气相色谱-质谱法测定香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量*

吴丹，张辰辰，杨继章，刘红淼

(河北医科大学第一医院药剂科，石家庄 050031)

气相色谱-质谱法测定香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量*

吴丹，张辰辰，杨继章，刘红淼

(河北医科大学第一医院药剂科，石家庄 050031)

目的 建立气相色谱-质谱法测定香桂化浊胶囊中桂皮醛含量。方法 采用HP-5弹性石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，载气：氦气，流速：1.0 mL·min-1，分流比：50：1，程序升温，进样量1.0 μL。结果 香桂化浊胶囊中桂皮醛和其他成分的分离度良好，在0.02～4.00 mg·mL-1范围内线性关系良好，相关系数为0.999 4。桂皮醛的平均加样回收率为96.2%，RSD<2.11%。结论 该方法操作简便，定量准确，适用于香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量测定。

香桂化浊胶囊；桂皮醛；气相色谱-质谱法；含量测定

香桂化浊胶囊处方为河北医科大学第一医院临床应用多年的经验方，由肉桂、土大黄、广藿香等组成。具有芳香醒脾、清化湿浊之功。主治因各种疾病后邪留未尽、脾胃内伤所致长期大便溏泄或有黏液、腹胀肠鸣、纳呆或有低热、舌苔白腻或白滑或见微黄、脉濡缓；主要用于慢性肠炎、真菌感染致肠炎证属脾虚湿困的治疗。关于本方制剂工艺、HPLC-PDA指纹图谱、毒理学研究及该胶囊中百秋里醇、大黄素的含量测定已有报道[1-8]。鉴于香桂化浊胶囊在化学组成上是一个复杂体系，其主要的挥发油成分为桂皮醛和广藿香醇，关于广藿香醇的气相色谱研究已有报道[3]，为更好控制香桂化浊胶囊的质量，完善其检测标准，笔者在本实验采用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS)法[9-11]，建立香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量测定方法。

1 仪器与材料

1.1 仪器 7890-5975N型气相色谱-质谱仪(美国Agilent公司 )；7890-5975N型弹性石英毛细管色谱柱(美国Agilent Technologies公司)；BS210S型电子分析天平(北京赛多利斯天平有限公司，量程：210 g，分度值：0.1 mg)；套式恒温器(浙江新华医疗器械厂)；KQ2200E型超声波清洗仪(频率：40 kHz，功率：100 W，昆山市超声仪器有限公司)，EYELA 旋转薄膜蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司)。

1.2 试药 乙酸乙酯(天津市凯通化学试剂有限公司，色谱纯)，其他试剂均为分析纯。香桂化浊胶囊(河北医科大学第一医院制剂室，批号：120607，120611，120625)。桂皮醛对照品(四川省维克奇生物科技有限公司，批号：101114，纯度：≥98%)。

2 方法与结果

2.1 GC-MS条件 HP-5弹性石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm) ；载气：氦气，流速：1.0 mL·min-1，分流比：50：1；采用程序升温：起始温度100 ℃，保持2 min，以3 ℃·min-1升到 130 ℃，保持5 min，再以10 ℃·min-1升到210 ℃ ，保持 5 min；进样口温度230 ℃ ，进样量1.0 μL；电子轰击(EI)离子源，离子源温度230 ℃，电子能量70 eV；柱前压65.072 kPa；四级杆质量分析器；扫描方式：全扫描；质核比范围：10～400 amu。

2.2 溶液的配制

2.2.1 对照品溶液的配制 取桂皮醛对照品20.031 8 mg精密称定，置25 mL 量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的配制 取1粒胶囊内容物，精密称定0.391 7 g，加乙酸乙酯20 mL，超声30 min，过滤，旋蒸至残留液3 mL，转移至10 mL量瓶，用乙酸乙酯稀释至刻度。过筛孔内径0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，摇匀作供试品溶液。

2.3 方法学验证

2.3.1 系统适用性实验与专属性实验 在上述色谱条件下，分别吸取对照品溶液、供试品溶液各1.0 μL，注入气质联用仪，色谱图见图 1。桂皮醛与其他成分分离良好，分离度> 1.5，理论板数>50 000。

2.3.2 线性关系考察 精密量取对照品溶液 0.25，0.5，1.0，2.0，2.5，5.0 mL置 10 mL量瓶中，分别用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀得 1～6号工作液。在上述色谱条件下，吸取1.0 μL，注入气质联用仪，记录色谱峰面积。以桂皮醛成分峰面积(Y)为纵坐标，浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线。得线性回归方程Y=281 786C+2×106，r=0.999 4，桂皮醛在0.02～4.00 mg·mL-1范围内线性关系良好。

2.3.3 检测限和定量限 取线性最低点对照品溶液对倍稀释，以S/N=3计，桂皮醛最低检测限为0.75 μg·mL-1，以S/N=10计，桂皮醛定量限为2.51 μg·mL-1。

2.3.4 精密度实验 取 “2.2.2”项供试品溶液，重复进样 6次，计算桂皮醛的色谱峰峰面积RSD为1.64%，表明该方法精密度良好。

2.3.5 稳定性实验 取 “2.2.2”项供试品溶液，在制备后 0，2，4，8，12，24 h进样，桂皮醛色谱峰峰面积的RSD为1.76%，表明桂皮醛供试品溶液在 24 h内稳定。

2.3.6 重复性实验 取同一批号的香桂化浊胶囊，按“2.2.2”项制备供试品溶液6份，按上述色谱条件进行测定，桂皮醛含量的RSD为1.81%，表明该方法的重复性良好。

2.3.7 加样回收率实验 取已知桂皮醛含量的同一批号样品6份，每份约0.08 mg，加入对照品溶液(每毫升含桂皮醛0.1 mg) 1 mL，按 “2.2.2”项方法配制溶液，分别进样测定，计算加样回收率。桂皮醛的回收率为96.2%，RSD为2.11%。

2.4 样品含量测定 按 “2.2.2”项下方法制备 3批供试品溶液，进样1.0 μL，每份样品进样 3次，以标准曲线法计算香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量。样品含量测定结果见表1。根椐此结果，同时考虑药材的来源以及制剂生产、贮藏等因素，以每粒胶囊0.39 g装量计，暂定本品每粒含桂皮醛不得少于 0.48 mg。

表1 香桂化浊胶囊中桂皮醛成分的含量测定结果

Tab.1 Content determination of cinnamic aldehyde inXiangguiHuazhuocapsulesn=3

3 讨论

本研究采用GC-MS法对香桂化浊胶囊中的桂皮醛含量进行测定，通过对色谱和质谱条件的优化，比较不同流速、柱温等，确定了测定香桂化浊胶囊中桂皮醛含量的方法，大大提高定量结果的可靠性和准确性。

香桂化浊胶囊中含有桂皮醛、百秋李醇、长叶醛、甘菊蓝、邻甲氧基桂皮醛等多种挥发性成分，其极性和沸点相差较大，本实验采用程序升温法，在较短的时间内保证溶剂乙酸乙酯和其他低极性、低沸点成分达到良好分离。

A.阴性对照品；B.桂皮醛对照品；C.桂皮醛供试品；1.桂皮醛；2.百秋李醇；3.长叶醛

A.negative control；B.cinnamic aldehyde control；C.sample of cinnamic aldehyde；1.cinnamic aldehyde；2.patchouli alcohol；3.Long leaf aldehyde

Fig.1 The gas chromatogram of cinnamic aldehyde of negative reference substance, reference substance and sample

本研究所建立的GC-MS分析色谱条件，精密度、稳定性、重复性良好，采用HP-5毛细管气相色谱法测定香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量，该方法操作简便、重复性好、专属性强、准确可靠，可作为香桂化浊胶囊中桂皮醛的质量控制。

[1] 刘红淼，姜少灏，张振杰，等.正交实验优选香桂化浊胶囊中挥发油的包合工艺[J].中国药房，2010，21(47)：4449-4450.

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[6] 刘红淼，李艳玲，杨继章，等.香桂化浊胶囊毒理学研究[J].医药导报，2013，32(2)：159-162.

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[9] 董岩，魏兴国，刘明成.肉桂挥发油化学成分的CG/MS分析[J].齐鲁药事，2004，23(3)：34-35.

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DOI 10.3870/yydb.2015.03.025

Determination of Cinnamic Aldehyde Content inXiangguiHuazhuoCapsules by Gas Chromatography-Mass Spectrometry

WU Dan, ZHANG Chenchen, YANG Jizhang, Liu Hongmiao

(DepartmentofPharmacy,theFirstHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050031,China)

Objective To establish a method for determining cinnamic aldehyde content inXiangguiHuazhuocapsules by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Methods The content of cinnamic aldehyde was determined by GC-MS.Separation was performed on a capillary column (30 m×0.25 mm, 0.25 μm) with HP-5 as the stationary phase.A programmed temperature was employed.The flow rate was 1 mL·min-1with He as carrier gas, and split ratio was 50：1.The injection volume was 1.0 μL. Results The cinnamic aldehyde was well isolated from the other ingredients.A good linear relationships of cinnamic aldehyde in range of 0.02-4.00 mg·mL-1was observed.The correlation coefficient was 0.999 4.The average recovery of cinnamic aldehyde was 96.2%, and RSD was less than 2.11%. Conclusion The method is simple, accurate and suitable for determination of cinnamic aldehyde content.

XiangguiHuazhuocapsules; Cinnamic aldehyde; Gas chromatography-mass spectrometry; Content determination

2014-02-23

2014-06-11

*河北省中医药管理局科研计划课题资助项目(2013007)

吴丹(1989-)，女，河北保定人，硕士，研究方向：药剂学。E-mail：1066912424@qq.com。

杨继章(1957-)，男，河北邢台人，主任药师，教授，硕士研究生导师，研究方向：药物新剂型、药物稳定性。电话：0311-85917352，E-mail：yjzh1957@163.com。

R286；R927.2

B

1004-0781(2015)03-0376-03