生技术正在遗传性耳聋基因诊断中发挥重要作用，这几种诊断技术都各有利弊。与传统的检测方法相比，它具有快速、高通量、高准确性、低成本等特点。更重要的是它可以同时检测多突变位点，这是传统方法无法解决的问题。目前国内有多家医院陆续开展了这方面的应用研究[8，9］。

如何向有遗传咨询要求的耳聋夫妇提供准确的遗传信息和指导，一直是遗传学工作者面临的难题。耳聋的致残因素很多，不能确定病因的耳聋遗传咨询，很难确定遗传模式以及预测再发风险。本研究3对耳聋家庭，耳聋夫妇双方虽然表型相同，但遗传咨询与指导的内容应根据病因的不同而有所差异。

3.1 1号家庭 夫妇双方为聋哑人，夫妇二人的耳聋基因检测结果显示男方检测出是SLC IVS 7－2A＞G杂合突变，女方检测出是12SrRNA 1555A＞G均质突变，男方为先天性耳聋，女方为药物致聋。如果男方是单基因的遗传性耳聋，那么他肯定携带SLC基因未检测到的罕见位点突变，才会表现出耳聋的症状。由于检测采用的是芯片筛查的方法，没有获得SLC基因的全长，因此对于该对夫妇的指导意见如下：

3.1.1 男方经过测序确认携带SLC基因其他芯片筛查位点以外的罕见位点突变，女方SLC基因测序无突变，则后代SLC基因导致的耳聋发病率为0，携带率为1/4。

3.1.2 男方经过测序确认携带SLC基因其他芯片筛查位点以外的罕见位点突变，女方SLC基因测序也携带同样的罕见位点杂合突变，则后代发病率1/4，正常率1/4，携带率1/2。

3.1.3 女方为12SrRNA 1555A＞G均质突变，那么她的后代也为12SrRNA 1555A＞G均质突变，后代因其遵循母子遗传方式100%的可能为12SrRNA 1555A＞G均质突变的携带者，男女携带均等，携带此突变个体对氨基糖苷类抗生素极为敏感。小剂量使用即可导致重度听力损失，做好用药指导，其后代应终身绝对禁止使用氨基糖苷类抗生素，避免耳聋的发生。[10］

3.2 2号家庭 夫妇双方为聋哑人，夫妇二人的耳聋基因检测结果显示男方检测出是GJB2 35delG杂合突变，女方检测出是GJB2 35delG、SLC IVS 7－2A＞G杂合突变，男女双方均为先天性耳聋。如果确定男女双方都是遗传性耳聋的话，那么男方肯定携带有芯片检测以外的GJB2罕见位点的突变才会导致耳聋，目前尚没有文章报道同时携带GJB2 35delG、SLC IVS 7－2A＞G杂合突变会致病的的先例，因此如果女方为先天性遗传性耳聋那么女方肯定携带有芯片检测以外的GJB2罕见位点或者是SLC罕见位点的突变才会导致耳聋。因此针对这对夫妻遗传指导意见比较复杂。

3.2.1 假如夫妻双方都携带GJB2的罕见致病突变，那么后代发病率为100%。如果一个带有罕见致病突变，另一个没有，那么发病率为1/2，携带率1/2。如果两人都不携带GJB2的罕见致病突变那么发病率为1/2，正常率1/4。

3.2.2 女方携带SLC突变，如果她是这个基因导致的耳聋那么她很可能携带一个罕见位点突变，男方如果SLC基因全测序完全正常的话后代SLC致聋风险为0，如果男方SLC测序有其他致病突变，则后代发病率1/4，携带率1/2，正常1/4。

3.3 3号家庭 夫妇双方为聋哑人，夫妇二人的耳聋基因检测结果显示芯片筛查双方均未检测出突变。由于夫妻双方均为后天性耳聋，夫妇二人的耳聋基因检测结果显示，均未携带GJB2、SLC26A4、12SrRNA、CJB3基因突变。此结果可排除中国人最常见的9个耳聋基因位点突变。但不能排除其他少见耳聋基因位点存在突变，建议夫妇双方耳聋患者进一步进行SLC 26A4（PDS）基因全序列分析。另一方面也可能提示二人环境因素致聋可能性存在，如这样其后代患遗传性耳聋的风险大大降低，即使存在较少但耳聋基因导致耳聋的可能性。但父母同时成为少见致聋基因携带者的可能性非常低，对后代的风险预值正常大于不正常。

通过本研究中的3个家庭，有2个聋哑夫妇家庭检测出有常见耳聋致病基因的突变，一个家庭未检测出常见的耳聋致病基因突变。针对目前的检测结果我们只能给出可能的生育风险分析，为聋哑夫妇家庭生育孩子提供一些初步的指导。本研究的不足之处在于未对基因芯片检测结果进行测序验证突变检测结果的准确性，因此未能给出聋哑夫妇明确的耳聋原因。建议这些聋哑夫妇家庭在孕前一定要明确耳聋原因，避免听力障碍孩子的出生。

我国听力语言残疾者甚众，并以每年3万耳聋的速度增长[11］，耳聋出生缺陷也是影响我国出生人口素质的重要问题之一。随着我国对遗传性耳聋认识的深入，耳聋基因筛查与遗传咨询逐渐成为明确耳聋病因，预防遗传性耳聋的主要手段之一。

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[2]戴朴，刘新，于飞，等.18个省市聋校学生非综合征性聋病分子流行病学研究—GJB2 235del C和线粒体DNA 12Sr RNA A1555G 突变筛查报告[J］.中华耳科学杂志，2006，4（1）：1－5.3.

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[10]韩冰，戴朴，王国建.相同表型不同基因型耳聋夫妇家庭的遗传咨询与指导[J］.中华耳鼻喉头颈外科杂志，2007，7，42（7）：499－503.

[11]黄莎莎，王国建.43例耳聋家庭再生育前的遗传分析与指导[J］.中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2011，11，46（11）：909－913.